| 缩略语表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 1 前言 | 第13-18页 |
| ·猪链球菌概述 | 第13-14页 |
| ·猪链球菌 2 型毒力因子 | 第14-17页 |
| ·荚膜多糖（CPS） | 第14页 |
| ·溶菌酶释放蛋白（MRP）和胞外因子（EF） | 第14-15页 |
| ·溶血素（SLY） | 第15页 |
| ·腺苷合成酶 (Ssads) | 第15-16页 |
| ·H 因子结合蛋白（Fhb） | 第16-17页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 第一部分 与补体组分蛋白相互作用的 Fhb 蛋白结构域的确定 | 第18-43页 |
| 1 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·载体和菌株 | 第18页 |
| ·主要试剂和材料 | 第18-19页 |
| ·主要仪器和设备 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-29页 |
| ·引物设计 | 第19-21页 |
| ·截短表达片段和敲除结构域片段重组质粒的构建 | 第21-24页 |
| ·重组菌的诱导表达 | 第24页 |
| ·重组蛋白的表达纯化 | 第24-26页 |
| ·正常健康人血清的制备 | 第26页 |
| ·生物素标记蛋白 | 第26页 |
| ·ELISA 检测 Fhb 截短片段和敲除结构域片段与补体 蛋白 hFH，C3b，C3d 的结合 | 第26-27页 |
| ·配体印迹验证 Fhb 截短片段与补体蛋白 hFH，C3b， C3d 的结合 | 第27-28页 |
| ·生物膜干涉（Biolayer Interferometry，BLI）分析重组 Fhb 截短片段与补体蛋白 hFH，C3b，C3d 的结合 | 第28-29页 |
| 2 结果 | 第29-41页 |
| ·重组 Fhb 截短表达片段Ⅰ~Ⅵ质粒的构建和鉴定 | 第29-30页 |
| ·Fhb 截短片段Ⅰ~Ⅵ重组蛋白的表达纯化 | 第30-31页 |
| ·Fhb 截短表达片段Ⅲ*重组质粒的构建和鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组蛋白 His-Fhb-Ⅲ*的表达和纯化 | 第32页 |
| ·Fhb 敲除结构域蛋白重组质粒的构建和鉴定 | 第32-33页 |
| ·Fhb 敲除结构域重组蛋白的表达纯化 | 第33-34页 |
| ·重组 Fhb 截短结构域 His-Fhb-Ⅲ*与补体蛋白 hFH，C3b 和 C3d 的结合 | 第34-41页 |
| ·Fhb 截短结构域 His-Fhb-Ⅲ*特异性结合补体组分蛋白 hFH | 第34-38页 |
| ·重组 Fhb 截短结构域 His-Fhb-Ⅲ*特异性结合补体组分蛋白 C3b 和 C3d | 第38-41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| 第二部分 表面蛋白 Fhb 功能结构域Ⅲ*参与猪链球菌抑制补体激活的作用 | 第43-57页 |
| 1 材料与方法 | 第44-49页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·实验菌株 | 第44页 |
| ·实验材料和试剂 | 第44-45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·CΔSsfhb-3 基因缺失互补株的构建 | 第45-47页 |
| ·Fhb 蛋白在猪链球菌中的定位 | 第47-48页 |
| ·上清蛋白 Fhb 对猪链球菌表面 C3b/iC3b 沉积的影响 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白 Fhb 结构Ⅲ*对猪链球菌表面 C3b/iC3b 沉积的影响 | 第49页 |
| 2 结果 | 第49-55页 |
| ·Ssfhb-3 上下游片段的扩增及与 pEASY~(TM)-Blunt Zero 载体的连接和鉴定 | 第49-50页 |
| ·Ssfhb-3 基因与 pAT18 载体的连接和鉴定 | 第50-51页 |
| ·缺失互补株 CΔSsfhb-3 的鉴定 | 第51-52页 |
| ·Fhb 蛋白在猪链球菌中的定位 | 第52-53页 |
| ·上清蛋白 Fhb 对猪链球菌表面 C3b/iC3b 沉积的影响 | 第53-54页 |
| ·Fhb 功能结构域Ⅲ*能够抑制猪链球菌表面 C3b/iC3b 的沉积 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录Ⅰ | 第63-64页 |
| 附录Ⅱ | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 综述 | 第69-79页 |
| 参考文献 | 第76-79页 |
