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拟南芥AtMPT3调节生长发育及渗透胁迫耐性的分子机理

符号说明第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-30页
   ·活性氧第13-20页
     ·活性氧的产生机制第13-16页
       ·活性氧在叶绿体中的产生机制第14页
       ·活性氧在线粒体中的产生机制第14-15页
       ·质膜 NADPH 氧化酶产生活性氧的机制第15-16页
     ·活性氧的清除机制第16-18页
     ·活性氧调控的生理过程第18-20页
       ·活性氧的氧化损伤第18页
       ·活性氧与细胞死亡第18-19页
       ·活性氧调控气孔运动第19页
       ·活性氧对植物生长发育的调控第19页
       ·活性氧与细胞质雄性不育第19-20页
   ·渗透胁迫第20-23页
     ·渗透胁迫的调控机制第20页
     ·参与渗透胁迫调控的渗透调节物质第20-22页
     ·渗透胁迫对植物的伤害第22-23页
   ·能量代谢第23-25页
     ·能量代谢与呼吸作用第23-24页
     ·能量在植物响应非生物胁迫中的作用第24-25页
   ·线粒体磷酸转运体家族的研究进展第25-28页
     ·磷酸转运体家族概述第25-27页
     ·线粒体磷酸转运体家族的结构特征第27页
     ·线粒体磷酸转运体的研究现状第27-28页
   ·本实验的目的意义第28-30页
2 材料与方法第30-46页
   ·实验材料第30-31页
     ·植物材料第30页
     ·菌株与质粒第30页
     ·酶与各种生化试剂第30页
     ·引物第30-31页
   ·实验方法第31-46页
     ·植物基因组的提取与纯化第31-32页
       ·植物基因组的提取第31-32页
       ·植物基因组的纯化第32页
     ·载体构建第32-34页
       ·PCR 扩增第32-33页
       ·连接反应第33页
       ·酶切和回收第33-34页
       ·超表达 AtMPT3 表达载体的构建第34页
       ·启动子驱动 GUS 报告基因表达载体的构建第34页
     ·PCR 鉴定突变体纯合植株第34页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第34-35页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第34-35页
       ·大肠杆菌细胞的转化第35页
     ·大肠杆菌中质粒的提取第35-36页
     ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第36页
       ·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备第36页
       ·冻融法转化农杆菌细胞第36页
     ·拟南芥的转化及转基因拟南芥的鉴定第36-37页
       ·拟南芥的转化第36-37页
       ·转基因拟南芥的鉴定第37页
     ·RNA 的提取纯化与反转录第37-38页
       ·TRIZOL 法提取 RNA第37页
       ·RNA 的纯化第37-38页
       ·RNA 中基因组 DNA 的去除第38页
       ·RNA 的反转录第38页
     ·实时定量 PCR第38-39页
     ·GUS 活性测定第39-40页
     ·转基因植物 GUS 组织化学染色分析第40-41页
     ·花粉活性的测定第41页
     ·死亡细胞数目的测定第41页
     ·ROS 含量检测第41-42页
       ·DAB 染色方法第41页
       ·NBT 染色方法第41页
       ·NBT 染色定量检测方法第41-42页
     ·丙二醛含量的测定第42页
       ·操作步骤第42页
       ·计算第42页
     ·芯片杂交及数据处理方法第42-43页
       ·芯片杂交第42-43页
       ·芯片数据分析第43页
     ·ATP 含量的测定原理及方法第43页
       ·ATP 含量的测定原理第43页
       ·ATP 含量的测定方法第43页
     ·氧电极法测定呼吸速率第43-44页
     ·石蜡切片制作方法第44-46页
3 结果与分析第46-65页
   ·AtMPT3 蛋白结构预测及氨基酸序列分析第46-47页
   ·AtMPT3 基因的组织表达模式第47-49页
   ·AtMPT3 调节拟南芥的生长发育及其机理探究第49-61页
     ·AtMPT3 超表达株系的获得第49-50页
     ·AtMPT3 超表达植株表型分析第50-52页
       ·超表达 AtMPT3 植株营养生长阶段发育异常第50页
       ·超表达 AtMPT3 株系生殖生长出现异常第50-52页
       ·超表达 AtMPT3 株系细胞水平上出现大量细胞死亡现象第52页
     ·超表达 AtMPT3 植株的表达谱分析第52-57页
       ·超表达 AtMPT3 株系中多条代谢过程发生改变第52-55页
       ·AtMPT3 基因过表达引起氧化胁迫相关基因的变化第55-57页
     ·AtMPT3 超表达株系活性氧水平改变第57-60页
       ·超表达 AtMPT3 植株中 ROS 含量受到上调第57-58页
       ·氧化胁迫相关基因受到 AtMPT3 基因调控第58-60页
     ·ROS 的积累早于 AtMPT3 超表达株系表型出现异常第60页
     ·ROS 的积累不是由于线粒体呼吸链受阻导致的第60-61页
   ·AtMPT3 调节拟南芥渗透胁迫耐性及其机理探究第61-65页
     ·AtMPT3 超表达植株对渗透胁迫敏感第61-63页
       ·AtMPT3 受渗透胁迫的诱导第61-62页
       ·OEMPT3 植株对渗透胁迫敏感第62-63页
     ·AtMPT3 调节拟南芥渗透胁迫耐性的机理分析第63-65页
       ·AtMPT3 在渗透胁迫下影响 ATP 的代谢及呼吸速率变化第63-64页
       ·AtMPT3 通过 ATP 调控渗透胁迫耐性第64-65页
4 讨论第65-67页
5 结论第67-68页
参考文献第68-78页
致谢第78-79页
攻读学位期间发表论文情况第79页

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