| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 主要英文缩写词 | 第9-11页 |
| 第一部分 引言 | 第11-13页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第13-27页 |
| 一、 材料 | 第13-15页 |
| 1．病毒株及细胞株 | 第13页 |
| 2．血清标本 | 第13页 |
| 3．质粒和菌种 | 第13页 |
| 4．细胞培养所用试剂 | 第13页 |
| 5．分子克隆所用的试剂 | 第13-14页 |
| 6．蛋白表达与纯化所用试剂 | 第14页 |
| 7．抗体 | 第14页 |
| 8．主要仪器和设备 | 第14-15页 |
| 9．主要的生物软件及分析工具 | 第15页 |
| 二、 方法 | 第15-27页 |
| 1． 病毒的增殖及间接免疫荧光法（IFA）验证病毒增殖情况 | 第15页 |
| 2． 病毒 RNA 的提取 | 第15-16页 |
| 3． Den2 E 基因片段的扩增及 TA 克隆的构建。 | 第16-19页 |
| 4． Den2 E 基因 DⅢ区片段的扩增及表达载体的构建 | 第19-22页 |
| 5． BL21（DE3）感受态细胞制备 | 第22-23页 |
| 6． 重组蛋白的小量诱导表达及免疫反应性检测 | 第23-24页 |
| 7． 重组蛋白的大量表达与纯化 | 第24-25页 |
| 8． 重组蛋白抗原应用于 ELISA 检测 | 第25-26页 |
| 9． IFA 检测临床标本中抗体情况 | 第26页 |
| 10． ELISA 结果的统计处理 | 第26-27页 |
| 第三部分 结果 | 第27-43页 |
| 一、 病毒感染后的细胞形态变化及 IFA 检测结果 | 第27-28页 |
| 二、 Den2 全长 E 基因片段的扩增、TA 克隆及序列分析 | 第28-29页 |
| 1． Den2 全长 E 基因片段的扩增结果 | 第28页 |
| 2． Den2E TA 克隆的酶切鉴定及序列分析 | 第28-29页 |
| 三、 E 基因 DⅢ区的扩增及重组质粒的构建 | 第29-32页 |
| 1． Den2 E 基因 DⅢ区的扩增 | 第29-31页 |
| 2． DⅢ区重组表达质粒的酶切鉴定 | 第31-32页 |
| 四、 重组质粒的小量诱导表达与免疫反应性鉴定 | 第32-34页 |
| 1． 重组质粒的小量诱导表达 | 第32-33页 |
| 2． 重组蛋白 Western blot 鉴定免疫反应性。 | 第33-34页 |
| 五、 重组蛋白的大量表达与纯化 | 第34-37页 |
| 1． 重组蛋白的大量表达及包涵体的洗涤 | 第34-35页 |
| 2． 重组蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| 3． 纯化后重组蛋白的免疫反应性鉴定 | 第36-37页 |
| 六、 重组蛋白 F4R1 间接 ELISA 法检测临床血清 IgM 抗体 | 第37-43页 |
| 1． 本研究重组蛋白间接 ELISA 法检测临床血清 IgM 抗体结果 | 第37-41页 |
| 2． 本研究重组蛋白间接 ELISA 法检测临床血清 IgM 抗体结果的统计分析 | 第41-42页 |
| 3． 型别交叉反应 | 第42-43页 |
| 第四部分 讨论 | 第43-47页 |
| 第五部分 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 综述 | 第51-58页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
