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大豆耐盐基因GmHAL3a和GmHAL3b的克隆与初步功能验证

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
縮略语第10-11页
第一章 文献综述第11-23页
   ·植物的耐盐性研究进展第11-15页
     ·盐胁迫对植物生长的影响第11-13页
     ·植物耐盐机理第13-15页
   ·耐盐基因HAL3的研究进展第15-20页
     ·HAL3基因在植物体内的分布第16页
     ·HAL3基因的功能研究概况第16-20页
   ·本研究的目的和意义第20-23页
第二章 大豆耐盐基因HAL3a和HAL3b的克隆和表达分析第23-41页
   ·材料第23页
     ·植物材料第23页
     ·载体和菌株第23页
     ·主要试剂第23页
   ·实验方法第23-29页
     ·大豆总RNA的提取及cDNA第一链的合成第23-24页
     ·大豆两个GmHAL3基因的cDNA全长PCR扩增第24-25页
     ·回收纯化目的基因第25-26页
     ·PCR产物的连接第26页
     ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的转化第26-27页
     ·质粒的提取第27页
     ·RNA干扰片段的扩增第27-28页
     ·大豆两个GmHAL3基因的生物信息学分析第28页
     ·组织表达分析第28页
     ·非生物胁迫分析第28页
     ·实时荧光定量PCR(Real-time Quantative PCR)第28-29页
   ·结果第29-38页
     ·大豆两个GmHAL3基因cDNA全长序列及RNA干扰片段的获得第29-30页
     ·大豆两个GmHAL3基因的氨基酸序列分析第30-33页
     ·GmHAL3a和GmHAL3b基因的组织表达分析第33-36页
     ·GmHAL3a和GmHAL3b基因的非生物胁迫分析第36-38页
   ·讨论第38-41页
     ·大豆两个GmHAL3基因及RNA干扰片段的克隆和序列分析第38-39页
     ·大豆两个GmHAL3基因组织表达分析第39页
     ·大豆两个GmHAL3基因非生物胁迫分析第39-41页
第三章 大GmHAL3a和GmHAL3b基因转化拟南芥及初步功能验证第41-63页
   ·材料第41-42页
     ·植物材料第41页
     ·载体和菌株第41页
     ·主要试剂第41-42页
     ·PCR引物第42页
   ·实验方法第42-51页
     ·表达载体的构建第42-44页
     ·干扰载体的构建第44-45页
     ·重组质粒转化根癌农杆菌感受态细胞EHA105第45页
     ·GmHAL3a和GmHAL3b基因转化拟南芥第45-46页
     ·转基因植株的筛选及鉴定第46-48页
     ·转基因拟南芥植株的初步功能分析第48-51页
   ·结果与分析第51-61页
     ·表达载体的构建第51-53页
     ·干扰载体的构建第53-54页
     ·转GmHAL3a和GmHAL3b基因拟南芥的鉴定第54-55页
     ·转基因拟南芥的初步功能验证第55-61页
   ·讨论第61-63页
     ·转基因株系生长情况及拟南芥三个内源基因表达情况分析第61-62页
     ·不同胁迫对拟南芥种子萌发和幼苗期植株根系影响的分析第62页
     ·不同处理对植株体内脯氨酸含量及活性氧含量影响的分析第62-63页
第四章 全文结论第63-65页
创新之处第65-67页
参考文献第67-77页
致谢第77页

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