致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-38页 |
·马铃薯 Y 病毒病研究现状 | 第11-15页 |
·马铃薯 Y 病毒的分子生物学研究 | 第11-12页 |
·马铃薯 Y 病毒的株系划分 | 第12-14页 |
·马铃薯 Y 病毒的传播 | 第14-15页 |
·烟草马铃薯 Y 病毒病的危害与防治 | 第15-18页 |
·烟草马铃薯 Y 病毒病的危害 | 第15-17页 |
·烟草马铃薯 Y 病毒病的防治 | 第17-18页 |
·烟草抗马铃薯 Y 病毒品种的选育 | 第18-20页 |
·烟草抗马铃薯 Y 病毒种质资源的收集与研究 | 第18页 |
·烟草抗马铃薯 Y 病毒病育种 | 第18-20页 |
·植物抗病机制研究 | 第20-23页 |
·植物转脂蛋白(lipid transfer protein)研究 | 第21页 |
·RNA 干扰(RNA interference)机制 | 第21-22页 |
·病毒翻译障碍机制 | 第22-23页 |
·植物抗病基因的种类 | 第23-25页 |
·植物抗病基因分类 | 第23-25页 |
·植物自身的马铃薯 Y 病毒抗性基因 | 第25页 |
·植物抗病基因的克隆策略 | 第25-29页 |
·功能克隆(functional Cloning) | 第25-26页 |
·定位克隆(Positional cloning) | 第26页 |
·人工合成并克隆基因 | 第26页 |
·转座子标记法(transposon tagging) | 第26-27页 |
·表型克隆(phenotype cloning) | 第27页 |
·mRNA 差异显示(mRNA differential display) | 第27-28页 |
·减法杂交(Subtractive hybridization) | 第28页 |
·依据序列同源性克隆基因 | 第28页 |
·同系位候选法 | 第28-29页 |
·抑制性消减杂交(suppression subtractive byridization,SSH)技术原理与程序 | 第29-32页 |
·同源序列克隆的原理与程序 | 第32-36页 |
·全长 cDNA 文库构建 | 第33-35页 |
·RACE | 第35-36页 |
·本研究的目的意义 | 第36-38页 |
2 烟草抗马铃薯 Y 病毒种质资源的筛选 | 第38-51页 |
·试验材料与试验设计 | 第38-42页 |
·试验材料 | 第38-41页 |
·试验设计 | 第41页 |
·调查、统计方法 | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-48页 |
·温室接种鉴定结果 | 第42页 |
·田间病圃鉴定结果 | 第42-48页 |
·结论与讨论 | 第48-51页 |
3 烟草马铃薯 Y 病毒主要抗源材料的抗性遗传分析 | 第51-55页 |
·试验材料与田间试验设计 | 第51页 |
·试验材料 | 第51页 |
·试验设计 | 第51页 |
·结果与分析 | 第51-53页 |
·结论与讨论 | 第53-55页 |
4 烟草抗马铃薯 Y 病毒育种 | 第55-64页 |
·试验材料 | 第55页 |
·试验设计与步骤 | 第55-56页 |
·结果与分析 | 第56-62页 |
·选择抗 PVY 杂交杂交后代材料情况 | 第56-57页 |
·育成抗病品种情况 | 第57-62页 |
·结论与讨论 | 第62-64页 |
5 烟草 PVY 诱导的抑制性消减文库的建立及 EST 分析 | 第64-87页 |
·试验材料 | 第64页 |
·供试品种 | 第64页 |
·试验材料的准备 | 第64页 |
·取样 | 第64页 |
·耗材试剂 | 第64-66页 |
·仪器设备 | 第66-67页 |
·方法 | 第67-69页 |
·总 RNA 的提取 | 第67页 |
·RNA 质量检测 | 第67-69页 |
·mRNA 分离纯化 | 第69-77页 |
·实验操作步骤 | 第69-71页 |
·实验准备 | 第69页 |
·操作 | 第69页 |
·合成第一链 cDNA | 第69-70页 |
·合成 cDNA 第二链 | 第70-71页 |
·实验参数 | 第71页 |
·电泳检测 | 第71页 |
·cDNA RsaI 酶切 | 第71-73页 |
·接头连接 | 第73-74页 |
·差减杂交 | 第74-77页 |
·实验结果与分析 | 第77-86页 |
·烟叶总 RNA 的提取结果 | 第77-78页 |
·插入片段检测 | 第78页 |
·cDNA 文库构建 | 第78页 |
·EST 处理及文库分析 | 第78-81页 |
·影响文库质量的因素 | 第81-82页 |
·相关抗病基因的分析 | 第82-84页 |
·功能验证 | 第84-86页 |
·结论与讨论 | 第86-87页 |
6 烟草与 PVY 抗性有关的 eIF(iso)4E 克隆与分析 | 第87-94页 |
·试验材料 | 第87-88页 |
·试剂与仪器 | 第88页 |
·方法 | 第88-89页 |
·引物设计 | 第88页 |
·PCR 扩增体系 | 第88-89页 |
·烟草 DNA 和 RNA 的提取 | 第89页 |
·烟草 eIF4E、eIF(iso)4E 基因 cDNA 的合成及克隆 | 第89页 |
·RACE 克隆全长基因 | 第89页 |
·克隆片段的测序与分析 | 第89页 |
·结果与分析 | 第89-93页 |
·各品种(系)DNA 筛选结果 | 第89-90页 |
·RNA RT-PCR 扩增产物分析 | 第90-92页 |
·CV91 品种 eIF4E 基因 RACE 克隆产物分析 | 第92-93页 |
·结论与讨论 | 第93-94页 |
7 论文总结 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-105页 |
Abstract | 第105-106页 |