影响睾丸注射法制备转基因小鼠三个因素的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第9-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-26页 |
| ·转基因动物生产方法 | 第12-16页 |
| ·原核显微注射法 | 第12-13页 |
| ·慢病毒载体导入法 | 第13-14页 |
| ·体细胞核移植法 | 第14-15页 |
| ·胚胎干细胞介导法 | 第15页 |
| ·雄性生殖细胞介导转基因法 | 第15-16页 |
| ·雄性生殖细胞介导转基因动物的方法 | 第16-25页 |
| ·精子孵育法 | 第16-17页 |
| ·精原干细胞移植法 | 第17页 |
| ·睾丸注射法 | 第17-25页 |
| ·本研究目的意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-38页 |
| ·试验材料 | 第26-29页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要试剂配制 | 第27-28页 |
| ·手术器械 | 第28-29页 |
| ·实验设计 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-37页 |
| ·质粒转化、提取与纯化 | 第30-31页 |
| ·睾丸注射方法 | 第31-32页 |
| ·小鼠精子品质和睾丸损伤检测 | 第32-33页 |
| ·小鼠睾丸、精子和转基因仔鼠荧光检测 | 第33-34页 |
| ·仔鼠基因组DNA提取及PCR检测 | 第34-37页 |
| ·数据分析 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-49页 |
| ·质粒与EGFP基因PCR产物鉴定 | 第38页 |
| ·睾丸注射方法对制备转基因动物的影响 | 第38-43页 |
| ·小鼠睾丸检测 | 第38-40页 |
| ·小鼠精子阳性率检测 | 第40-41页 |
| ·仔鼠EGFP基因PCR检测及PCR产物测序 | 第41-43页 |
| ·转基因仔鼠荧光检测 | 第43页 |
| ·转染试剂对制备转基因动物的影响 | 第43-47页 |
| ·小鼠睾丸荧光检测 | 第43-44页 |
| ·小鼠精子常规检测 | 第44-45页 |
| ·小鼠精子荧光检测 | 第45-46页 |
| ·仔鼠EGFP基因PCR检测 | 第46-47页 |
| ·转基因仔鼠荧光检测 | 第47页 |
| ·不同交配时间对转基因仔鼠生产效率的研究 | 第47-49页 |
| ·仔鼠EGFP基因PCR检测 | 第47-48页 |
| ·转基因仔鼠荧光检测 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| ·睾丸注射方法对小鼠生精细胞转染效率的影响 | 第49-50页 |
| ·不同转染试剂对生精细胞体内转染的影响 | 第50-51页 |
| ·交配时间对睾丸注射建立转基因小鼠的影响 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
