| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 引言 | 第8-22页 |
| ·病原学 | 第8-12页 |
| ·鸭坦布苏病毒的形态结构及理化特性 | 第8页 |
| ·基因组结构及特点 | 第8-9页 |
| ·基因组编码蛋白的生物学功能与特性 | 第9-12页 |
| ·E蛋白表位研究 | 第12页 |
| ·流行病学 | 第12-13页 |
| ·DTMUV的致病机制 | 第13页 |
| ·症状和病变 | 第13-14页 |
| ·DTMU的诊断 | 第14-17页 |
| ·病毒分离鉴定 | 第14页 |
| ·血清学诊断方法 | 第14-15页 |
| ·抗原检测方法 | 第15-17页 |
| ·DTMU的预防 | 第17页 |
| ·ELISA技术概述 | 第17-18页 |
| ·ELISA技术原理 | 第17-18页 |
| ·ELISA技术的特点 | 第18页 |
| ·ELISA技术在DTMUV检测中以及其它动物疾病及安全检测的应用 | 第18页 |
| ·单克隆抗体技术概述 | 第18-21页 |
| ·单克隆抗体技术的原理 | 第19页 |
| ·单克隆抗体制备的技术路线 | 第19-20页 |
| ·单克隆抗体技术的特点 | 第20页 |
| ·单克隆抗体技术在鸭坦布苏病毒(DTMUV)研究中的应用 | 第20-21页 |
| ·本文研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 实验一 鸭坦布苏病毒E蛋白基因的原核表达 | 第22-30页 |
| ·材料与方法 | 第22-26页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-28页 |
| ·PCR扩增 | 第26页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第26-27页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第27页 |
| ·Western-blot分析 | 第27-28页 |
| ·融和蛋白E的大量表达及纯化 | 第28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 3 实验二 鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立 | 第30-40页 |
| ·材料与方法 | 第30-32页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·结果 | 第32-38页 |
| ·纯化的DTMUV蛋白定量 | 第32页 |
| ·抗原最佳包被浓度和最佳血清稀释度的确定 | 第32-33页 |
| ·抗原最佳包被条件的确定 | 第33页 |
| ·酶标二抗最佳工作浓度的确定 | 第33-34页 |
| ·酶标二抗最佳作用时间 | 第34页 |
| ·间接ELISA阴阳性临界值的确定 | 第34-35页 |
| ·特异性试验 | 第35页 |
| ·敏感性试验 | 第35-36页 |
| ·重复性试验 | 第36-38页 |
| ·对比试验 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 4 实验三 鸭坦布苏病毒E蛋白中和性单克隆抗体的制备 | 第40-51页 |
| ·材料与方法 | 第40-45页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-45页 |
| ·结果 | 第45-49页 |
| ·抗原的制备 | 第45页 |
| ·间接ELISA检测方法最佳工作条件的建立 | 第45页 |
| ·免疫小鼠抗体水平的检测 | 第45-46页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第46页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备 | 第46页 |
| ·细胞融合和杂交瘤细胞的建立 | 第46页 |
| ·杂交瘤细胞上清和腹水效价的测定 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体的特性鉴定 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·制备单克隆抗体的重要性 | 第49-50页 |
| ·制备单克隆抗体过程中的关键环节 | 第50页 |
| ·所制备DTMUV E蛋白单克隆抗体潜在的应用价值 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
