| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-15页 |
| 缩略语(Abbreviations) | 第15-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-21页 |
| ·氟虫腈对人畜的安全性及对昆虫的高效性 | 第17-18页 |
| ·氟虫腈对鱼类等水生生物的严重毒性 | 第18页 |
| ·1,4-苯二氮卓类化合物在鱼类GABAA受体研究中的应用 | 第18页 |
| ·1,4-苯二氮卓化合物在分离哺乳动物GABAA受体的应用 | 第18-19页 |
| ·1,4-苯二氮卓化合物荧光探针与哺乳动物GABAA受体相互作用研究 | 第19页 |
| ·配体-受体相互作用的计算机模拟 | 第19页 |
| ·本课题的研究意义 | 第19-21页 |
| 第二章 文献综述 | 第21-44页 |
| ·GABA受体分类 | 第21页 |
| ·GABAA受体的分子结构和分布特点 | 第21-24页 |
| ·GABAA受体分子结构 | 第21-23页 |
| ·GABAA受体亚单位及分布 | 第23页 |
| ·GABAA受体的活性部位 | 第23-24页 |
| ·氟虫腈及对不同生物的毒性差异 | 第24-25页 |
| ·GABAA受体与配体的相互作用的研究手段 | 第25-35页 |
| ·放射性标记法研究受体与配体的相互作用 | 第25-28页 |
| ·荧光探针法研究受体与配体的相互作用 | 第28-31页 |
| ·计算模拟技术研究GABAA受体与配体的相互作用 | 第31-32页 |
| ·相关计算机模拟方法简介 | 第32-35页 |
| ·同源模建（homology modeling） | 第32-33页 |
| ·分子动力学 | 第33-35页 |
| ·分子对接 | 第35页 |
| ·GABAA受体分离纯化研究 | 第35-42页 |
| ·去污剂对GABAA受体蛋白分离的影响 | 第36-39页 |
| ·GABAA受体的纯化方法 | 第39-42页 |
| ·亲和层析法在哺乳动物GABAA受体纯化中的应用 | 第39-40页 |
| ·其他分离方法在哺乳动物GABAA受体纯化中的应用 | 第40-42页 |
| ·亲和层析法在鱼类GABAA受体纯化中的应用 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-44页 |
| 第三章 设计思想与合成路线 | 第44-51页 |
| ·本研究的总体设计思想 | 第44-45页 |
| ·1,4-苯二氮卓化合物RO7及洗脱剂合成路线设计 | 第45-46页 |
| ·荧光探针合成路线设计 | 第46-47页 |
| ·1,4-苯二氮卓化合物RO7荧光探针合成路线设计 | 第46页 |
| ·氟虫腈荧光探针合成路线设计 | 第46-47页 |
| ·计算机模拟技术研究氟虫腈与鱼类GABAA受体的相互作用设计 | 第47页 |
| ·亲和基质琼脂糖-二氧化硅亲和载体的制备路线设计 | 第47-48页 |
| ·非磁性二氧化硅微球路线设计 | 第47-48页 |
| ·实心和空心磁性二氧化硅微球的制备路线设计 | 第48页 |
| ·琼脂糖-二氧化硅亲和载体制备过程设计 | 第48页 |
| ·亲和层析介质的制备 | 第48-49页 |
| ·1,4-苯二氮卓化合物RO7亲和层析介质的制备路线设计 | 第48-49页 |
| ·氟虫腈亲和层析介质的制备路线设计 | 第49页 |
| ·鱼类GABAA受体的亲和分离实验设计 | 第49-51页 |
| 第四章 1,4-苯二氮卓类化合物RO7及氟西泮的合成 | 第51-68页 |
| ·实验部分 | 第52-57页 |
| ·实验试剂 | 第52页 |
| ·实验仪器与设备 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-57页 |
| ·N-苄氧羰基3碘乙胺的制备 | 第52-53页 |
| ·1,4-苯二氮卓化合物RO7的制备 | 第53-56页 |
| ·1.4-苯二氮卓化合物Ⅱ（氟西泮）的制备 | 第56-57页 |
| ·结果与讨论 | 第57-67页 |
| ·化合物最优合成条件筛选 | 第57-63页 |
| ·化合物3最优制备条件筛选 | 第57-58页 |
| ·化合物4最优制备条件筛选 | 第58-60页 |
| ·N-苄氧羰基3碘乙胺最优制备条件筛选 | 第60-61页 |
| ·1,4-苯二氮卓化合物RO7盐酸盐最优制备条件筛选 | 第61页 |
| ·1,4-苯二氮卓化合物Ⅱ氟西泮最优制备条件筛选 | 第61-63页 |
| ·化合物图谱分析 | 第63-67页 |
| ·N-苄氧羰基3碘乙胺的红外光谱图谱分析 | 第63-64页 |
| ·化合物1的红外光谱图谱分析 | 第64页 |
| ·化合物2的红外光谱图谱分析 | 第64-65页 |
| ·化合物3的红外光谱图谱分析 | 第65-66页 |
| ·1,4-苯二氮卓化合物RO7的红外光谱图谱分析 | 第66-67页 |
| ·1,4-苯二氮卓化合物氟西泮红外光谱图谱分析 | 第67页 |
| ·结论 | 第67-68页 |
| 第五章 荧光探针法研究 1,4-苯二氮卓化合物与鱼类GABAA受体的相互作用 | 第68-79页 |
| ·实验部分 | 第69-72页 |
| ·实验动物 | 第69页 |
| ·实验试剂 | 第69页 |
| ·实验仪器与设备 | 第69页 |
| ·实验方法 | 第69-72页 |
| ·RF荧光探针的制备 | 第69-70页 |
| ·组织膜受体制剂的制备 | 第70页 |
| ·荧光配体RF与组织膜受体制剂的结合实验 | 第70-72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-78页 |
| ·产物的结构鉴定 | 第72页 |
| ·光学性能检测分析 | 第72-74页 |
| ·不同溶剂体系对荧光配体荧光强度的影响 | 第74-75页 |
| ·受体与配体结合的动力学分析 | 第75-77页 |
| ·GABA竞争性结合实验分析 | 第77-78页 |
| ·结论 | 第78-79页 |
| 第六章 荧光探针法研究氟虫腈与鱼类GABAA受体的相互作用 | 第79-90页 |
| ·实验部分 | 第80-82页 |
| ·实验动物 | 第80页 |
| ·实验试剂 | 第80页 |
| ·实验仪器与设备 | 第80-81页 |
| ·实验方法 | 第81-82页 |
| ·FF荧光探针的制备 | 第81页 |
| ·受体膜制剂的制备 | 第81-82页 |
| ·荧光配体FF与受体膜制剂的结合实验 | 第82页 |
| ·结果与讨论 | 第82-89页 |
| ·产物的结构鉴定 | 第82-83页 |
| ·光学性能检测分析 | 第83-85页 |
| ·不同溶剂体系对荧光配体荧光强度的影响 | 第85-86页 |
| ·受体与配体结合的动力学分析 | 第86-89页 |
| ·结论 | 第89-90页 |
| 第七章 计算机模拟技术研究氟虫腈与鱼类GABAA受体的相互作用 | 第90-111页 |
| ·实验部分 | 第91-93页 |
| ·同源模建 | 第91-93页 |
| ·选择序列 | 第91-92页 |
| ·选择模板 | 第92页 |
| ·亚基构建 | 第92页 |
| ·将模型进行有效组合 | 第92页 |
| ·模型的优化与修正 | 第92页 |
| ·氟虫腈与受体模型结合活性.袋的确定 | 第92-93页 |
| ·氟虫腈及氟虫腈荧光探针分子与受体模型对接 | 第93页 |
| ·结果与讨论 | 第93-109页 |
| ·斑马鱼GABAA受体同源建模 | 第93-96页 |
| ·氟虫腈及氟虫腈荧光探针分子与斑马鱼GABAA受体模型的对接 | 第96-100页 |
| ·氟虫腈与斑马鱼GABAA受体模型的对接 | 第96-98页 |
| ·氟虫腈荧光探针分子与受体模型的对接 | 第98-100页 |
| ·氟虫腈代谢产物与斑马鱼GABAA受体模型的对接分析 | 第100-106页 |
| ·氟虫腈与大鼠GABAA受体相互作用 | 第106-109页 |
| ·哺乳动物大鼠GABAA受体同源建模 | 第106-108页 |
| ·氟虫腈与大鼠GABAA受体模型的对接 | 第108-109页 |
| ·结论 | 第109-111页 |
| 第八章 琼脂糖-二氧化硅亲和载体的制备 | 第111-134页 |
| ·实验部分 | 第112-116页 |
| ·实验试剂 | 第112页 |
| ·实验仪器与设备 | 第112页 |
| ·实验方法 | 第112-116页 |
| ·无磁性实心单分散二氧化硅微球的制备 | 第112-113页 |
| ·实心磁性二氧化硅微球的制备 | 第113页 |
| ·空心磁性二氧化硅微球的制备 | 第113页 |
| ·琼脂糖-二氧化硅复合粒子的制备 | 第113-114页 |
| ·琼脂糖-二氧化硅复合粒子表面的环氧化 | 第114页 |
| ·反应温度对环氧基密度的影响 | 第114页 |
| ·反应时间对环氧基密度的影响 | 第114页 |
| ·环氧活化剂用量对环氧基密度的影响 | 第114-115页 |
| ·DMSO及NaOH浓度对环氧基密度的影响 | 第115页 |
| ·环氧基密度的测定 | 第115页 |
| ·样品表征 | 第115-116页 |
| ·结果与讨论 | 第116-133页 |
| ·非磁性单分散二氧化硅微球的制备过程 | 第116-120页 |
| ·非磁性二氧化硅微球的形成机理 | 第116页 |
| ·非磁性二氧化硅微球形貌分析 | 第116-120页 |
| ·磁性二氧化硅微球的制备过程机理分析 | 第120-128页 |
| ·磁性二氧化硅微球形貌及结构表征 | 第121-128页 |
| ·琼脂糖-二氧化硅复合粒子的形貌表征 | 第128-129页 |
| ·琼脂糖-二氧化硅复合粒子表面琼脂糖环氧活化剂活化效率的影响因素分析 | 第129-133页 |
| ·DMSO和NaOH浓度对环氧活化剂活化率的影响 | 第129-130页 |
| ·反应温度对环氧活化剂活化率的影响 | 第130-131页 |
| ·反应时间对环氧活化剂活化率的影响 | 第131-132页 |
| ·活化剂浓度对环氧活化剂活化率的影响 | 第132页 |
| ·环氧基偶联密度的确定 | 第132-133页 |
| ·结论 | 第133-134页 |
| 第九章 亲和层析介质的制备及鱼类GABAA受体纯化分离初探 | 第134-153页 |
| ·实验部分 | 第134-144页 |
| ·实验试剂 | 第134-135页 |
| ·实验仪器与设备 | 第135页 |
| ·缓冲液的配制 | 第135-136页 |
| ·实验动物 | 第136页 |
| ·实验方法 | 第136-144页 |
| ·1,4-苯二氮卓类化合物Ro7亲和层析介质的制备 | 第136-137页 |
| ·氟虫腈亲和层析介质的制备 | 第137-140页 |
| ·氟虫腈亲和配体的合成 | 第137-140页 |
| ·鱼类GABAA受体的亲和分离 | 第140-144页 |
| ·结果与讨论 | 第144-152页 |
| ·氟虫腈亲和配基的制备及最优反应条件的筛选 | 第144页 |
| ·不同反应因素对环氧活化琼脂糖凝胶氨化率的影响 | 第144-145页 |
| ·不同反应因素对氟虫腈亲和配基的偶联率的影响 | 第145页 |
| ·RO7及氟虫腈亲和配基偶联密度的测定 | 第145-146页 |
| ·不同去污剂对GABAA受体蛋白溶出量分析 | 第146-147页 |
| ·苯二氮卓RO7亲和层析及离子交换层析分离纯化鲢鳙脑内GABAA受体 | 第147-150页 |
| ·分离受体蛋白的SDS-PAGE凝胶电泳 | 第149页 |
| ·蛋白回收率的计算 | 第149-150页 |
| ·氟虫腈亲和层析及离子交换层析分离纯化鲢鳙脑内GABAA受体 | 第150-152页 |
| ·分离受体蛋白的SDS-PAGE凝胶电泳 | 第151-152页 |
| ·蛋白回收率的计算 | 第152页 |
| ·结论 | 第152-153页 |
| 第十章 结论与展望 | 第153-156页 |
| ·本论文的主要创新点 | 第153页 |
| ·本论文取得的主要研究结论 | 第153-155页 |
| ·下一步工作计划 | 第155-156页 |
| 参考文献 | 第156-180页 |
| 致谢 | 第180-181页 |
| 附录 | 第181-187页 |
| F-1 合成中间体及目标产物的1H NMR谱图 | 第181-184页 |
| F-2 攻读博士期间发表的论文及申请专利 | 第184-185页 |
| F-3 攻读博士期间参与的科研项目 | 第185-186页 |
| F-4 攻读博士期间获得的奖励 | 第186-187页 |
