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热处理诱导沙梨差异表达基因的克隆及其表达动态的分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词表第10-11页
第一章 文献综述第11-19页
 1 差异表达基因的研究进展第11-18页
   ·热激蛋白基因第11-14页
     ·HSP基因的分类第11-13页
     ·HSP70s的结构特征第13页
     ·热激蛋白基因的功能第13-14页
   ·几丁质酶基因的研究进展第14-15页
     ·几丁质酶基因的分类第14页
     ·几丁质酶基因的功能第14-15页
   ·捕光色素蛋白复合体基因第15-16页
   ·小分子热激蛋白基因第16-17页
   ·金属硫蛋白基因第17-18页
 2 研究目的与意义第18-19页
第二章 热处理过程中沙梨植株相关基因的动态表达与病毒含量变化之间的关系第19-28页
 1 研究材料和试剂第19-20页
   ·研究材料第19页
   ·主要试剂第19-20页
 2 研究方法第20-23页
   ·恒温热处理第20页
   ·总RNA的提取第20页
   ·荧光定量(Real-time)PCR和RT-PCR检测第20-23页
     ·引物的设计与合成第21页
     ·RT第21-22页
     ·半定量RT-PCR第22-23页
     ·Real-time PCR第23页
 3 结果与分析第23-26页
   ·恒温热处理不同时间ASGV的含量变化第23-24页
   ·恒温热处理不同时间段差异表达基因的表达动态第24-26页
     ·受热处理诱导的3个基因在热处理过程中的表达动态第24-25页
     ·热处理诱导沙梨下调表达基因的动态分析第25-26页
 4 结论与讨论第26-28页
第三章 沙梨热激蛋白和几丁质酶基因的全长克隆及序列分析第28-45页
 1 研究材料与方法第28-34页
   ·研究材料与试剂第28页
   ·核酸的提取第28-29页
     ·DNA的提取第28-29页
     ·总RNA的提取及RT第29页
   ·PCR的扩增第29-33页
     ·HSP基因的PCR扩增第29-31页
     ·EC基因的PCR扩增第31-33页
   ·PCR产物的回收克隆和测序第33-34页
     ·PCR产物的回收第33页
     ·连接第33页
     ·转化大肠杆菌感受态细胞第33-34页
     ·克隆测序第34页
 2 结果与分析第34-43页
   ·沙梨植株HSP70基因的全长克隆第34-35页
   ·沙梨"黄花"植株HSP70遗传进化分析第35-38页
     ·进化树分析第35-37页
     ·HSP基因的分子生物学特征第37-38页
   ·沙梨植株EC基因的全长克隆第38-40页
   ·沙梨"黄花"植株EC基因遗传进化分析第40-43页
     ·进化树分析第40-41页
     ·EC基因的分子生物学特征分析第41-43页
 3 结论与讨论第43-45页
参考文献第45-51页
附录:主要试剂及溶液的配制第51-53页
致谢第53页

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