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葡萄WRKY30转录因子对生物与非生物胁迫的响应

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 前言第9-25页
   ·葡萄霜霉菌第9-12页
     ·霜霉菌分类第9-10页
     ·霜霉菌的结构与发病规律第10-11页
     ·霜霉病的起源与传播第11-12页
   ·植物中的PR基因及其诱导第12-13页
   ·植物中的PR1,PR2与PR5基因第13-16页
     ·PR1型基因与植物抗性的关系第13-14页
     ·PR2型基因与植物抗性的关系第14-15页
     ·PR5型基因与植物抗性的关系第15-16页
   ·植物的免役信号通路第16-19页
     ·乙烯信号传导第17页
     ·茉莉酮酸信号传导第17-18页
     ·水杨酸信号传导第18-19页
   ·WRKY的研究进展第19-24页
   ·研究的目的意义与内容第24-25页
第二章 葡萄WRKY30的克隆与序列分析第25-45页
   ·材料与方法第25-35页
     ·提取RNA第25-26页
     ·RNA中DNA的消化第26-27页
     ·反转录第27页
     ·克隆WRKY30基因第27-28页
     ·连接到pEASY-T1载体与筛选单克隆第28-29页
     ·氨基酸序列分析第29页
     ·亚细胞定位载体的构建第29-32页
     ·亚细胞定位对照载体的构建第32-34页
     ·基因枪转化洋葱表皮细胞第34-35页
     ·显微观察第35页
   ·结果与讨论第35-44页
     ·WRKY30基因的克隆第35-37页
     ·葡萄WRKY30的蛋白序列分析第37-38页
     ·葡萄WRKY30转录因子与已研究过WRKY的比对第38页
     ·葡萄WRKY30的进化分析第38-40页
     ·亚细胞定位载体的构建第40-42页
     ·亚细胞定位对照载体的构建第42-43页
     ·亚细胞定位第43-44页
   ·本章总结第44-45页
第三章 葡萄MrWRKY30在转基因拟南芥中的功能验证第45-57页
   ·材料与方法第45-46页
     ·转基因拟南芥的RT-PCR验证第45页
     ·转基因拟南芥盐胁迫的萌发率第45页
     ·梯度耐盐试验第45-46页
     ·干旱试验第46页
     ·叶片失水试验第46页
     ·冷处理试验第46页
     ·霜霉菌处理试验第46页
     ·PR基因与抗寒基因的检测第46页
   ·结果与讨论第46-56页
     ·转基因拟南芥的定量验证第46-47页
     ·盐胁迫对转基因拟南芥的影响第47-48页
     ·梯度盐胁迫第48页
     ·渗透压胁迫相关基因的表达第48-49页
     ·干旱胁迫第49-50页
     ·叶片失水率试验第50页
     ·冷胁迫第50-51页
     ·抗寒相关基因的表达第51-52页
     ·霜霉菌胁迫第52-53页
     ·PR基因的表达第53-54页
     ·SA、JA、ET信号途径中相关基因的表达第54-55页
     ·WRKY30的抗病与抗寒验证第55-56页
   ·本章小结第56-57页
第四章 WRKY30的激素与霜霉菌诱导第57-65页
   ·材料与方法第57-58页
     ·组织表达与分析第57页
     ·激素处理第57页
     ·霜霉菌处理第57-58页
   ·结果与讨论第58-64页
     ·WRKY30的组织表达第58页
     ·WRKY30受霜霉菌的诱导第58-60页
     ·WRKY30受激素的诱导第60-64页
   ·本章小结第64-65页
第五章 葡萄WRKY30的原核表达与EMSA第65-79页
   ·材料与方法第65-73页
     ·构建原核表达载体第65-68页
     ·原核表达第68-69页
     ·上清液和沉淀的柱纯化与包涵体的复性第69-70页
     ·凝胶阻滞第70-73页
   ·试验结果第73-78页
     ·构建原核表达载体第73-75页
     ·原核表达第75-76页
     ·蛋白的柱纯化结果第76页
     ·蛋白的透析结果第76-77页
     ·探针的合成第77页
     ·凝胶阻滞试验第77-78页
   ·本章小结第78-79页
第六章 PR基因的表达第79-86页
   ·材料与方法第79-80页
     ·启动子序列分析第79页
     ·定量分析PR基因的表达第79页
     ·瞬时转化第79-80页
   ·试验结果与讨论第80-84页
     ·PR基因的分布第80-81页
     ·PR基因启动子的分析第81页
     ·PR基因的表达第81-82页
     ·‘汤姆森无核白’瞬时转化第82-83页
     ·孢子数统计第83页
     ·PR基因的表达第83-84页
   ·本章小结第84-86页
第七章 全文总结第86-89页
   ·WRKY30的克隆与分析第86页
   ·转基因拟南芥验证第86-87页
   ·霜霉菌与激素诱导第87页
   ·PR基因的调控第87页
   ·创新点第87-88页
   ·展望第88-89页
参考文献第89-102页
致谢第102-103页
作者简介第103页

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