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黑色素瘤抑制因子2(MIA2)与乙型肝炎病毒(HBV)感染相关性研究

论文创新点第1-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-14页
第一章 :乙型肝炎病毒第14-43页
   ·病毒的生物学性状第15-18页
     ·乙肝病毒的形态第15-16页
     ·乙肝病毒的分子生物学结构第16页
     ·抗原成分第16-18页
     ·抵抗力第18页
   ·乙肝病毒的转录第18-22页
     ·乙肝病毒转录产物第18-20页
     ·HBV基因转录的调控第20-22页
   ·乙肝病毒的复制第22-23页
   ·乙型肝炎病毒编码的蛋白第23-25页
     ·外膜蛋白第23-24页
     ·核壳蛋白第24页
     ·P蛋白第24-25页
     ·X蛋白第25页
   ·乙型肝炎病毒的微生物学检测和临床意义第25-28页
     ·微生物学检查第25-27页
     ·临床意义第27-28页
   ·乙肝病毒感染自然史第28-38页
     ·HBV感染的发病机理第29-35页
     ·慢性HBV感染后遗症和患者预后第35-38页
   ·乙肝病毒感染的治疗第38-43页
     ·治疗HBV感染第40-41页
     ·定义治疗结果第41页
     ·治疗人群第41-43页
第二章 MIA_2(人黑色素瘤抑制因子2)第43-50页
   ·MIA家族第43-44页
   ·MIA蛋白第44-46页
     ·MIA蛋白的结构第45页
     ·MIA的结合蛋白第45页
     ·MIA在黑素瘤发展中的作用第45-46页
   ·MIA_2蛋白第46-50页
     ·MIA_2蛋白的功能第48-50页
第三章 过氧化物酶体增殖物激活受体第50-62页
   ·过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR)-α第51-54页
     ·作用机理第52页
     ·PPAR-α结构第52-53页
     ·组织表达,配体和目标基因第53-54页
   ·PPAR-α的功能第54-57页
     ·PPAR-α影响脂蛋白代谢第54-55页
     ·PPAR-α影响动脉粥样化形成第55-56页
     ·PPAR-α促效药的临床使用第56-57页
   ·PPAR-α多态性第57-59页
   ·PPAR对病毒转录和复制的影响第59-60页
   ·HBV调节PPAR γ表达第60页
   ·总结第60-62页
第四章 乙型肝炎病毒感染与MIA_2第62-81页
   ·前言第62页
   ·材料第62-64页
     ·研究对象第62-63页
     ·菌种与质粒第63页
     ·细胞第63页
     ·工具酶和试剂盒第63页
     ·其他试剂第63页
     ·细菌细胞培养所用试剂(见附录)第63页
     ·仪器设备第63-64页
   ·方法第64-75页
     ·MIA_2基因的获得和克隆第64-70页
     ·血清中MIA_2的检测第70-71页
     ·细胞系的总RNA提取以及RT-PCR反应第71-75页
   ·结果第75-80页
     ·Pet28a-MIA_2克隆的构建与鉴定第75-76页
     ·纯化MLA_2蛋白及其鉴定第76-77页
     ·标准曲线的绘制第77页
     ·血清结果第77-79页
     ·HBV可以降低MIA_2蛋白的表达量第79-80页
   ·讨论第80-81页
第五章 MIA_2对HBV的复制惧有正调控作用第81-96页
   ·前言第81页
   ·实验材料及仪器第81-82页
     ·菌种和质粒第81页
     ·细胞第81页
     ·试剂盒、主要的酶系统、转染试剂第81-82页
   ·实验方法第82-90页
     ·MIA_2基因真核表达质粒的克隆第82-83页
     ·细胞转染第83-84页
     ·乙肝S抗原和E抗原的检测第84-85页
     ·乙型肝炎病毒核心蛋白相关DNA (core-associated DNA )的焚量PCR第85-90页
   ·结果第90-95页
     ·HBs、HBe抗原检测结果第90-91页
     ·HBV复制中间体的检测第91-92页
     ·干扰MIA_2蛋白表达后对HBV S、E抗原的检测第92-93页
     ·干扰MIA_2蛋白表达后HBV复制中间体的检测第93页
     ·HBs、HBe抗原检测结果第93-94页
     ·HBV复制中间体的检测第94-95页
   ·讨论第95-96页
第六章 MIA_2通过PPARα信号来调控HBV前基因组RNA启动子的活性第96-117页
   ·前言第96页
   ·材料第96-97页
     ·质粒,菌种、细胞系第96页
     ·试剂盒第96-97页
     ·其他试剂第97页
   ·方法第97-110页
     ·细胞转染实验需用质粒的小量提取第97-98页
     ·细胞培养第98-99页
     ·细胞转染实验第99-100页
     ·荧光素酶活性的测定第100-101页
     ·染色质免疫沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)第101-105页
     ·Western blot检测第105-108页
     ·EMSA分析第108-110页
   ·结果第110-116页
     ·黑色素瘤抑制因子MIA_2可以激活HBV前基因组RNA启动子第110-111页
     ·干扰RNA筛选确定起关键作用的转录因子第111-112页
     ·MIA_2对PPARα位点突变的前基因组RNA启动子的影响第112-113页
     ·加入PPARα通路抑制剂后,MIA_2对HBV复制的影响第113-114页
     ·MIA_2对PPARα转录因子的调控第114页
     ·MIA_2对PPARα转录因子的调控第114-115页
     ·MIA_2增加PPARα转录因子结合到转录位点第115-116页
   ·讨论第116-117页
第七章 研究总结第117-118页
参考文献第118-127页
附录Ⅰ 试剂及其配制一览表第127-131页
附录II 博士研究生期间发表及待发表的论文第131-132页
致谢第132页

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