| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 引言 | 第7-18页 |
| ·植物失水胁迫信号转导的分子基础 | 第7-11页 |
| ·ABA受体:PYR/PYL/RCAR | 第7-8页 |
| ·ABA信号转导的负调控元件:PP2Cs蛋白 | 第8页 |
| ·ABA信号转导的正调控元件:SnRK2s | 第8-9页 |
| ·各元件相互作用的结构基础 | 第9-10页 |
| ·ABA信号转导的模式 | 第10-11页 |
| ·提高植物失水胁迫抗性的研究进展 | 第11-14页 |
| ·失水胁迫下外源物质对植物的影响 | 第11-12页 |
| ·外源物质GSH对植物失水胁迫的影响 | 第12页 |
| ·外源物质SA对植物失水胁迫的影响 | 第12-13页 |
| ·外源物质甜菜碱对植物失水胁迫的影响 | 第13页 |
| ·外源物质ABA对植物失水胁迫的影响 | 第13-14页 |
| ·抗氧化酶有助于提高植物抗失水胁迫 | 第14页 |
| ·内肽酶参与的植物逆境生理 | 第14-15页 |
| ·丝氨酸蛋白酶与植物失水胁迫 | 第15-16页 |
| ·丝氨酸蛋白酶在内肽酶中的突出表现 | 第15-16页 |
| ·丝氨酸蛋白酶的作用 | 第16页 |
| ·本课题研究的目的及意义 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·材料 | 第18-21页 |
| ·菌株与质粒 | 第18页 |
| ·培养基及试剂 | 第18-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-29页 |
| ·丝氨酸蛋白酶RhSep1基因生物信息学分析 | 第21-22页 |
| ·丝氨酸蛋白酶RhSep1基因表达载体构建 | 第22-24页 |
| ·重组质粒PET28a(+)-RhSep1转染 | 第24-25页 |
| ·重组菌PET28a(+)-RhSep1-BL21(DE3)表达 | 第25-26页 |
| ·丝氨酸蛋白酶RhSep1原核表达条件优化 | 第26页 |
| ·实时定量PCR检测RhSep1表达水平 | 第26-29页 |
| 3 结果分析 | 第29-43页 |
| ·丝氨酸蛋白酶RhSep1生物信息学分析结果 | 第29-34页 |
| ·RhSep1序列信号肽分析 | 第29页 |
| ·RhSep1疏水性分析 | 第29-30页 |
| ·RhSep1蛋白质序列跨膜区分析 | 第30-31页 |
| ·RhSep1蛋白同源性分析 | 第31-32页 |
| ·RhSep1功能位点分析 | 第32-33页 |
| ·RhSep1三级结构预测 | 第33-34页 |
| ·丝氨酸蛋白酶RhSep1基因表达载体构建结果 | 第34-35页 |
| ·RhSep1 DNA的制备结果 | 第34页 |
| ·载体DNA的制备结果 | 第34-35页 |
| ·pET-28a(+)-RhSep1测序结果 | 第35页 |
| ·重组菌 PET28a(+)-RhSepI- BL21 (DE3)表达结果 | 第35-36页 |
| ·重组菌pET-28a(+)-RhSep1-BL21(DE3)western blot结果 | 第36页 |
| ·重组菌pET-28a(+)-RhSep1-BL21(DE3)诱导条件优化结果 | 第36-37页 |
| ·实时定量PCR检测RhSep1表达水平分析 | 第37-43页 |
| ·切花月季花瓣总RNA提取结果分析 | 第37-38页 |
| ·管家基因ACTB检测结果 | 第38-39页 |
| ·目的基因RhSep1检测结果 | 第39-41页 |
| ·标准品和样品扩增曲线和融解曲线分析 | 第41-42页 |
| ·目的基因的相对表达量(以CK-0h作为对照样品) | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-48页 |
| ·植物失水胁迫初期信号转导基础 | 第43-44页 |
| ·丝氨酸蛋白酶RhSep1基因分析 | 第44-45页 |
| ·RhSep1蛋白酶的异源表达 | 第45-47页 |
| ·Real Time PCR确定目的基因RhSep1在失水胁迫下的相对表达量 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |