| 摘要 | 第1-8页 |
| abstract | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| ·丹参的药用价值及研究现状 | 第13页 |
| ·植物MAPK的研究进展 | 第13-19页 |
| ·MAPK级联途径的基本组成 | 第13-14页 |
| ·MAPK的结构特点及分类 | 第14页 |
| ·植物MAPK的功能 | 第14-19页 |
| ·选题目的及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 MAPK基因的克隆及生物信息学分析 | 第21-39页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·材料来源 | 第21页 |
| ·丹参悬浮细胞培养 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-30页 |
| ·RNA的提取及质量检测 | 第22页 |
| ·总RNA质量检测 | 第22页 |
| ·cDNA中间片段的克隆 | 第22-25页 |
| ·3’-RACE的扩增 | 第25-26页 |
| ·5’-RACE的扩增 | 第26-29页 |
| ·丹参MAPK基因ORF序列的扩增 | 第29-30页 |
| ·生物信息学分析所用软件 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-37页 |
| ·丹参MAPK基因全长序列的获得 | 第30-31页 |
| ·丹参MAPK的生物信息学分析 | 第31-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第三章 丹参MAPK基因的表达分析 | 第39-46页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·材料来源 | 第39页 |
| ·丹参悬浮细胞的培养 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-41页 |
| ·诱导剂的制备 | 第39页 |
| ·丹参悬浮细胞的诱导处理 | 第39-40页 |
| ·MAPK基因表达量的检测 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-44页 |
| ·SmMAPK6的组织特异性表达分析 | 第41页 |
| ·SmMAPK6的诱导表达分析 | 第41-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第四章 丹参MAPK的亚细胞定位 | 第46-53页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·菌株与质粒 | 第46页 |
| ·生化试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-49页 |
| ·亚细胞定位载体的构建 | 第46-48页 |
| ·丹参悬浮细胞原生质体的获得 | 第48-49页 |
| ·PEG融合法转化丹参原生质体 | 第49页 |
| ·显微镜观察 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-51页 |
| ·绿色荧光蛋白融合表达载体pA7-GFP-SmMAPK6的构建 | 第49-50页 |
| ·重组质粒在丹参细胞中的瞬时表达 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51页 |
| ·小结 | 第51-53页 |
| 第五章 SmMAPK6过表达载体和RNAi载体的构建及植株转化 | 第53-63页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·菌株与质粒 | 第53页 |
| ·生化试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-58页 |
| ·植物总RNA的提取及质量检测 | 第53页 |
| ·反转录 | 第53页 |
| ·过表达载体的构建 | 第53-55页 |
| ·RNAi沉默表达载体的构建 | 第55-57页 |
| ·农杆菌GV3101感受态的制备 | 第57-58页 |
| ·叶盘法转染丹参无菌苗及抗性丹参的获得 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-60页 |
| ·植物过表达载体的构建 | 第58-59页 |
| ·植物RNAi载体的构建 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 缩略词 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |