论文创新点 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
第一章 :乙型肝炎病毒 | 第14-43页 |
·病毒的生物学性状 | 第15-18页 |
·乙肝病毒的形态 | 第15-16页 |
·乙肝病毒的分子生物学结构 | 第16页 |
·抗原成分 | 第16-18页 |
·抵抗力 | 第18页 |
·乙肝病毒的转录 | 第18-22页 |
·乙肝病毒转录产物 | 第18-20页 |
·HBV基因转录的调控 | 第20-22页 |
·乙肝病毒的复制 | 第22-23页 |
·乙型肝炎病毒编码的蛋白 | 第23-25页 |
·外膜蛋白 | 第23-24页 |
·核壳蛋白 | 第24页 |
·P蛋白 | 第24-25页 |
·X蛋白 | 第25页 |
·乙型肝炎病毒的微生物学检测和临床意义 | 第25-28页 |
·微生物学检查 | 第25-27页 |
·临床意义 | 第27-28页 |
·乙肝病毒感染自然史 | 第28-38页 |
·HBV感染的发病机理 | 第29-35页 |
·慢性HBV感染后遗症和患者预后 | 第35-38页 |
·乙肝病毒感染的治疗 | 第38-43页 |
·治疗HBV感染 | 第40-41页 |
·定义治疗结果 | 第41页 |
·治疗人群 | 第41-43页 |
第二章 MIA_2(人黑色素瘤抑制因子2) | 第43-50页 |
·MIA家族 | 第43-44页 |
·MIA蛋白 | 第44-46页 |
·MIA蛋白的结构 | 第45页 |
·MIA的结合蛋白 | 第45页 |
·MIA在黑素瘤发展中的作用 | 第45-46页 |
·MIA_2蛋白 | 第46-50页 |
·MIA_2蛋白的功能 | 第48-50页 |
第三章 过氧化物酶体增殖物激活受体 | 第50-62页 |
·过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR)-α | 第51-54页 |
·作用机理 | 第52页 |
·PPAR-α结构 | 第52-53页 |
·组织表达,配体和目标基因 | 第53-54页 |
·PPAR-α的功能 | 第54-57页 |
·PPAR-α影响脂蛋白代谢 | 第54-55页 |
·PPAR-α影响动脉粥样化形成 | 第55-56页 |
·PPAR-α促效药的临床使用 | 第56-57页 |
·PPAR-α多态性 | 第57-59页 |
·PPAR对病毒转录和复制的影响 | 第59-60页 |
·HBV调节PPAR γ表达 | 第60页 |
·总结 | 第60-62页 |
第四章 乙型肝炎病毒感染与MIA_2 | 第62-81页 |
·前言 | 第62页 |
·材料 | 第62-64页 |
·研究对象 | 第62-63页 |
·菌种与质粒 | 第63页 |
·细胞 | 第63页 |
·工具酶和试剂盒 | 第63页 |
·其他试剂 | 第63页 |
·细菌细胞培养所用试剂(见附录) | 第63页 |
·仪器设备 | 第63-64页 |
·方法 | 第64-75页 |
·MIA_2基因的获得和克隆 | 第64-70页 |
·血清中MIA_2的检测 | 第70-71页 |
·细胞系的总RNA提取以及RT-PCR反应 | 第71-75页 |
·结果 | 第75-80页 |
·Pet28a-MIA_2克隆的构建与鉴定 | 第75-76页 |
·纯化MLA_2蛋白及其鉴定 | 第76-77页 |
·标准曲线的绘制 | 第77页 |
·血清结果 | 第77-79页 |
·HBV可以降低MIA_2蛋白的表达量 | 第79-80页 |
·讨论 | 第80-81页 |
第五章 MIA_2对HBV的复制惧有正调控作用 | 第81-96页 |
·前言 | 第81页 |
·实验材料及仪器 | 第81-82页 |
·菌种和质粒 | 第81页 |
·细胞 | 第81页 |
·试剂盒、主要的酶系统、转染试剂 | 第81-82页 |
·实验方法 | 第82-90页 |
·MIA_2基因真核表达质粒的克隆 | 第82-83页 |
·细胞转染 | 第83-84页 |
·乙肝S抗原和E抗原的检测 | 第84-85页 |
·乙型肝炎病毒核心蛋白相关DNA (core-associated DNA )的焚量PCR | 第85-90页 |
·结果 | 第90-95页 |
·HBs、HBe抗原检测结果 | 第90-91页 |
·HBV复制中间体的检测 | 第91-92页 |
·干扰MIA_2蛋白表达后对HBV S、E抗原的检测 | 第92-93页 |
·干扰MIA_2蛋白表达后HBV复制中间体的检测 | 第93页 |
·HBs、HBe抗原检测结果 | 第93-94页 |
·HBV复制中间体的检测 | 第94-95页 |
·讨论 | 第95-96页 |
第六章 MIA_2通过PPARα信号来调控HBV前基因组RNA启动子的活性 | 第96-117页 |
·前言 | 第96页 |
·材料 | 第96-97页 |
·质粒,菌种、细胞系 | 第96页 |
·试剂盒 | 第96-97页 |
·其他试剂 | 第97页 |
·方法 | 第97-110页 |
·细胞转染实验需用质粒的小量提取 | 第97-98页 |
·细胞培养 | 第98-99页 |
·细胞转染实验 | 第99-100页 |
·荧光素酶活性的测定 | 第100-101页 |
·染色质免疫沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP) | 第101-105页 |
·Western blot检测 | 第105-108页 |
·EMSA分析 | 第108-110页 |
·结果 | 第110-116页 |
·黑色素瘤抑制因子MIA_2可以激活HBV前基因组RNA启动子 | 第110-111页 |
·干扰RNA筛选确定起关键作用的转录因子 | 第111-112页 |
·MIA_2对PPARα位点突变的前基因组RNA启动子的影响 | 第112-113页 |
·加入PPARα通路抑制剂后,MIA_2对HBV复制的影响 | 第113-114页 |
·MIA_2对PPARα转录因子的调控 | 第114页 |
·MIA_2对PPARα转录因子的调控 | 第114-115页 |
·MIA_2增加PPARα转录因子结合到转录位点 | 第115-116页 |
·讨论 | 第116-117页 |
第七章 研究总结 | 第117-118页 |
参考文献 | 第118-127页 |
附录Ⅰ 试剂及其配制一览表 | 第127-131页 |
附录II 博士研究生期间发表及待发表的论文 | 第131-132页 |
致谢 | 第132页 |