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褐藻胶裂解酶基因工程菌的高密度培养与褐藻水解产物的应用研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-13页
第一章 引言第13-27页
   ·褐藻的主要成分第13页
   ·褐藻胶第13-14页
     ·组成结构第13页
     ·褐藻胶的来源第13-14页
     ·褐藻胶的应用第14页
   ·甘露醇第14-15页
     ·甘露醇的性质第14页
     ·甘露醇的来源第14-15页
     ·甘露醇的应用第15页
   ·褐藻胶裂解酶第15-19页
     ·褐藻胶裂解酶的来源和分类第15-16页
     ·褐藻胶裂解酶的结构第16页
     ·褐藻胶裂解酶的作用机理第16-17页
     ·褐藻胶裂解酶的活性检测方法第17页
     ·褐藻胶裂解酶的基因工程研究第17-19页
   ·褐藻寡糖第19-20页
     ·褐藻寡糖的制备第19-20页
     ·褐藻寡糖的应用第20页
   ·重组大肠杆菌高密度发酵研究第20-25页
     ·影响高密度发酵的因素第21-24页
       ·重组大肠杆菌构建的影响因素第21页
       ·培养条件的影响第21-23页
       ·生长抑制因子的影响第23页
       ·补料控制的影响第23-24页
     ·重组大肠杆菌高密度发酵的研究进展第24-25页
   ·本研究的目的、意义和内容第25-27页
     ·研究目的和意义第25-26页
     ·研究内容第26-27页
第二章 重组褐藻胶裂解酶基因工程菌的高密度培养第27-44页
   ·引言第27页
   ·材料与设备第27-29页
     ·菌种第27页
     ·主要试剂第27-28页
     ·主要仪器设备第28页
     ·培养基第28-29页
   ·实验方法第29-33页
     ·培养方法第29-30页
       ·菌种活化第29页
       ·摇瓶培养第29页
       ·发酵罐的分批培养第29页
       ·发酵罐的分批补料培养第29-30页
     ·菌体的收集及粗酶液的制备第30页
     ·发酵罐采样及分析方法第30-32页
       ·发酵罐采样第30页
       ·菌体密度第30页
       ·细胞浓度第30页
       ·残糖浓度第30-31页
       ·酶活测定第31页
       ·总蛋白含量第31-32页
       ·平均比生长速率[82]第32页
     ·不同葡萄糖浓度对工程菌发酵的影响第32页
     ·不同蛋白胨浓度对工程菌发酵的影响第32页
     ·补料培养基中葡萄糖浓度对工程菌补料分批发酵的影响第32页
     ·IPTG 诱导条件对工程菌补料分批发酵的影响第32-33页
       ·IPTG 诱导时间第32-33页
       ·IPTG 浓度第33页
       ·单纯形优化法第33页
     ·褐藻胶裂解酶底物专一性的研究第33页
   ·结果与分析第33-43页
     ·葡萄糖标准曲线绘制第33-34页
     ·蛋白质标准曲线的绘制第34-35页
     ·不同葡萄糖浓度对工程菌发酵的影响(摇瓶发酵)第35-36页
     ·不同蛋白胨浓度对工程菌发酵的影响(摇瓶发酵)第36-38页
     ·褐藻胶裂解酶基因工程菌的分批发酵(发酵罐培养)第38-39页
     ·补料培养基中葡萄糖浓度对工程菌补料分批发酵的影响第39-40页
     ·IPTG 诱导条件对工程菌补料分批发酵的影响第40-42页
       ·IPTG 诱导时间第40-41页
       ·IPTG 浓度第41页
       ·单纯形优化法第41-42页
     ·底物专一性的研究第42-43页
   ·小结第43-44页
第三章 褐藻胶裂解酶水解褐藻胶条件的优化及褐藻寡糖的利用研究第44-57页
   ·引言第44页
   ·材料与设备第44-46页
     ·菌种第44-45页
     ·主要试剂第45页
     ·主要仪器设备第45页
     ·培养基第45-46页
   ·实验方法第46-49页
     ·培养方法第46页
     ·菌体收集及粗酶液制备及纯化第46-47页
     ·酶活测定第47页
     ·褐藻胶水解液中褐藻寡糖的测定第47页
     ·不同因素对褐藻胶裂解酶水解效果的研究第47-48页
       ·温度对褐藻胶裂解酶水解效果的影响第47页
       ·pH 对褐藻胶裂解酶水解效果的影响第47页
       ·水解时间对褐藻胶裂解酶水解效果的影响第47-48页
       ·加酶量对褐藻胶裂解酶水解效果的影响第48页
       ·底物浓度对褐藻胶裂解酶水解效果的影响第48页
     ·正交试验设计第48页
     ·褐藻寡糖的制备第48-49页
     ·褐藻胶水解液对双歧杆菌的增值作用第49页
       ·双歧杆菌生长曲线的绘制第49页
       ·菌落计数第49页
   ·结果与分析第49-56页
     ·不同因素对褐藻胶裂解酶水解效果的研究第49-52页
       ·温度对褐藻胶裂解酶水解效果的影响第49-50页
       ·pH 对褐藻胶裂解酶水解效果的影响第50-51页
       ·时间对褐藻胶裂解酶水解效果的影响第51页
       ·加酶量对褐藻胶裂解酶水解效果的影响第51-52页
       ·底物浓度对藻胶酶解效果的影响第52页
     ·正交实验结果第52-54页
     ·褐藻胶水解条件的验证试验第54页
     ·褐藻寡糖的制备第54-55页
     ·褐藻寡糖对双歧杆菌的增值作用第55-56页
       ·双歧杆菌生长曲线的绘制第55页
       ·不同寡糖培养基中双歧杆菌计数第55-56页
   ·结论第56-57页
第四章 热带假丝酵母菌发酵甘露醇产乙醇的条件研究第57-69页
   ·前言第57-58页
   ·材料与设备第58-59页
     ·菌种第58页
     ·主要试剂第58页
     ·仪器设备第58页
     ·培养基第58-59页
   ·试验方法第59-61页
     ·培养方法第59页
     ·菌体密度测定第59页
     ·乙醇含量测定第59-60页
     ·不同甘露醇浓度发酵实验第60页
     ·不同因素对产乙醇效果的研究第60-61页
       ·温度对产乙醇效果的影响第60页
       ·发酵时间对产乙醇效果的影响第60页
       ·初始 pH 对产乙醇效果的影响第60-61页
       ·接种量对产乙醇效果的影响第61页
       ·装液量对产乙醇效果的影响第61页
     ·发酵条件正交试验设计第61页
   ·结果与分析第61-68页
     ·乙醇标准曲线制第61-62页
     ·不同甘露醇浓度发酵实验第62-63页
     ·温度对产乙醇效果的影响第63页
     ·发酵时间对产乙醇效果的影响第63-64页
     ·初始 pH 对产乙醇效果的影响第64-65页
     ·接种量对产乙醇效果的影响第65-66页
     ·装液量对甘露醇发酵的影响第66页
     ·正交试验第66-68页
   ·结论第68-69页
全文总结第69-70页
参考文献第70-75页
附录第75-76页
致谢第76-77页
在校期间发表论文第77页

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