| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-36页 |
| ·概述 | 第12-13页 |
| ·木质纤维素生物质 | 第13-16页 |
| ·木质纤维素的成分 | 第13-14页 |
| ·木质纤维素的预处理与水解 | 第14-15页 |
| ·木质纤维素水解液的脱毒 | 第15-16页 |
| ·己糖的生物转化 | 第16-20页 |
| ·葡萄糖-乙醇的生物转化 | 第16-18页 |
| ·半乳糖-乙醇的生物转化 | 第18-20页 |
| ·甘露糖-乙醇的生物转化 | 第20页 |
| ·五碳糖的生物转化 | 第20-33页 |
| ·木糖-乙醇的生物转化 | 第22-31页 |
| ·阿拉伯糖-乙醇的生物转化 | 第31-33页 |
| ·利用重组酵母菌株发酵木质纤维素水解液 | 第33-34页 |
| ·本文的研究背景、内容及目的 | 第34-36页 |
| 第二章 实验材料及方法 | 第36-63页 |
| ·实验材料 | 第36-48页 |
| ·菌株、质粒与引物 | 第36-43页 |
| ·实验仪器 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第44-45页 |
| ·培养基 | 第45-47页 |
| ·主要溶液 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-61页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第48-49页 |
| ·电转细胞的制备与电转化 | 第49页 |
| ·小规模提取大肠杆菌质粒法（CTAB 法） | 第49-50页 |
| ·酵母染色体的快速分离 | 第50页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第50-51页 |
| ·DNA 的限制酶消化 | 第51-52页 |
| ·DNA 的连接反应 | 第52页 |
| ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第52页 |
| ·从琼脂糖中回收DNA | 第52-53页 |
| ·融合PCR | 第53-54页 |
| ·Klenow 酶补平失活酶切位点 | 第54页 |
| ·酵母细胞的转化 | 第54-55页 |
| ·酵母交配型的验证 | 第55-56页 |
| ·不同交配型酵母细胞之间的杂交 | 第56页 |
| ·一步基因置换法 | 第56-57页 |
| ·两步基因置换 | 第57页 |
| ·酵母等位基因分离及遗传分析 | 第57-58页 |
| ·酵母EMS 诱变 | 第58-59页 |
| ·酵母高效生孢法 | 第59页 |
| ·蛋白质浓度的定量（Bio-Rad 方法） | 第59-60页 |
| ·玻璃珠法提取酿酒酵母总蛋白 | 第60页 |
| ·细胞干重测定 | 第60页 |
| ·酶活测定 | 第60-61页 |
| ·发酵过程的准备及主要分析方法 | 第61-63页 |
| ·发酵培养基制备 | 第61页 |
| ·HPLC 测定发酵液中各组分 | 第61-63页 |
| 第三章 基于XR-XDH-XKS 系统的高通量重组木糖发酵酿酒酵母菌株的构建 | 第63-85页 |
| ·概述 | 第63页 |
| ·酿酒酵母组成型启动子强度的测定及比较 | 第63-65页 |
| ·质粒的构建 | 第65-69页 |
| ·质粒YIplac211-H8 的构建 | 第65-66页 |
| ·质粒YIplac211-YXKS 的构建 | 第66-67页 |
| ·质粒YIplac211-Y8 的构建 | 第67-68页 |
| ·质粒YIplac211-A8 的构建 | 第68-69页 |
| ·高通量木糖代谢菌株的构建 | 第69-71页 |
| ·KAM-3X 菌株的构建 | 第70页 |
| ·KAM-6X 菌株的构建 | 第70-71页 |
| ·XYL1,XYL2,XKS 基因在重组酿酒酵母菌株中的实际转录强度测定 | 第71-72页 |
| ·重组菌株中XR,XDH,XKS 的酶活测定 | 第72-74页 |
| ·重组菌株的实际发酵性能测试 | 第74-78页 |
| ·重组木糖发酵菌株的混合糖发酵性能及乙醇抑制研究 | 第78-83页 |
| ·菌株KAM-6X 在不同比例葡萄糖与木糖混合培养基中发酵性能测量 | 第79-81页 |
| ·菌株KAM-6X 的乙醇抑制实验 | 第81-83页 |
| ·本章小结 | 第83-85页 |
| 第四章XR-XDH 系统木糖代谢菌株中辅酶平衡问题的研究 | 第85-102页 |
| ·概述 | 第85页 |
| ·改造KAM-6X 中XR 的辅酶偏好性 | 第85-90页 |
| ·XR 突变型2-2C12 对KAM-6X 发酵能力的影响 | 第85-87页 |
| ·XR 突变型K270R 对KAM-6X 发酵能力的影响 | 第87-89页 |
| ·XR 突变型的酶活测定 | 第89-90页 |
| ·XR 辅酶偏好性改造小结 | 第90页 |
| ·在KAM-6X 中引入NADH 激酶P055 | 第90-94页 |
| ·NADH 激酶P055 概述 | 第90-91页 |
| ·质粒的构建 | 第91页 |
| ·KAM-6X 中转化pJ153 后发酵性能测试 | 第91-94页 |
| ·在KAM-6X 中引入NADH 氧化酶noxE | 第94-98页 |
| ·NADH 氧化酶noxE | 第94-95页 |
| ·质粒及菌株的构建 | 第95-96页 |
| ·菌株KAM-3X(YCplac33)和KAM-3X(pPGK1-noxE)发酵性能测试及分析 | 第96-98页 |
| ·noxE 和XDH 酶活的测定 | 第98页 |
| ·本章小结 | 第98-102页 |
| 第五章 通过易错PCR 方法改造木糖异构酶Xylose Isomerase(XI) | 第102-110页 |
| ·概述 | 第102页 |
| ·质粒及菌株的构建 | 第102-103页 |
| ·质粒YCplac33-ptHXT7-XI 的构建 | 第102页 |
| ·菌株KAM-2XKS 的构建 | 第102-103页 |
| ·通过易错PCR 的方法获得XI 的突变型XI(mut5)和XI(mut8) | 第103-104页 |
| ·携带XImut5 和XImut8 的菌株发酵性能测试 | 第104-106页 |
| ·XI(mut5)与XI(mut8)的酶活测定 | 第106-107页 |
| ·XI 突变型酶活提高的机理研究 | 第107-109页 |
| ·概述 | 第107页 |
| ·XI，XImut5 与XImut8 的RNA 稳定性实验 | 第107-109页 |
| ·本章小结 | 第109-110页 |
| 第六章总结与展望 | 第110-113页 |
| ·总结 | 第110-111页 |
| ·展望 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-126页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文和参加科研情况 | 第126-127页 |
| 附录1 生化名词缩写 | 第127-128页 |
| 致谢 | 第128页 |
