摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
1 引言 | 第11-23页 |
·巴西橡胶树分子细胞学研究概况 | 第11-14页 |
·关于巴西橡胶树的细胞学研究 | 第11-12页 |
·巴西橡胶树分子生物学研究概况 | 第12-14页 |
·染色体显微分离及微克隆技术的研究概况 | 第14-21页 |
·染色体显微分离及微克隆技术的发展概况 | 第14-15页 |
·植物单染色体显微分离及微克隆技术的方法与主要流程 | 第15-19页 |
·单染色体显微分离及微克隆技术在植物中的应用 | 第19-21页 |
·单染色体显微分离及微克隆技术在热带作物中的研究进展 | 第21页 |
·本研究的目的意义及技术路线 | 第21-23页 |
·研究的目的意义 | 第21-22页 |
·技术路线 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-35页 |
·试验材料 | 第23-24页 |
·试验材料 | 第23页 |
·试验试剂 | 第23页 |
·试验的主要仪器 | 第23-24页 |
·试验方法 | 第24-35页 |
·染色体标本的制备 | 第24-25页 |
·染色体的显微分离 | 第25-26页 |
·单染色体的体外扩增 | 第26-28页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第28页 |
·巴西橡胶树基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
·Southern杂交验证 | 第29-31页 |
·FISH验证 | 第31-32页 |
·巴西橡胶树单染色体微克隆文库的构建 | 第32-35页 |
3 结果与分析 | 第35-51页 |
·适合巴西橡胶树单染色体分离的染色体标本制备方法的建立 | 第35-36页 |
·巴西橡胶树单染色体显微分离体系的建立 | 第36-37页 |
·单染色体DNA的体外LA-PCR扩增结果 | 第37-38页 |
·单染色体扩增产物的鉴定 | 第38-44页 |
·巴西橡胶树热研7-33-97基因组DNA提取 | 第38-39页 |
·单染色体第二轮LA-PCR扩增产物的Southern杂交分析 | 第39-40页 |
·单染色体第二轮LA-PCR扩增产物的FISH杂交验证 | 第40-44页 |
·巴西橡胶树热研7-33-97的第1、5及9号染色体文库的构建与初步分析 | 第44-51页 |
·巴西橡胶树热研7-33-97的第1、5及9号染色体文库的构建 | 第44页 |
·插入片段大小的PCR检测结果 | 第44-46页 |
·热研7-33-97的第5号染色体文库部分克隆子测序及初步分析 | 第46-51页 |
4 讨论 | 第51-56页 |
·关于染色体标本的制备 | 第51-52页 |
·关于材料的预处理的探讨 | 第51页 |
·关于制片方法与酶解时间 | 第51-52页 |
·关于染色体显微分离过程的问题 | 第52页 |
·外源污染的防控问题 | 第52-53页 |
·关于扩增产物的验证等问题 | 第53-54页 |
·验证方法 | 第53页 |
·FISH验证过程假阳性干扰的问题 | 第53-54页 |
·单染色体微克隆文库质量的讨论 | 第54-55页 |
·在线比对结果的讨论 | 第55-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
附录Ⅰ | 第65-80页 |
附录Ⅱ | 第80-81页 |
附录Ⅲ | 第81-84页 |
附录Ⅳ | 第84-85页 |
致谢 | 第85页 |