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巴西橡胶树热研7-33-97第1,5和9号染色体的分离及文库的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
1 引言第11-23页
   ·巴西橡胶树分子细胞学研究概况第11-14页
     ·关于巴西橡胶树的细胞学研究第11-12页
     ·巴西橡胶树分子生物学研究概况第12-14页
   ·染色体显微分离及微克隆技术的研究概况第14-21页
     ·染色体显微分离及微克隆技术的发展概况第14-15页
     ·植物单染色体显微分离及微克隆技术的方法与主要流程第15-19页
     ·单染色体显微分离及微克隆技术在植物中的应用第19-21页
     ·单染色体显微分离及微克隆技术在热带作物中的研究进展第21页
   ·本研究的目的意义及技术路线第21-23页
     ·研究的目的意义第21-22页
     ·技术路线第22-23页
2 材料与方法第23-35页
   ·试验材料第23-24页
     ·试验材料第23页
     ·试验试剂第23页
     ·试验的主要仪器第23-24页
   ·试验方法第24-35页
     ·染色体标本的制备第24-25页
     ·染色体的显微分离第25-26页
     ·单染色体的体外扩增第26-28页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第28页
     ·巴西橡胶树基因组DNA的提取第28-29页
     ·Southern杂交验证第29-31页
     ·FISH验证第31-32页
     ·巴西橡胶树单染色体微克隆文库的构建第32-35页
3 结果与分析第35-51页
   ·适合巴西橡胶树单染色体分离的染色体标本制备方法的建立第35-36页
   ·巴西橡胶树单染色体显微分离体系的建立第36-37页
   ·单染色体DNA的体外LA-PCR扩增结果第37-38页
   ·单染色体扩增产物的鉴定第38-44页
     ·巴西橡胶树热研7-33-97基因组DNA提取第38-39页
     ·单染色体第二轮LA-PCR扩增产物的Southern杂交分析第39-40页
     ·单染色体第二轮LA-PCR扩增产物的FISH杂交验证第40-44页
   ·巴西橡胶树热研7-33-97的第1、5及9号染色体文库的构建与初步分析第44-51页
     ·巴西橡胶树热研7-33-97的第1、5及9号染色体文库的构建第44页
     ·插入片段大小的PCR检测结果第44-46页
     ·热研7-33-97的第5号染色体文库部分克隆子测序及初步分析第46-51页
4 讨论第51-56页
   ·关于染色体标本的制备第51-52页
     ·关于材料的预处理的探讨第51页
     ·关于制片方法与酶解时间第51-52页
   ·关于染色体显微分离过程的问题第52页
   ·外源污染的防控问题第52-53页
   ·关于扩增产物的验证等问题第53-54页
     ·验证方法第53页
     ·FISH验证过程假阳性干扰的问题第53-54页
   ·单染色体微克隆文库质量的讨论第54-55页
   ·在线比对结果的讨论第55-56页
5 结论第56-57页
参考文献第57-65页
附录Ⅰ第65-80页
附录Ⅱ第80-81页
附录Ⅲ第81-84页
附录Ⅳ第84-85页
致谢第85页

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