| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-5页 |
| 缩略语表 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-17页 |
| 1 牛结核病概况 | 第9-10页 |
| ·牛结核病的病原学特征 | 第9页 |
| ·牛结核病的危害 | 第9-10页 |
| 2 牛结核病的分布和流行情况 | 第10-12页 |
| ·发达国家和地区 | 第10页 |
| ·发展中国家和地区 | 第10-11页 |
| ·我国的现状 | 第11-12页 |
| 3 结核新型疫苗的开发 | 第12-16页 |
| ·减毒活菌疫苗 | 第12-13页 |
| ·亚单位疫苗 | 第13页 |
| ·基因疫苗 | 第13-15页 |
| ·复合型疫苗 | 第15-16页 |
| 4 毒力因子及其新疫苗研究现状 | 第16-17页 |
| 第二部分 试验部分 | 第17-41页 |
| 第一章 牛分枝杆菌黏附素基因 HBHA-HSP65 的 PCR 扩增与串联表达 | 第17-34页 |
| 1 材料与方法 | 第18-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第18页 |
| ·主要工具酶及试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·主要溶液配置 | 第19页 |
| ·目的片段的获得 | 第19-21页 |
| ·目的片段的 A/T 克隆与鉴定 | 第21-23页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第23-24页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第24-26页 |
| ·目的蛋白的纯化及浓度测定 | 第26-27页 |
| ·表达产物的 Western blot 分析 | 第27页 |
| 2 结果 | 第27-33页 |
| ·目的基因的 PCR 扩增结果 | 第27-28页 |
| ·T/A 克隆的鉴定 | 第28页 |
| ·目的基因的序列测定分析 | 第28-29页 |
| ·原核重组表达质粒的构建 | 第29页 |
| ·阳性重组表达质粒的鉴定 | 第29-30页 |
| ·表达产物的 SDS-PAGE 分析 | 第30-31页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| ·Western blot 分析 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| ·关于基因的克隆 | 第33页 |
| ·关于 HSP65、HBHA 基因在大肠杆菌中表达 | 第33-34页 |
| 第二章 牛分枝杆菌 HSP65-HBHA 亚单位疫苗的免疫保护力评价 | 第34-41页 |
| 1 材料与方法 | 第34-37页 |
| ·蛋白准备 | 第34页 |
| ·主要工具酶及试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·主要溶液配置 | 第34-35页 |
| ·试验动物免疫 | 第35页 |
| ·免疫小鼠血清中特异性抗体效价测定 | 第35页 |
| ·淋巴细胞增殖实验 | 第35-36页 |
| ·脾肺荷菌量测定 | 第36-37页 |
| ·统计分析 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-38页 |
| ·小鼠血清中特异性抗体的检测 | 第37页 |
| ·免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况 | 第37页 |
| ·小鼠肺脾荷菌量情况 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-41页 |
| 全文总结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49-50页 |
| 导师简介 | 第50-52页 |
