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纳米磁珠结合RT-PCR/RT-qPCR技术检测植物类病毒方法研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
1 引言第10-22页
   ·植物类病毒概述第10-13页
     ·类病毒的结构第10-11页
     ·类病毒的分类第11-12页
     ·类病毒的复制第12-13页
     ·类病毒的传播第13页
   ·植物类病毒检测技术第13-16页
     ·指示植物法第14页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第14页
     ·核酸分子杂交第14-15页
     ·RT-PCR第15-16页
     ·基因芯片技术第16页
   ·类病毒核酸提取技术第16-18页
     ·LiCl法第16-17页
     ·PEX法第17页
     ·CTAB法第17页
     ·热硼酸法第17-18页
     ·试剂盒第18页
   ·纳米磁珠技术在检测方面的应用第18-20页
     ·在医学检测方面的应用第18-19页
     ·在食品检测方面的应用第19页
     ·在环境检测方面的应用第19页
     ·在植物病毒检测方面的应用第19-20页
   ·研究目的、意义及技术路线第20-22页
     ·研究的目的和意义第20页
     ·研究内容和技术路线第20-22页
2 纳米磁珠技术检测植物类病毒方法的建立第22-28页
   ·材料与方法第22-25页
     ·样品与试剂第22页
     ·引物第22-23页
     ·纳米磁珠法提取植物类病毒RNA第23页
     ·植物RNA的RT-PCR检测第23-24页
     ·RT-PCR产物测序验证第24-25页
   ·结果与分析第25-27页
     ·RT-PCR检测结果第25-26页
     ·测序结果第26-27页
   ·结论第27-28页
3 纳米磁珠技术检测植物类病毒的条件优化第28-45页
   ·材料和方法第28-32页
     ·样品与试剂第28-29页
     ·引物和探针第29页
     ·MNP法提取植物类病毒RNA第29页
     ·普通RT-PCR反应体系和条件第29页
     ·实时荧光RT-PCR反应体系和条件第29-30页
     ·不同离心力处理第30页
     ·不同离心时间处理对检测结果的影响第30页
     ·不同质量的MNP对检测结果的影响第30-31页
     ·乙醇用量对检测结果的影响第31页
     ·不同结合温度处理第31页
     ·不同结合时间处理第31页
     ·不同清洗次数处理第31页
     ·不同洗脱温度处理第31-32页
     ·不同洗脱时间处理第32页
     ·不同反应体系大小第32页
   ·结果与分析第32-44页
     ·不同离心力处理对检测结果的影响第32-33页
     ·不同离心时间处理对检测结果的影响第33-34页
     ·不同质量的MNP对检测结果的影响第34-35页
     ·不同乙醇用量对检测结果的影响第35-37页
     ·不同结合温度处理对检测结果的影响第37-38页
     ·不同结合时间处理对检测结果的影响第38-39页
     ·不同清洗次数处理对检测结果的影响第39-41页
     ·不同洗脱温度处理对检测结果的影响第41-42页
     ·不同洗脱时间处理对检测结果的影响第42-43页
     ·不同反应体系大小对检测结果的影响第43-44页
   ·结论第44-45页
4 纳米磁珠实时荧光RT-PCR方法检测啤酒花潜隐类病毒第45-56页
   ·材料与方法第45-47页
     ·样品与试剂第45-46页
     ·引物与探针第46页
     ·核酸提取第46-47页
     ·普通RT-PCR反应体系和条件第47页
     ·标准曲线第47页
     ·实时荧光PCR反应体系和条件第47页
     ·RT-qPCR特异性及灵敏度分析第47页
   ·结果与分析第47-54页
     ·标准曲线第47-48页
     ·核酸提取方法比较第48-51页
     ·特异性及灵敏度比较第51-54页
   ·结论第54-56页
5 纳米磁珠实时荧光RT-PCR方法检测苹果皱果类病毒第56-61页
   ·材料与方法第56-57页
     ·样品与试剂第56页
     ·引物与探针第56-57页
     ·MNP法提取提取植物类病毒RNA第57页
     ·普通RT-PCR反应体系及条件第57页
     ·标准曲线第57页
     ·实时荧光PCR反应体系及条件第57页
     ·特异性及灵敏度分析第57页
   ·结果与分析第57-60页
     ·标准曲线第57-58页
     ·普通RT-PCR检测结果第58页
     ·实时荧光RT-PCR检测结果第58-59页
     ·灵敏度比较第59-60页
   ·结论第60-61页
参考文献第61-70页
个人简介第70-71页
导师简介第71-72页
获得成果目录第72-73页
致谢第73页

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