中文摘要 | 第1-17页 |
Abstract | 第17-29页 |
前言 | 第29-31页 |
第一部分 大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养和鉴定 | 第31-43页 |
前言 | 第31-32页 |
材料和方法 | 第32-36页 |
1.实验动物 | 第32页 |
2.主要仪器和试剂 | 第32-33页 |
3.实验方法 | 第33-36页 |
·大鼠骨髓间充质干细胞的原代分离培养 | 第33-34页 |
·BMSCs 的纯化及传代 | 第34页 |
·BMSCs 的形态学检查 | 第34页 |
·MTT 法检测细胞增殖能力 | 第34页 |
·流式细胞术测定 BMSCs 的细胞表面标记物表达 | 第34-35页 |
·BMSCs 的成骨成脂诱导分化能力 | 第35-36页 |
结果 | 第36-40页 |
1.BMSCs 的形态学鉴定 | 第36-38页 |
2.BMSCs 的细胞生长曲线 | 第38页 |
3.BMSCs 表面标记物的表达 | 第38-39页 |
4.BMSCs 成骨成脂诱导分化鉴定 | 第39-40页 |
结论 | 第40-41页 |
讨论 | 第41-43页 |
第二部分 构建转音猬因子基因的骨髓间充质干细胞和鉴定 | 第43-68页 |
前言 | 第43页 |
材料和方法 | 第43-56页 |
1.主要仪器和试剂 | 第43-46页 |
2.实验方法 | 第46-56页 |
·构建大鼠音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)的载体 | 第46-48页 |
·构建Shh慢病毒并利用其感染BMSCs | 第48-50页 |
·Real-time PCR测定转染细胞 Shh 的 mRNA表达 | 第50-52页 |
·Western blot 测定转染细胞 Shh 的蛋白含量 | 第52-56页 |
结果 | 第56-65页 |
1.构建大鼠音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)的载体 | 第56-61页 |
2.构建转染大鼠音猬因子的骨髓间充质干细胞(Shh-BMSCs) | 第61-62页 |
3. 转 Shh 基因的骨髓间充质干细胞 Shh 表达增高 | 第62-65页 |
结论 | 第65页 |
讨论 | 第65-68页 |
第三部分 音猬因子转染的骨髓间充质干细胞修复脊髓损伤的效果 | 第68-91页 |
前言 | 第68-69页 |
材料和方法 | 第69-80页 |
1.实验动物 | 第69页 |
2.主要仪器和试剂 | 第69-72页 |
3.实验方法 | 第72-80页 |
·建立大鼠脊髓损伤模型 | 第72页 |
·蛛网膜下腔注射转音猬因子的大鼠骨髓间充质干细胞(Shh-BMSCs)治疗脊髓损伤 | 第72-73页 |
·Shh-BMSCs 治疗脊髓损伤后 Shh 的蛋白测定 | 第73-74页 |
·Shh-BMSCs 对脊髓损伤大鼠神经保护作用的测定 | 第74-79页 |
·统计处理 | 第79-80页 |
结果 | 第80-86页 |
1.脊髓损伤大鼠模型建立成功 | 第80页 |
2. Shh-BMSCs促进体内Shh蛋白的表达 | 第80-81页 |
3. Shh-BMSCs 能够促进神经保护 | 第81-85页 |
4. Shh-BMSCs 促进运动功能的康复 | 第85-86页 |
结论 | 第86页 |
讨论 | 第86-91页 |
参考文献 | 第91-97页 |
文献综述 | 第97-124页 |
参考文献 | 第114-124页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第124-125页 |
致谢 | 第125-127页 |
个人简介 | 第127页 |