| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 图表目录 | 第10-11页 |
| 常用中英文缩略词 | 第11-12页 |
| 文献综述 | 第12-20页 |
| 引言 | 第20-22页 |
| 1 材料与方法 | 第22-33页 |
| ·实验菌株、质粒和血清 | 第22页 |
| ·酶类与主要试剂（盒）11 | 第22页 |
| ·实验用SPF鸡胚和细胞系 | 第22页 |
| ·主要培养基与溶液的配制 | 第22-25页 |
| ·主要培养基的配制 | 第22-23页 |
| ·细胞培养所用溶液 | 第23页 |
| ·感受态细胞制备及转化用溶液 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE电泳所需溶液 | 第23-24页 |
| ·蛋白表达及提纯所用溶液 | 第24-25页 |
| ·Western-blot及ELISA所用溶液 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·鸭坦布苏病毒的分离 | 第26页 |
| ·病料采集 | 第26页 |
| ·病毒分离 | 第26页 |
| ·鸭坦布苏病毒的鉴定 | 第26-27页 |
| ·血凝性测定 | 第26页 |
| ·PCR鉴定 | 第26-27页 |
| ·病毒分离株JS2010的培养特性与致病性研究 | 第27-28页 |
| ·病毒的鸡胚培养 | 第27页 |
| ·病毒的细胞培养 | 第27-28页 |
| ·鸡胚半数致死量(ELD50)的测定 | 第28页 |
| ·病毒半数细胞感染量(TCID50)的测定 | 第28页 |
| ·病毒感染后组织病理变化检查 | 第28页 |
| ·病毒分离株JS2010的全基因组测序与分析 | 第28-29页 |
| ·引物设计 | 第28-29页 |
| ·PCR扩增 | 第29页 |
| ·全基因组序列的分析 | 第29页 |
| ·鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达与纯化 | 第29-31页 |
| ·E蛋白基因的PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·目的基因与表达质粒的连接 | 第30页 |
| ·连接产物的转化与鉴定 | 第30页 |
| ·重组E蛋白的表达与分析 | 第30-31页 |
| ·重组E蛋白的纯化 | 第31页 |
| ·重组E蛋白浓度的测定 | 第31页 |
| ·DTMUV的间接ELISA检测方法建立 | 第31-33页 |
| ·包被抗原和抗体的最佳稀释倍数确定 | 第31页 |
| ·一抗和酶标二抗最佳孵育时间的确定 | 第31页 |
| ·间接ELISA判定标准的确定 | 第31-32页 |
| ·间接ELISA方法的特异性测定 | 第32页 |
| ·间接ELISA方法的敏感性测定 | 第32页 |
| ·间接ELISA方法的重复性测定 | 第32页 |
| ·间接ELISA方法检测临床样品 | 第32-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-44页 |
| ·病毒的分离结果 | 第33页 |
| ·病毒的鉴定 | 第33-34页 |
| ·病毒培养特性与致病性 | 第34-36页 |
| ·培养特性 | 第34-35页 |
| ·病毒的鸡胚半数致死量（ELD50）24 | 第35页 |
| ·病毒的细胞半数感染量（TCID50）24 | 第35-36页 |
| ·组织病理变化 | 第36页 |
| ·DTMUV-JS2010分离株的全基因组测序与分析 | 第36-39页 |
| ·各基因片段的扩增与序列测定 | 第36-37页 |
| ·全基因组序列分析 | 第37-39页 |
| ·重组pET-32a-E质粒的构建与鉴定 | 第39-40页 |
| ·E蛋白的表达与纯化 | 第40-41页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第41-44页 |
| ·包被抗原和抗体的最佳稀释倍数 | 第41页 |
| ·一抗和酶标抗体的最佳作用时间 | 第41-42页 |
| ·间接ELISA方法的特异性 | 第42页 |
| ·间接ELISA方法的敏感性 | 第42页 |
| ·间接ELISA方法的重复性 | 第42-43页 |
| ·临床样品的检测结果 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| ·鸭坦布苏病毒的培养特性与致病性 | 第44页 |
| ·鸭坦布苏病毒的全基因组序列分析 | 第44-45页 |
| ·重组E蛋白的制备 | 第45页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立及分析 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附录 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |