| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1. 植物铝毒害症状 | 第11页 |
| 2. 植物耐铝机理(不同植物分泌的有机酸类型) | 第11-14页 |
| ·铝诱导根系有机酸分泌 | 第12-14页 |
| ·铝耐受性机制(包含和内部耐受) | 第14页 |
| 3. 提高耐铝性的分子策略 | 第14-16页 |
| 4. MATE和ALMT基因研究现状 | 第16页 |
| 5. 研究的意义与目的 | 第16-18页 |
| 第二章 甘蓝BoMATE基因克隆及生物信息学分析 | 第18-25页 |
| 1. 试验材料与方法 | 第18页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌体材料和载体 | 第18页 |
| ·各种酶及试剂 | 第18页 |
| 2. 试验方法 | 第18-22页 |
| ·RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第18-20页 |
| ·甘蓝BoMATE基因克隆 | 第20页 |
| ·产物纯化回收及测序 | 第20-22页 |
| ·质粒提取 | 第22页 |
| ·甘蓝BoMATE基因生物信息学分析 | 第22页 |
| 3. 结果 | 第22-25页 |
| ·甘蓝BoMATE基因克隆 | 第22-23页 |
| ·甘蓝BoMATE蛋白的生物信息学分析 | 第23-25页 |
| 第三章 甘蓝BoMATE基因表达分析和亚细胞定位 | 第25-30页 |
| 1. 试验材料 | 第25页 |
| ·试验材料的培养与处理 | 第25页 |
| ·洋葱表皮预培养 | 第25页 |
| 2. 试验方法 | 第25-27页 |
| ·实时荧光定量分析甘蓝BoMATE基因的表达 | 第25页 |
| ·甘蓝BoMATE基因瞬时表达载体构建 | 第25-26页 |
| ·基因枪操作步骤 | 第26-27页 |
| ·GFP荧光观察 | 第27页 |
| 3. 结果 | 第27-30页 |
| ·甘蓝BoMATE基因组织特异性表达分析及对不同金属离子的响应 | 第27-28页 |
| ·BoMATE蛋白的亚细胞定位 | 第28-30页 |
| 第四章 甘蓝BoMATE基因的功能研究 | 第30-42页 |
| 1. 材料与方法 | 第30-32页 |
| ·甘蓝和拟南芥在铝处理条件下柠檬酸的收集 | 第30页 |
| ·有机酸含量的测定 | 第30页 |
| ·甘蓝BoMATE基因异源表达于爪蟾卵母细胞的研究 | 第30-31页 |
| ·载体构建与转化农杆菌 | 第31页 |
| ·拟南芥的转化株的获得与分子鉴定 | 第31页 |
| ·相对根长的测定 | 第31-32页 |
| ·H~+和K~+流动的测定 | 第32页 |
| 2. 结果 | 第32-40页 |
| ·甘蓝根部柠檬酸的分泌 | 第32-33页 |
| ·甘蓝BoMATE基因在爪蟾卵母细胞中的功能分析 | 第33-35页 |
| ·过表达甘蓝BoMATE基因在拟南芥中增强柠檬酸外排和铝抗性 | 第35-38页 |
| ·BoMATE蛋白改变膜K~+和H~+流动 | 第38-40页 |
| 3. 讨论与分析 | 第40-42页 |
| 第五章 甘蓝苹果酸转运蛋白基因的克隆与功能研究 | 第42-53页 |
| 1. 材料与方法 | 第42-44页 |
| ·甘蓝BoALMT1基因的克隆与生物信息学分析 | 第42页 |
| ·甘蓝BoALMT1基因的表达模式和亚细胞定位 | 第42-43页 |
| ·甘蓝BoALMT1基因在爪蟾卵母细胞中的表达和功能分析 | 第43-44页 |
| ·甘蓝BoALMT1基因转化拟南芥 | 第44页 |
| 2. 结果 | 第44-52页 |
| ·甘蓝BoALMT1基因的克隆与生物信息学分析 | 第44-47页 |
| ·甘蓝BoALMT1基因的表达模式和亚细胞定位 | 第47-49页 |
| ·甘蓝BoALMT1基因在爪蟾卵母细胞中的表达和功能分析 | 第49-51页 |
| ·甘蓝BoALMT1基因转化拟南芥 | 第51-52页 |
| 3. 讨论与结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-63页 |
| 附录 | 第63-71页 |
| 附录1 登记基因信息 | 第63-69页 |
| 附录2 质粒图谱 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 个人简历 | 第72-73页 |
