摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-25页 |
·葡萄霜霉菌 | 第9-12页 |
·霜霉菌分类 | 第9-10页 |
·霜霉菌的结构与发病规律 | 第10-11页 |
·霜霉病的起源与传播 | 第11-12页 |
·植物中的PR基因及其诱导 | 第12-13页 |
·植物中的PR1,PR2与PR5基因 | 第13-16页 |
·PR1型基因与植物抗性的关系 | 第13-14页 |
·PR2型基因与植物抗性的关系 | 第14-15页 |
·PR5型基因与植物抗性的关系 | 第15-16页 |
·植物的免役信号通路 | 第16-19页 |
·乙烯信号传导 | 第17页 |
·茉莉酮酸信号传导 | 第17-18页 |
·水杨酸信号传导 | 第18-19页 |
·WRKY的研究进展 | 第19-24页 |
·研究的目的意义与内容 | 第24-25页 |
第二章 葡萄WRKY30的克隆与序列分析 | 第25-45页 |
·材料与方法 | 第25-35页 |
·提取RNA | 第25-26页 |
·RNA中DNA的消化 | 第26-27页 |
·反转录 | 第27页 |
·克隆WRKY30基因 | 第27-28页 |
·连接到pEASY-T1载体与筛选单克隆 | 第28-29页 |
·氨基酸序列分析 | 第29页 |
·亚细胞定位载体的构建 | 第29-32页 |
·亚细胞定位对照载体的构建 | 第32-34页 |
·基因枪转化洋葱表皮细胞 | 第34-35页 |
·显微观察 | 第35页 |
·结果与讨论 | 第35-44页 |
·WRKY30基因的克隆 | 第35-37页 |
·葡萄WRKY30的蛋白序列分析 | 第37-38页 |
·葡萄WRKY30转录因子与已研究过WRKY的比对 | 第38页 |
·葡萄WRKY30的进化分析 | 第38-40页 |
·亚细胞定位载体的构建 | 第40-42页 |
·亚细胞定位对照载体的构建 | 第42-43页 |
·亚细胞定位 | 第43-44页 |
·本章总结 | 第44-45页 |
第三章 葡萄MrWRKY30在转基因拟南芥中的功能验证 | 第45-57页 |
·材料与方法 | 第45-46页 |
·转基因拟南芥的RT-PCR验证 | 第45页 |
·转基因拟南芥盐胁迫的萌发率 | 第45页 |
·梯度耐盐试验 | 第45-46页 |
·干旱试验 | 第46页 |
·叶片失水试验 | 第46页 |
·冷处理试验 | 第46页 |
·霜霉菌处理试验 | 第46页 |
·PR基因与抗寒基因的检测 | 第46页 |
·结果与讨论 | 第46-56页 |
·转基因拟南芥的定量验证 | 第46-47页 |
·盐胁迫对转基因拟南芥的影响 | 第47-48页 |
·梯度盐胁迫 | 第48页 |
·渗透压胁迫相关基因的表达 | 第48-49页 |
·干旱胁迫 | 第49-50页 |
·叶片失水率试验 | 第50页 |
·冷胁迫 | 第50-51页 |
·抗寒相关基因的表达 | 第51-52页 |
·霜霉菌胁迫 | 第52-53页 |
·PR基因的表达 | 第53-54页 |
·SA、JA、ET信号途径中相关基因的表达 | 第54-55页 |
·WRKY30的抗病与抗寒验证 | 第55-56页 |
·本章小结 | 第56-57页 |
第四章 WRKY30的激素与霜霉菌诱导 | 第57-65页 |
·材料与方法 | 第57-58页 |
·组织表达与分析 | 第57页 |
·激素处理 | 第57页 |
·霜霉菌处理 | 第57-58页 |
·结果与讨论 | 第58-64页 |
·WRKY30的组织表达 | 第58页 |
·WRKY30受霜霉菌的诱导 | 第58-60页 |
·WRKY30受激素的诱导 | 第60-64页 |
·本章小结 | 第64-65页 |
第五章 葡萄WRKY30的原核表达与EMSA | 第65-79页 |
·材料与方法 | 第65-73页 |
·构建原核表达载体 | 第65-68页 |
·原核表达 | 第68-69页 |
·上清液和沉淀的柱纯化与包涵体的复性 | 第69-70页 |
·凝胶阻滞 | 第70-73页 |
·试验结果 | 第73-78页 |
·构建原核表达载体 | 第73-75页 |
·原核表达 | 第75-76页 |
·蛋白的柱纯化结果 | 第76页 |
·蛋白的透析结果 | 第76-77页 |
·探针的合成 | 第77页 |
·凝胶阻滞试验 | 第77-78页 |
·本章小结 | 第78-79页 |
第六章 PR基因的表达 | 第79-86页 |
·材料与方法 | 第79-80页 |
·启动子序列分析 | 第79页 |
·定量分析PR基因的表达 | 第79页 |
·瞬时转化 | 第79-80页 |
·试验结果与讨论 | 第80-84页 |
·PR基因的分布 | 第80-81页 |
·PR基因启动子的分析 | 第81页 |
·PR基因的表达 | 第81-82页 |
·‘汤姆森无核白’瞬时转化 | 第82-83页 |
·孢子数统计 | 第83页 |
·PR基因的表达 | 第83-84页 |
·本章小结 | 第84-86页 |
第七章 全文总结 | 第86-89页 |
·WRKY30的克隆与分析 | 第86页 |
·转基因拟南芥验证 | 第86-87页 |
·霜霉菌与激素诱导 | 第87页 |
·PR基因的调控 | 第87页 |
·创新点 | 第87-88页 |
·展望 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
作者简介 | 第103页 |