| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 第一章 综述 | 第14-24页 |
| 1 盐藻及其耐盐机制 | 第14-19页 |
| ·盐藻 | 第14页 |
| ·盐藻的耐盐机制 | 第14-19页 |
| ·盐藻应答短时间盐胁迫 | 第14-17页 |
| ·盐藻应答长时间盐胁迫 | 第17-19页 |
| 2 小 G 蛋白研究概况 | 第19-23页 |
| ·小 G 蛋白的结构 | 第19页 |
| ·小 G 蛋白的作用机制 | 第19页 |
| ·小 G 蛋白家族 | 第19-23页 |
| ·Ras 蛋白家族 | 第20页 |
| ·Arf/Sar 蛋白家族 | 第20-21页 |
| ·Rho 蛋白家族 | 第21页 |
| ·Ran 蛋白家族 | 第21-22页 |
| ·Rab 蛋白家族 | 第22-23页 |
| 3 研究目的与意义 | 第23页 |
| 4 研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 盐藻 DsRab 基因的载体构建 | 第24-41页 |
| 1 实验材料 | 第24页 |
| ·菌种和质粒 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| 2 实验方法 | 第24-37页 |
| ·原核表达重组载体 pGS-21a-DsRab 的构建 | 第24-30页 |
| ·目的基因 DsRab 的扩增 | 第25-26页 |
| ·目的片段的回收 | 第26页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·质粒的小量提取 | 第27页 |
| ·克隆载体 pMD18-T Simple-DsRab 的构建 | 第27-28页 |
| ·原核表达载体 pGS-21a-DsRab 的构建 | 第28-30页 |
| ·亚细胞定位载体 pMDCGGN 的构建 | 第30-32页 |
| ·克隆载体 pMDl8-T simple-G 的构建 | 第30-32页 |
| ·亚细胞定位载体 pMDCGGN 的构建 | 第32页 |
| ·植物表达重组载体 pBI121-DsRab 的构建 | 第32-37页 |
| ·克隆载体 pMDl8-T simple-DsG 的构建 | 第33-35页 |
| ·植物表达重组载体 pBI121-DsRab 的构建 | 第35-37页 |
| 3 实验结果 | 第37-39页 |
| ·原核表达载体 pGS-21a-DsRab 的构建 | 第37页 |
| ·亚细胞定位载体 pMDCGGN 的构建 | 第37-38页 |
| ·植物表达重组载体 pBI121-DsRab 的构建 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 盐藻 DsRab 的原核表达和纯化 | 第41-50页 |
| 1 实验材料 | 第41页 |
| ·菌种和质粒 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·实验仪器 | 第41页 |
| 2 实验方法 | 第41-45页 |
| ·表达载体转化表达菌 BL21(DE3) | 第41-42页 |
| ·表达菌 BL21(DE3)感受态细胞的制备 | 第41页 |
| ·表达载体的转化及检测 | 第41-42页 |
| ·融合蛋白的表达及可溶性分析 | 第42页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第42-43页 |
| ·融合蛋白表达条件优化 | 第43页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第43-45页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第43-44页 |
| ·GST Gravity-flow Columns 纯化 | 第44-45页 |
| ·Western blotting 检测 | 第45页 |
| 3 实验结果 | 第45-49页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第45-47页 |
| ·表达载体的转化的检测 | 第45-46页 |
| ·融合蛋白可溶性分析 | 第46-47页 |
| ·融合蛋白表达条件优化 | 第47页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白的 Western blotting 鉴定 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 盐藻 DsRab 蛋白的亚细胞定位分析 | 第50-55页 |
| 1 实验材料 | 第50页 |
| ·菌株和质粒 | 第50页 |
| ·实验试剂 | 第50页 |
| ·实验仪器 | 第50页 |
| 2 实验方法 | 第50-52页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第50-51页 |
| ·电转化农杆菌感受态细胞的制备 | 第50-51页 |
| ·重组质粒电转化农杆菌 | 第51页 |
| ·重组质粒电转化农杆菌的检测 | 第51页 |
| ·农杆菌介导转染洋葱表皮细胞 | 第51-52页 |
| 3 实验结果 | 第52-53页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第52页 |
| ·盐藻 DsRab 蛋白的亚细胞定位分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 结论与展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
