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“寒淫”致病及转归的转录组与代谢组实验研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-9页
目录第9-15页
缩略词第15-16页
引言第16-17页
第一部分 中医理论研究第17-27页
 1. 中医寒病因理论的辨析第17-18页
 2. 中医卫气理论的辨析第18-21页
   ·阳气第18页
   ·卫气第18-19页
   ·卫气与脏腑第19-21页
     ·卫气与肺第19-20页
     ·卫气与脾第20页
     ·卫气与肾第20页
     ·结语第20-21页
 3. 转录组和代谢组研究方法整合第21-27页
   ·中医卫气与脏腑研究的现状第21-23页
   ·现代生物学技术研究寒邪及寒冷刺激的现状第23-25页
   ·转录组和代谢组研究方法整合的必然第25-27页
第二部分 “寒淫”致病前期实验研究第27-34页
 1. 急性寒冷应激人体初期实验研究第27-30页
   ·一般指标分析第27页
   ·差异表达基因分析第27-28页
   ·寒淫相关差异表达基因第28-29页
   ·RT-PCR验证结果第29-30页
     ·GAPDH、ENO1等四个基因验证分析第29页
     ·ATP6VOD1基因的验证及分析第29-30页
   ·讨论第30页
 2. “寒淫”致病与中药干预的动物实验初期研究第30-34页
   ·一般指标第30-31页
   ·动物的体重、血糖和IL-2情况第31-32页
   ·转录组实验结果第32页
   ·讨论第32-34页
第三部分 “寒淫”致病与中药干预的转录组与代谢组实验第34-55页
 1. 模拟寒淫致病动物实验第34-36页
   ·实验材料第34-35页
     ·实验动物第34-35页
     ·实验药物第35页
   ·实验模拟第35页
     ·实验动物分组及模拟寒淫致病第35页
   ·动物实验讨论第35-36页
 2. “寒淫”致病与中药干预的转录组实验研究第36-50页
   ·转录组实验样本的提取第36页
   ·表达谱芯片操作流程第36-50页
     ·AFFYMETRIX3’IVT表达谱芯片操作第36-43页
       ·仪器和试剂第36页
       ·总RNA的纯化第36-37页
       ·由RNA合成双链DNA第37-40页
         ·反转录合成第一链cDNA第37-38页
         ·反转录合成第二链cDNA第38页
         ·体外转录合成标记cRNA第38页
         ·aRNA纯化第38-39页
         ·片断化第39页
         ·杂交第39-40页
         ·洗涤、染色和扫描第40页
       ·样品质检结果第40-43页
         ·RNA样品质控信息第40-41页
         ·芯片实验质控情况第41-42页
         ·散点图和矩阵图第42-43页
     ·Agilent基因表达谱芯片(单标)操作第43-50页
       ·仪器和试剂第43-44页
       ·总RNA的纯化第44页
       ·荧光标记第44-46页
       ·芯片杂交第46-47页
       ·芯片洗涤和扫描第47页
       ·样品质检结果第47-50页
         ·RNA样品质控信息第47-48页
         ·芯片实验质控情况第48-49页
         ·散点图和矩阵图第49-50页
 3. “寒淫”致病与中药干预的代谢组实验研究第50-55页
   ·代谢组实验样本提取第50页
   ·代谢组实验操作第50-51页
     ·仪器与试剂第50-51页
     ·样本处理第51页
     ·实验参数第51页
       ·质谱条件第51页
       ·液相条件第51页
   ·实验结果第51-55页
     ·总TIC图第51-52页
     ·三组不同样本的棒状图第52页
     ·三组不同样本的2D图第52-53页
     ·三组不同样本的3D图第53页
     ·数据转化第53-55页
第四部分 转录组和代谢组整合研究探讨第55-111页
 1. 转录组网络构建第56-99页
   ·网络构建第56-57页
     ·共表达分析第56页
     ·GO分析第56-57页
     ·KEGG第57页
   ·芯片分析结果第57-98页
     ·模型组与正常组网络构建分析第57-71页
       ·模型组与正常型组共表达基因分析第57-59页
       ·模型组与正常组elimGO分析第59-62页
       ·共表达基因Pathway分析结果第62-70页
         ·抗原加工递呈第64-65页
         ·细胞外基质受体相互作用第65页
         ·内吞作用第65-66页
         ·粘着斑第66-67页
         ·P53信号通路第67页
         ·细胞周期第67-68页
         ·细胞因子受体相互作用第68-69页
         ·心肌收缩第69-70页
       ·共表达基因相互作用网络构架分析第70-71页
     ·给药组与模型组网络构建分析第71-83页
       ·给药组与模型组共表达基因分析第71-72页
       ·给药组与模型组elimGO分析第72-74页
       ·共表达基因Pathway分析结果第74-82页
         ·抗原加工与递呈第76-77页
         ·吞噬体第77-78页
         ·细胞黏附分子第78-79页
         ·钙信号通路第79-80页
         ·刺激神经组织的配体受体相互作用第80-81页
         ·IgA生成的肠道免疫网络第81页
         ·细胞因子受体相互作用第81-82页
       ·共表达基因相互作用网络构架分析第82-83页
     ·给药组与正常组网络构建分析第83-98页
       ·给药组与正常组共表达基因分析第83-85页
       ·给药组与正常组elimGO分析第85-88页
       ·共表达基因Pathway分析结果第88-96页
         ·抗原加工提呈第90-91页
         ·吞噬体第91页
         ·IgA产生的肠道免疫网络第91-92页
         ·细胞粘附分子第92-93页
         ·细胞因子受体相互作用第93-94页
         ·钙信号通路第94-95页
         ·胞外基质受体相互作用第95页
         ·P53信号通路第95-96页
         ·细胞周期第96页
       ·共表达基因相互作用网络构架分析第96-98页
   ·结论第98-99页
     ·“寒淫”致病的信号通路及关键基因第98页
     ·辛热中药对“寒淫”致病的信号通路及关键基因第98-99页
 2. 代谢组质谱分析第99-108页
   ·数据分析第99-102页
     ·数据检验第99-100页
     ·PCA主成份分析(SIMCA-P 11.5)第100-101页
     ·PLS-DA(SIMCA-P 11.5)第101页
     ·给药组与模型组PLS-DA第101-102页
   ·给药组与模型组的PCA和PLS-DA分析结果第102-108页
     ·给药组与模型组代谢产物分析第102-108页
       ·代谢产物与酪氨酸代谢第104页
       ·代谢产物与甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢第104页
       ·代谢产物与丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢第104-105页
       ·代谢产物与色氨酸代谢第105页
       ·代谢产物与ABC转运蛋白和赖氨酸降解第105-106页
       ·代谢产物与精氨酸和脯氨酸代谢第106页
       ·代谢产物与半胱氨酸和蛋氨酸代谢第106页
       ·代谢产物与花生四烯酸代谢第106-108页
       ·代谢产物与丙氨酸代谢第108页
       ·代谢产物与丙氣酸代谢第108页
 3. “寒淫”致病及中药干预的转录组与代谢组的整合分析第108-109页
 4. 问题与展望第109-111页
结语第111-112页
参考文献第112-119页
致谢第119-120页
综述第120-126页
 参考文献第123-126页
附件第126-128页

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