| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 1 研究内容和技术路线 | 第14-16页 |
| ·研究内容 | 第14-15页 |
| ·采用实时定量 RT-PCR 方法比较正常胃黏膜上皮细胞株和胃癌细胞株中miR-129-1-3p、miR-129-2-3p 和 miR-129-5p 的表达水平 | 第14页 |
| ·分析提高细胞内 miRNA 水平后细胞增殖能力的变化 | 第14页 |
| ·分别转染 miR-129-1-3p、miR-129-2-3p 和 miR-129-5p 类似物到两种胃癌细胞株并以转染NC 作为对照，用流式细胞术分析转染后细胞周期变化 | 第14页 |
| ·分析 miR-129 的 3 种成熟产物的肿瘤相关靶基因 | 第14-15页 |
| ·技术路线 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-30页 |
| ·材料 | 第16-19页 |
| ·主要设备和仪器 | 第16-17页 |
| ·主要试剂 | 第17-19页 |
| ·细胞株 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-30页 |
| ·细胞培养 | 第19-21页 |
| ·miRNA 类似物的合成 | 第21页 |
| ·转染 miRNA 类似物 | 第21-22页 |
| ·RTCA 技术筛选转染用的类似物浓度 | 第22-23页 |
| ·RTCA 技术实时监测 miR-129 的 3 种成熟产物类似物对细胞增殖的影响 | 第23页 |
| ·流式细胞术检测 miR-129 的 3 种成熟产物类似物对胃癌细胞周期的影响 | 第23页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·RNA 含量测定 | 第24页 |
| ·实时定量 RT-PCR 技术检测 miRNA 的水平 | 第24-26页 |
| ·蛋白印迹技术检测蛋白表达水平 | 第26-29页 |
| ·统计方法 | 第29-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-40页 |
| ·MiR-129 的 3 种成熟产物在胃癌细胞中低表达 | 第30-31页 |
| ·筛选出最佳转染浓度 | 第31页 |
| ·150nM 浓度的 miR-129 的 3 种成熟产物类似物转染效果显著 | 第31-32页 |
| ·miR-129 的 3 种成熟产物类似物对细胞增殖的影响及其分子机制 | 第32-35页 |
| ·miR-129 的 3 种成熟产物的类似物显著抑制胃癌细胞的生长 | 第32-34页 |
| ·miR-129 的 3 种成熟产物的类似物影响胃癌细胞的细胞周期 | 第34-35页 |
| ·miR-129-1-3p、miR-129-2-3p 和 miR-129-5p 的肿瘤相关靶基因分析 | 第35-40页 |
| ·MiR-129 的颈环结构序列 | 第35-36页 |
| ·生物信息学预测 miR-129 的 3 种成熟产物的靶基因 | 第36-37页 |
| ·miR-129-1-3p、miR-129-2-3p 和 miR-129-5p 类似物能抑制胃癌细胞 CDK6 的表达 | 第37-38页 |
| ·miR-129-2-3p 和 miR-129-5p 类似物能抑制胃癌细胞 SOX4 的表达 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 5 全文小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 附录A 缩略词 | 第47-48页 |
| 附录B 综述 | 第48-60页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 在学研究成果 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
