| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-14页 |
| 第2章 实验材料与实验方法 | 第14-39页 |
| ·实验材料、试剂、仪器 | 第14-20页 |
| ·正常胃粘膜细胞株及胃癌细胞株 | 第14页 |
| ·实验主要试剂 | 第14-15页 |
| ·实验主要溶液的配制 | 第15-19页 |
| ·实验主要仪器 | 第19-20页 |
| ·正常胃黏膜细胞株及胃癌细胞株的培养 | 第20-22页 |
| ·细胞复苏 | 第20-21页 |
| ·细胞换液培养 | 第21页 |
| ·细胞传代 | 第21-22页 |
| ·细胞传冻存 | 第22页 |
| ·5-氮杂胞苷-2’-脱氧胞苷处理前后正常胃黏膜细胞株及胃癌细胞株PRL-3蛋白检测 | 第22-27页 |
| ·细胞的接种和培养 | 第22-23页 |
| ·细胞总蛋白制备 | 第23页 |
| ·总蛋白浓度测定 | 第23-24页 |
| ·蛋白凝胶电泳 | 第24-25页 |
| ·蛋白转膜 | 第25-26页 |
| ·蛋白免疫反应 | 第26页 |
| ·曝光及洗片 | 第26-27页 |
| ·凝胶图像分析 | 第27页 |
| ·Real- time PCR检测 5-氮杂胞苷-2’ -脱氧胞苷处理前后正常胃黏膜细胞及胃癌细胞中miRNA、PRL-3 mRNA的表达 | 第27-31页 |
| ·细胞的接种和培养 | 第27-28页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第28页 |
| ·RNA完整度及纯度的鉴定 | 第28-29页 |
| ·RT及PCR引物的设计合成 | 第29页 |
| ·RNA逆转录合成第一链c DNA | 第29-30页 |
| ·利用cDNA进行Real-time PCR | 第30页 |
| ·Real-time PCR结果数据分析 | 第30-31页 |
| ·实验数据的统计学分析 | 第31页 |
| ·5- 氮杂胞苷-2’- 脱氧胞苷处理前后正常胃黏膜细胞株及胃癌细胞株中miR495基因启动子甲基化水平检测 | 第31-36页 |
| ·细胞接种和培养 | 第31页 |
| ·细胞总DNA提取和纯度测定 | 第31-33页 |
| ·DNA甲基化引物设计 | 第33页 |
| ·MSP法及BSP法检测细胞中miR495基因启动子甲基化水平 | 第33-36页 |
| ·统计学处理 | 第36页 |
| ·胃癌细胞株在 5-氮杂胞苷-2’-脱氧胞苷处理前后的侵袭力研究 | 第36-39页 |
| ·未处理细胞的接种和培养 | 第36页 |
| ·5-氮杂胞苷-2’-脱氧胞苷处理后细胞培养 | 第36页 |
| ·Transwell细胞迁移实验 | 第36-37页 |
| ·Transwell细胞侵袭实验 | 第37-38页 |
| ·统计学处理 | 第38-39页 |
| 第3章结果 | 第39-44页 |
| ·5-氮杂胞苷-2’-脱氧胞苷处理前后正常胃黏膜细胞株及胃癌细胞株PRL-3蛋白表达 | 第39-40页 |
| ·5- 氮杂胞苷-2’- 脱氧胞苷处理前后正常胃黏膜细胞株及胃癌细胞株miRN A495、PRL-3mRNA表达 | 第40-41页 |
| ·5-氮杂胞苷-2’-脱氧胞苷处理后miR495基因启动子甲基化水平降低 | 第41-42页 |
| ·5-氮杂胞苷-2’-脱氧胞苷处理后胃癌细胞侵袭力下降 | 第42-44页 |
| 第4章 讨论 | 第44-47页 |
| 第5章 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第52-53页 |
| 综述 | 第53-60页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
