中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 不对称RNA干扰研究进展 | 第8-16页 |
1 siRNA与asiRNA | 第8-9页 |
2 小于19bp的小双链RNA可以发生基因沉默 | 第9-10页 |
3 反义链较长的asiRNA可以引起RNA干扰活性 | 第10页 |
4 asiRNA引起的干扰作用机制和siRNA是相同的 | 第10-11页 |
5 asiRNA可以降低正义链介导的脱靶效应 | 第11页 |
6 asiRNA的前景 | 第11-12页 |
参考文献 | 第12-16页 |
第二章 不对称小RNA干扰抑制HeLaB2细胞中bcl-2基因的实验研究 | 第16-37页 |
1 绪言 | 第16-17页 |
2 材料和方法 | 第17-26页 |
·材料 | 第17-18页 |
·siRNA和asiRNA序列的设计和合成 | 第18页 |
·HeLaB2细胞的培养 | 第18-19页 |
·小干扰片段的转染 | 第19页 |
·转染后的细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
·RT-PCR | 第20-21页 |
·Realtime-PCR检测bcl-2 mRNA水平的变化 | 第21-22页 |
·流式细胞检测转染后细胞中Bcl-2蛋白表达水平 | 第22页 |
·CCK-8检测转染后对细胞增殖的影响 | 第22-23页 |
·CCK8检测asiRNA和siRNA对HelaB2细胞毒性影响及IC50值的测定 | 第23-24页 |
·转染后细胞中microRNA的变化 | 第24-26页 |
3 结果与分析 | 第26-33页 |
·不对称siRNA的序列 | 第26页 |
·RNA干扰后bcl-2 mRNA表达水平的变化 | 第26-27页 |
·RNA干扰后细胞中Bcl-2蛋白水平的变化 | 第27-30页 |
·转染siRNA和asiRNA后对HeLaB2细胞增殖的影响 | 第30页 |
·转染浓度和IC50值的确定 | 第30-31页 |
·转染21/21 siRNA或19/21 asiRNA后对细胞中microRNA的影响 | 第31-33页 |
4 讨论 | 第33-35页 |
参考文献 | 第35-37页 |
第三章 化学修饰的不对称小RNA干扰抑制HeLaB2细胞中bcl-2基因的实验研究 | 第37-48页 |
1 前言 | 第37页 |
2 材料和方法 | 第37-40页 |
·材料 | 第37-38页 |
·siRNA和asiRNA序列的设计和合成 | 第38-39页 |
·小干扰片段的转染 | 第39页 |
·流式细胞检测转染后细胞中Bcl-2蛋白表达水平 | 第39-40页 |
3 结果 | 第40-45页 |
·设计并合成的siRNA和asiRNA的结构 | 第40-41页 |
·胆固醇修饰正义链后的asiRNA的干扰效果 | 第41-42页 |
·正义链多种修饰的asiRNA片段的干扰效果 | 第42-44页 |
·链修饰的asiRNA片段的干扰效果 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-48页 |
第四章 南京市男男性行为人群淋球菌和沙眼衣原体感染状况研究 | 第48-59页 |
1 前言 | 第48页 |
2 材料与方法 | 第48-51页 |
·病历资料 | 第48页 |
·实验室检测 | 第48-51页 |
·统计学处理 | 第51页 |
3 结果 | 第51-54页 |
·一般人口学特征 | 第51-52页 |
·性行为及性病史 | 第52页 |
·NG和CT阳性检出率 | 第52-53页 |
·与NG和CT感染分别相关的危险因素分析 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
附录 就读硕士研究生期间发表和投寄的文章 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |