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失水胁迫下切花月季丝氨酸蛋白酶RhSep1基因相关研究

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
1 引言第7-18页
   ·植物失水胁迫信号转导的分子基础第7-11页
     ·ABA受体:PYR/PYL/RCAR第7-8页
     ·ABA信号转导的负调控元件:PP2Cs蛋白第8页
     ·ABA信号转导的正调控元件:SnRK2s第8-9页
     ·各元件相互作用的结构基础第9-10页
     ·ABA信号转导的模式第10-11页
   ·提高植物失水胁迫抗性的研究进展第11-14页
     ·失水胁迫下外源物质对植物的影响第11-12页
     ·外源物质GSH对植物失水胁迫的影响第12页
     ·外源物质SA对植物失水胁迫的影响第12-13页
     ·外源物质甜菜碱对植物失水胁迫的影响第13页
     ·外源物质ABA对植物失水胁迫的影响第13-14页
   ·抗氧化酶有助于提高植物抗失水胁迫第14页
   ·内肽酶参与的植物逆境生理第14-15页
   ·丝氨酸蛋白酶与植物失水胁迫第15-16页
     ·丝氨酸蛋白酶在内肽酶中的突出表现第15-16页
     ·丝氨酸蛋白酶的作用第16页
   ·本课题研究的目的及意义第16-18页
2 材料与方法第18-29页
   ·材料第18-21页
     ·菌株与质粒第18页
     ·培养基及试剂第18-21页
     ·主要仪器设备第21页
   ·方法第21-29页
     ·丝氨酸蛋白酶RhSep1基因生物信息学分析第21-22页
     ·丝氨酸蛋白酶RhSep1基因表达载体构建第22-24页
     ·重组质粒PET28a(+)-RhSep1转染第24-25页
     ·重组菌PET28a(+)-RhSep1-BL21(DE3)表达第25-26页
     ·丝氨酸蛋白酶RhSep1原核表达条件优化第26页
     ·实时定量PCR检测RhSep1表达水平第26-29页
3 结果分析第29-43页
   ·丝氨酸蛋白酶RhSep1生物信息学分析结果第29-34页
     ·RhSep1序列信号肽分析第29页
     ·RhSep1疏水性分析第29-30页
     ·RhSep1蛋白质序列跨膜区分析第30-31页
     ·RhSep1蛋白同源性分析第31-32页
     ·RhSep1功能位点分析第32-33页
     ·RhSep1三级结构预测第33-34页
   ·丝氨酸蛋白酶RhSep1基因表达载体构建结果第34-35页
     ·RhSep1 DNA的制备结果第34页
     ·载体DNA的制备结果第34-35页
     ·pET-28a(+)-RhSep1测序结果第35页
   ·重组菌 PET28a(+)-RhSepI- BL21 (DE3)表达结果第35-36页
   ·重组菌pET-28a(+)-RhSep1-BL21(DE3)western blot结果第36页
   ·重组菌pET-28a(+)-RhSep1-BL21(DE3)诱导条件优化结果第36-37页
   ·实时定量PCR检测RhSep1表达水平分析第37-43页
     ·切花月季花瓣总RNA提取结果分析第37-38页
     ·管家基因ACTB检测结果第38-39页
     ·目的基因RhSep1检测结果第39-41页
     ·标准品和样品扩增曲线和融解曲线分析第41-42页
     ·目的基因的相对表达量(以CK-0h作为对照样品)第42-43页
4 讨论第43-48页
   ·植物失水胁迫初期信号转导基础第43-44页
   ·丝氨酸蛋白酶RhSep1基因分析第44-45页
   ·RhSep1蛋白酶的异源表达第45-47页
   ·Real Time PCR确定目的基因RhSep1在失水胁迫下的相对表达量第47-48页
5 结论第48-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-61页
作者简介第61页

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