| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-23页 |
| ·柑橘大实蝇及其危害 | 第13-15页 |
| ·分类地位 | 第13页 |
| ·形态特征 | 第13页 |
| ·柑橘大实蝇的危害 | 第13-14页 |
| ·柑橘大实蝇的防治 | 第14-15页 |
| ·转录组 | 第15页 |
| ·昆虫滞育 | 第15-16页 |
| ·热激蛋白 | 第16-17页 |
| ·HSP 与昆虫滞育之间的关系 | 第17-18页 |
| ·RNAi 的研究现状 | 第18-20页 |
| ·RNAi 的发现 | 第18-19页 |
| ·RNAi 的作用机制 | 第19-20页 |
| ·RNAi 技术的应用 | 第20-21页 |
| ·在基因功能方面的研究 | 第20页 |
| ·在昆虫学研究中的应用 | 第20-21页 |
| ·研究的内容 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 柑橘大实蝇转录组测序分析 | 第23-33页 |
| ·试验材料 | 第23页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第23页 |
| ·试验方法 | 第23-27页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·RNA 文库构建 | 第24-26页 |
| ·测序 | 第26-27页 |
| ·试验结果 | 第27-31页 |
| ·数据量统计 | 第27页 |
| ·转录本拼接 | 第27-28页 |
| ·基因表达量统计 | 第28-29页 |
| ·样本间的基因表达差异分析 | 第29-30页 |
| ·所测样本的 unigenes 在其他昆虫中的分布 | 第30页 |
| ·差异基因 Go 功能注释 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 柑橘大实蝇 hsp23、hsp70 和 hsp90 基因克隆及序列分析 | 第33-65页 |
| ·试验材料 | 第33-34页 |
| ·生物材料 | 第33页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| ·试剂配制 | 第33-34页 |
| ·试验器材 | 第34页 |
| ·试验方法 | 第34-46页 |
| ·柑橘大实蝇总 RNA 提取 | 第34页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第34-35页 |
| ·hsp23、hsp70、hsp90 基因中间片段的获得 | 第35-38页 |
| ·扩增 hsp23、hsp70、hsp90 基因的全长序列 | 第38-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-64页 |
| ·RNA 的纯度检测 | 第46页 |
| ·中间片段的扩增结果 | 第46-48页 |
| ·RACE 结果与分析 | 第48-55页 |
| ·三种热激蛋白系统发育分析 | 第55-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| 第四章 柑橘大实蝇内参基因的筛选 | 第65-73页 |
| ·试验材料 | 第65页 |
| ·供试昆虫 | 第65页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第65页 |
| ·试验器材 | 第65页 |
| ·试验方法 | 第65-68页 |
| ·内参基因的克隆 | 第65-67页 |
| ·内参基因在柑橘大实蝇不同时期的表达分析 | 第67-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-70页 |
| ·总 RNA 质量检测及反转录 | 第68页 |
| ·内参基因片段 PCR 的扩增结果 | 第68页 |
| ·10 种内参基因在柑橘大实蝇不同时期的表达结果 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| 第五章 利用 qRT-PCR 检测 hsp23、hsp70 和 hsp90 基因在不同时期的表达状况 | 第73-79页 |
| ·试验材料 | 第73页 |
| ·供试昆虫 | 第73页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第73页 |
| ·试验器材 | 第73页 |
| ·试验方法 | 第73-74页 |
| ·提取不同时期柑橘大实蝇总 RNA | 第73页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第73页 |
| ·qRT-PCR 检测 | 第73-74页 |
| ·结果与分析 | 第74-76页 |
| ·总 RNA 质量检测及反转录 | 第74页 |
| ·hsp23、hsp70 及 hsp90 在不同时期的 qRT-PCR 结果 | 第74-76页 |
| ·讨论 | 第76-79页 |
| 第六章 柑橘大实蝇 RNAi 技术体系的研究与建立 | 第79-85页 |
| ·试验材料 | 第79-80页 |
| ·供试昆虫 | 第79页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第79页 |
| ·试验器材 | 第79-80页 |
| ·试验方法 | 第80-82页 |
| ·含 T7 启动子的底物模板的制备 | 第80页 |
| ·dsRNA 的合成与纯化 | 第80-81页 |
| ·dsRNA 质量和浓度 | 第81页 |
| ·显微注射 | 第81页 |
| ·qRT-PCR 检测沉默效率 | 第81-82页 |
| ·结果与分析 | 第82-83页 |
| ·含 T7 启动子的 18s rRNA 序列获得 | 第82页 |
| ·qRT-PCR 检测结果分析 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| 第七章 全文总结 | 第85-87页 |
| ·结论 | 第85页 |
| ·创新点 | 第85-86页 |
| ·展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果目录 | 第95-96页 |
