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玉米TIFY家族ZmJAZ14基因的功能验证

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 引言第14-24页
   ·茉莉酸激素在植物体生命过程中的重要作用第14-15页
     ·茉莉素是一类植物内源激素第14页
     ·茉莉酸类化合物的受体第14-15页
   ·TIFY 家族简介第15页
   ·TIFY 家族成员 JAZ 蛋白概述第15-18页
     ·JAZs 蛋白的发现第15-16页
     ·JAZ 蛋白的结构第16页
     ·JAZ 蛋白与茉莉酸信号通路第16-18页
   ·JAZ 蛋白通过与其它因子互作行使其生物学功能第18-22页
     ·JAZ 蛋白与 COI1 互作第18-19页
     ·JAZs 与转录因子 MYC2、 MYC3 和 MYC4 互作第19-20页
     ·JAZs 与共阻遏物 NINJA、TPL 和 HDA6 互作第20页
     ·JAZs 与植物的育性第20-21页
     ·JAZs 调控花青素积累和表皮毛发育第21页
     ·JAZs 与乙烯信号通路第21-22页
     ·JAZs 与 GA 信号通路第22页
   ·本研究的目的意义第22-24页
第二章 玉米转录因子 ZMJAZ4 和 ZMJAZ14 的克隆与功能分析第24-39页
   ·实验材料第24-26页
     ·植物材料第24页
     ·菌株与质粒第24页
     ·生化酶及试剂第24页
     ·常用溶液配制第24页
     ·质粒 DNA 提取所需溶液第24页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备所需溶液第24-25页
     ·MS 培养基配制第25页
     ·主要仪器设备第25页
     ·实验所用引物第25-26页
   ·研究方法第26-27页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第26页
     ·重组质粒的转化第26页
     ·碱裂解法少量提取质粒 DNA第26-27页
     ·转录因子的克隆第27页
   ·结果与分析第27-38页
     ·玉米特异转录因子的预测第27页
     ·预测所得玉米转录因子的芯片分析第27-28页
     ·玉米 ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 基因的克隆第28-29页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 结构域分析第29-30页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 的家族分析第30-32页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 的亚细胞定位第32-34页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 的时空表达验证第34页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 的表达模式受逆境胁迫与激素刺激调控第34-38页
   ·小结第38-39页
第三章 转 ZMJAZ14 基因拟南芥的获得与表型鉴定第39-58页
   ·实验材料第39-40页
     ·植物材料第39页
     ·菌株与质粒第39页
     ·培养基的配制第39页
     ·拟南芥侵染液第39页
     ·实验所用引物第39-40页
   ·研究方法第40-43页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第40页
     ·农杆菌转化第40页
     ·农杆菌的转化与鉴定第40页
     ·拟南芥基因组 DNA 的提取第40-41页
     ·转基因拟南芥植株的 PCR 检测第41页
     ·拟南芥总 RNA 的提取第41-42页
     ·RT-PCR 分析第42页
     ·拟南芥的培育及生长第42页
     ·Real-time PCR第42-43页
     ·拟南芥的遗传转化及鉴定第43页
     ·BASTA 喷洒筛选拟南芥抗性植株第43页
     ·草铵膦异丙胺盐抗性平板筛选拟南芥抗性植株第43页
   ·结果与分析第43-57页
     ·植物表达载体的构建第43-45页
     ·拟南芥的转化与 T0代阳性植株筛选第45-46页
     ·T0代阳性植株 PCR 检测第46页
     ·T0代植株 RT-PCR 检测结果第46-47页
     ·T1代植株分离比检测第47页
     ·T1代植株 PCR 检测第47-48页
     ·T1代植株 PCR 检测第48页
     ·T1代植株花期检测第48-49页
     ·T2代植株纯合系筛选第49-50页
     ·过表达 ZmJAZ14-NVP64B 与 ZmJAZ14-NEARB 的差异第50-51页
     ·激素处理 T2代拟南芥验证 ZmJAZ14 功能第51-54页
     ·逆境胁迫处理 T2代拟南芥验证 ZmJAZ14 功能第54-57页
   ·小结第57-58页
第四章 ZMJAZ4 和 ZMJAZ14 通过与其它因子互作调节植物体生物进程第58-72页
   ·实验材料第58-60页
     ·植物材料第58页
     ·菌株与质粒第58页
     ·培养基的配制第58页
     ·实验所用引物第58-60页
   ·研究方法第60-62页
     ·Y2HGOLD 酿酒酵母感受态细胞的制备第60页
     ·酿酒酵母转化第60-61页
     ·酿酒酵母的转化与鉴定第61页
     ·质粒 DNA 的小量提取第61页
     ·酵母的质粒 PCR 检测第61页
     ·酿酒酵母的培育及生长第61-62页
     ·cDNA 文库的构建第62页
   ·结果与分析第62-70页
     ·诱饵载体 pGBKT7-ZmJAZ4、pGBKT7-ZmJAZ14 的构建第62页
     ·拟南芥基因的克隆第62-64页
     ·融合拟南芥基因的 AD 载体构建第64页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 无自激活活性并可形成同/异源二聚体第64-65页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 可与拟南芥基因互作第65-67页
     ·玉米籽粒 cDNA 文库的构建第67-68页
     ·ZmJAZ14 酵母文库的构建与筛选第68页
     ·ZmJAZ14 酵母文库的鉴定第68-69页
     ·ZmJAZ14 酵母文库测序结果分析第69-70页
   ·小结第70-72页
第五章 讨论第72-74页
   ·玉米 JAZS 蛋白可以形成同/异源二聚体第72页
   ·JAZS 把茉莉酸信号通路与其它通路联系到一起第72页
   ·拟南芥转化体表型证明 ZMJAZ14 基因为功能基因第72页
   ·玉米 ZMJAZ4、ZMJAZ14 蛋白拥有典型的 JAZ 蛋白特性第72页
   ·玉米 ZMJAZ4、ZMJAZ14 具有特定的蛋白功能第72-74页
第六章 结论第74-77页
   ·结论第74-76页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 不是转录因子第74页
     ·ZmJAZ4 可以与 ZmJAZ14 互作第74页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 可以与拟南芥 MYB21 和 MYB24 转录因子互作第74页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 可以与拟南芥 PAP1 和 GL1 转录因子互作第74-75页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 在胚乳中特异表达第75页
     ·ZmJAZ4 和 ZmJAZ14 的表达受激素与胁迫调控第75页
     ·拟南芥中组成型过表达 ZmJAZ14 基因使转化体对激素或胁迫敏感第75-76页
   ·创新点第76-77页
参考文献第77-83页
致谢第83-84页
作者简历第84页

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