| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-31页 |
| 1 小鹅瘟病原学 | 第11-12页 |
| ·形态和理化学特性 | 第11-12页 |
| ·培养特性 | 第12页 |
| 2 GPV分子生物学研究进展 | 第12-17页 |
| ·GPV基因组的结构 | 第12-14页 |
| ·GPV基因编码蛋白 | 第14-16页 |
| ·鹅细小病毒分类学地位 | 第16-17页 |
| 3 流行病学 | 第17页 |
| 4 症状与病理变化 | 第17-18页 |
| 5 小鹅瘟的诊断 | 第18-22页 |
| ·临床诊断 | 第18-19页 |
| ·血清学诊断方法 | 第19-21页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第21-22页 |
| 6 防制 | 第22-24页 |
| ·被动免疫 | 第22-23页 |
| ·疫苗免疫 | 第23页 |
| ·GPV基因工程疫苗 | 第23-24页 |
| 7 单克隆抗体技术及其研究进展 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-31页 |
| 研究一 鹅细小病毒VP3基因在大肠杆菌中的优化表达 | 第31-44页 |
| 摘要 | 第31页 |
| Abstract | 第31-32页 |
| 1 材料 | 第32-34页 |
| ·病毒 | 第32页 |
| ·血清 | 第32页 |
| ·菌种与载体 | 第32页 |
| ·实验主要试剂 | 第32页 |
| ·试验所用溶液 | 第32-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| 2 方法 | 第34-39页 |
| ·鹅细小病毒的传代 | 第34页 |
| ·鹅细小病毒DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·鹅细小病毒VP3基因的扩增 | 第35页 |
| ·pMD18-T-VP3重组质粒的构建 | 第35-36页 |
| ·重组质粒pCold-TF-VP3的构建 | 第36-37页 |
| ·VP3基因的表达及SDS-PAGE分析 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白的大量诱导表达 | 第38页 |
| ·镍离子亲和层析法纯化重组蛋白 | 第38-39页 |
| ·Western-blotting分析融合蛋白的反应原性 | 第39页 |
| 3 结果 | 第39-42页 |
| ·PCR扩增VP3基因 | 第39页 |
| ·重组质粒pMD18-T-VP3的酶切验证 | 第39-40页 |
| ·pCold-TF-VP3重组质粒的酶切验证 | 第40页 |
| ·VP3在大肠杆菌中的大量诱导表达 | 第40-41页 |
| ·Western-blotting检测VP3的原核表达 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-44页 |
| 研究二 抗鹅细小病毒单克隆抗体的制备及初步应用 | 第44-57页 |
| 摘要 | 第44页 |
| Abstract | 第44-46页 |
| 1 材料 | 第46页 |
| ·病毒和蛋白 | 第46页 |
| ·免疫动物和细胞株 | 第46页 |
| ·主要试剂及细胞培养基 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-51页 |
| ·抗原的制备 | 第46-47页 |
| ·免疫小鼠 | 第47页 |
| ·细胞融合 | 第47-48页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第48-49页 |
| ·杂交瘤细胞株的克隆化 | 第49页 |
| ·单克隆抗体的稳定性检测 | 第49页 |
| ·腹水的制备及效价检测 | 第49-50页 |
| ·单抗的生物素标记及效价的测定 | 第50页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第50-51页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法的特异性检测 | 第51页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法临界值的确定 | 第51页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法的临床应用 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-55页 |
| ·鹅细小病毒的纯化 | 第51-52页 |
| ·最佳抗原包被浓度和最佳血清稀释度的确定 | 第52页 |
| ·单克隆抗体效价的测定结果 | 第52页 |
| ·腹水纯化 | 第52-53页 |
| ·单克隆抗体的稳定性检测 | 第53页 |
| ·单克隆抗体的特异性检测 | 第53页 |
| ·Western-blotting 检测结果 | 第53-54页 |
| ·单克隆抗体旳生物素标记及效价测定 | 第54页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第54页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法的特异性检测 | 第54页 |
| ·双抗体夹心EUSA方法临界值的确定 | 第54-55页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法的应用 | 第55页 |
| 4 讨论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-57页 |
| 研究三 抗GPV单克隆抗体的抗原表位区分析 | 第57-65页 |
| 摘要 | 第57页 |
| Abstract | 第57-58页 |
| 1 材料 | 第58-59页 |
| ·病毒 | 第58页 |
| ·细胞、质粒和感受态菌 | 第58页 |
| ·主要试剂 | 第58页 |
| ·引物设计与合成 | 第58-59页 |
| 2 方法 | 第59-61页 |
| ·PCR扩增 | 第59-60页 |
| ·pMD18-T-VP3重组质粒的构建 | 第60页 |
| ·pCAGGS-VP3真核表达重组质粒的构建及鉴定 | 第60-61页 |
| ·真核重组质粒瞬时转染分析 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-63页 |
| ·PCR扩增 | 第61页 |
| ·四个真核表达质粒pCAGGS-VP3的鉴定 | 第61-62页 |
| ·真核重组质粒瞬时转染分析 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-65页 |
| 全文总结 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
