| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 小麦转基因技术的研究进展 | 第10-15页 |
| ·基因枪法 | 第11-13页 |
| ·影响基因枪法转化率的因素 | 第12-13页 |
| ·基因枪法的优缺点 | 第13页 |
| ·农杆菌介导法 | 第13-14页 |
| ·花粉管通道法 | 第14-15页 |
| ·花粉管通道法的机理 | 第14页 |
| ·花粉管通道法的研究进展 | 第14-15页 |
| ·花粉管通道法的优缺点 | 第15页 |
| 2 转化的相关基因概况 | 第15-18页 |
| ·OsNAC1的研究进展 | 第15-16页 |
| ·植物转录因子概述 | 第15-16页 |
| ·NAC转录因子研究进展 | 第16页 |
| ·OsNAC1转录因子的研究进展 | 第16页 |
| ·GAFP的研究进展 | 第16-18页 |
| ·GAFP概述 | 第16-17页 |
| ·GAFP基因的克隆和应用 | 第17-18页 |
| ·ThpI的研究进展 | 第18页 |
| 3 转基因小麦鉴定和基因表达 | 第18-20页 |
| ·选择标记基因和报告基因 | 第19页 |
| ·PCR检测 | 第19页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第19-20页 |
| ·Southern杂交检测 | 第20页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 基因枪法介导OsNAC1、GAFP和ThpI基因转化小麦 | 第21-32页 |
| 1 材料与方法 | 第21-27页 |
| ·供试材料 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·质粒的制备和纯化 | 第22-24页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·质粒转化大肠杆菌 | 第22页 |
| ·质粒小量提取 | 第22-23页 |
| ·质粒大量提取 | 第23页 |
| ·质粒DNA的纯化 | 第23-24页 |
| ·剥取幼胚 | 第24页 |
| ·基因枪轰击及前期准备 | 第24-25页 |
| ·轰击前幼胚的准备 | 第24页 |
| ·微弹(金粒)制备 | 第24页 |
| ·微弹包被 | 第24页 |
| ·基因枪轰击 | 第24-25页 |
| ·植株再生 | 第25页 |
| ·转基因阳性植株的检测 | 第25-27页 |
| ·植物总DNA提取 | 第25页 |
| ·PCR扩增 | 第25-27页 |
| ·转OsNAC1基因T_0代PCR检测阳性植株 | 第25-26页 |
| ·转GAFP基因T_0代PCR检测阳性植株 | 第26-27页 |
| ·转ThpI基因T_0代PCR检测阳性植株 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-30页 |
| ·转化植株的再生 | 第27-28页 |
| ·转OsNAC1基因PCR检测 | 第28-29页 |
| ·转GAFP基因PCR检测 | 第29页 |
| ·转ThpI基因PCR检测 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 转OsNAC1的T_1代植株的基因表达及抗逆性 | 第32-45页 |
| 1 材料和方法 | 第32-37页 |
| ·转基因植株T_1代的PCR检测 | 第32-33页 |
| ·转基因植株总RNA的提取 | 第32-33页 |
| ·反转录合成cDNA | 第33页 |
| ·cDNA的PCR检测 | 第33页 |
| ·转基因植株T_1代的RT-PCR检测 | 第33-34页 |
| ·转基因植株T_1代生理指标测定 | 第34-37页 |
| ·脯氨酸(Pro)含量的测定 | 第35页 |
| ·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第35-36页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 | 第36页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-42页 |
| ·转基因植株T_1代的PCR检测 | 第37-38页 |
| ·转基因植株T_1代的RT-PCR检测 | 第38页 |
| ·转基因植株T_1代生理测试 | 第38-42页 |
| ·Pro含量的测定 | 第38-39页 |
| ·MDA含量的测定 | 第39-40页 |
| ·SOD活性的测定 | 第40-41页 |
| ·POD活性的测定 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-45页 |
| ·外源基因的表达 | 第42-43页 |
| ·抗逆生理指标测定 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |