| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-23页 |
| 第一节 乳腺癌 | 第14-15页 |
| 第二节 卵巢癌 | 第15-17页 |
| 第三节 HBXIP基因及其表达产物HBXIP蛋白 | 第17-19页 |
| 第四节 Skp2基因及其表达产物Skp2蛋白 | 第19-21页 |
| 第五节 HBXIP,Skp2与肿瘤的关系 | 第21页 |
| 第六节 研究内容、目的、意义 | 第21-23页 |
| 第二章 HBXIP促进乳腺癌增殖 | 第23-90页 |
| 第一节 实验材料 | 第23-27页 |
| ·乳腺癌组织样本及来源 | 第24页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·细胞株 | 第24页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·质粒 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·实验仪器 | 第26-27页 |
| ·计算机软件 | 第27页 |
| 第二节 实验方法 | 第27-55页 |
| ·SP法免疫组化 | 第27-28页 |
| ·细胞培养及传代 | 第28-29页 |
| ·细胞株冻存 | 第29页 |
| ·冻存细胞复苏 | 第29-30页 |
| ·细胞计数 | 第30页 |
| ·质粒的小量提取 | 第30-31页 |
| ·质粒的纯化和定量 | 第31页 |
| ·细胞基因组提取 | 第31-32页 |
| ·RNA提取及反转录cDNA合成 | 第32-34页 |
| ·PCR聚合酶链式反应 | 第34-36页 |
| ·免疫印迹(western blot) | 第36-42页 |
| ·Skp2启动子及其突变体双荧光素酶报告基因载体构建 | 第42-47页 |
| ·RNA干扰的合成 | 第47页 |
| ·基因转染 | 第47-48页 |
| ·双荧光素酶报告基因检测 | 第48-49页 |
| ·染色质免疫共沉淀实验(ChIP) | 第49-50页 |
| ·免疫共沉淀实验(Co-IP) | 第50-51页 |
| ·电泳迁移率实验(EMSA) | 第51-53页 |
| ·MTT实验 | 第53页 |
| ·平板克隆形成实验 | 第53-54页 |
| ·流式细胞术(FACS) | 第54页 |
| ·动物体内成瘤实验 | 第54-55页 |
| ·统计学分析 | 第55页 |
| 第三节 实验结果 | 第55-85页 |
| ·HBXIP和Skp2在乳腺癌组织及细胞中表达相关性 | 第55-59页 |
| ·HBXIP调节Skp2启动子活性 | 第59-63页 |
| ·HBXIP调节乳腺癌细胞中Skp2蛋白和mRNA的表达 | 第63-67页 |
| ·HBXIP通过绑定到Skp2启动子上转录位点调节启动子活性 | 第67-73页 |
| ·HBXIP通过上调转录因子E2F1的蛋白和mRNA水平调节Skp2启动子活性 | 第73-74页 |
| ·HBXIP通过Skp2促进乳腺癌细胞的增殖 | 第74-79页 |
| ·HBXIP抑制乱腺癌细胞的)周亡 | 第79-80页 |
| ·HBXIP在动物体内通过Skp2促进乳腺癌细胞的增殖 | 第80-85页 |
| 第四节 讨论 | 第85-89页 |
| 第五节 小结 | 第89-90页 |
| 第三章 HBXIP促进卵巢癌迁移 | 第90-118页 |
| 第一节 实验材料 | 第90-92页 |
| ·卵巢癌组织样本及来源 | 第90页 |
| ·菌株 | 第90-91页 |
| ·细胞株 | 第91页 |
| ·质粒 | 第91页 |
| ·主要试剂 | 第91-92页 |
| ·实验仪器 | 第92页 |
| ·计算机软件 | 第92页 |
| 第二节 实验方法 | 第92-97页 |
| ·SP免疫组化 | 第93页 |
| ·细胞培养及传代 | 第93页 |
| ·细胞株冻存 | 第93页 |
| ·冻存细胞复苏 | 第93-94页 |
| ·质粒的小量提取 | 第94页 |
| ·质粒的纯化和定量 | 第94页 |
| ·细胞基因组提取 | 第94页 |
| ·RNA提取及反转录cDNA合成 | 第94页 |
| ·RT-PCR | 第94页 |
| ·质粒构建 | 第94页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第94页 |
| ·细菌的培养与质粒扩增 | 第94页 |
| ·Skp2启动子及其突变体双荧光素酶报告基因载体构建 | 第94-95页 |
| ·RNA干扰的合成 | 第95页 |
| ·基因转染 | 第95-96页 |
| ·免疫印迹 | 第96页 |
| ·“伤口愈合”试验(细胞划痕试验) | 第96-97页 |
| ·双荧光素酶报告基因检测 | 第97页 |
| ·统计学分析 | 第97页 |
| 第三节 实验结果 | 第97-113页 |
| ·HBXIP和Skp2蛋白在卵巢癌组织及细胞中的表达 | 第97-101页 |
| ·HBXIP调节卵巢癌细胞中Skp2的表达 | 第101-102页 |
| ·HBXIP通过转录因子Sp1激活Skp2启动子的活性 | 第102-105页 |
| ·HBXIP通过Skp2促进卵巢癌细胞的迁移 | 第105-113页 |
| 第四节 讨论 | 第113-117页 |
| 第五节 小结 | 第117-118页 |
| 第四章 结论 | 第118页 |
| 展望 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
| 附录 | 第130-135页 |
| 个人简历、在学期间发表的论文与研究成果 | 第135页 |
