| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| ·益生菌的研究进展 | 第13-14页 |
| ·益生菌的简介 | 第13页 |
| ·益生菌的作用 | 第13-14页 |
| ·益生菌的应用 | 第14页 |
| ·益生芽孢杆菌的研究进展 | 第14-17页 |
| ·芽孢杆菌的介绍 | 第14页 |
| ·益生芽孢杆菌的种类 | 第14-15页 |
| ·益生芽孢杆菌的生理功能 | 第15-16页 |
| ·益生芽孢杆菌应用 | 第16-17页 |
| ·益生芽孢杆菌作用机理的研究进展 | 第17页 |
| ·益生芽孢杆菌应用面临的问题 | 第17-18页 |
| ·菌株作用机理 | 第17页 |
| ·使用剂量和形式 | 第17页 |
| ·安全性 | 第17-18页 |
| ·绿色荧光蛋白在微生物工程上的应用研究 | 第18-19页 |
| ·绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein) | 第18页 |
| ·绿色荧光蛋白的优势 | 第18页 |
| ·绿色荧光蛋白标记工程菌株的应用 | 第18-19页 |
| ·绿色荧光蛋白在研究益生菌拮抗活性的应用 | 第19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 益生枯草芽孢杆菌 MA139 在标准培养基中的抑菌研究 | 第21-28页 |
| ·引言 | 第21页 |
| ·材料和方法 | 第21-24页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-23页 |
| ·细菌活菌的选择性计数 | 第23页 |
| ·统计分析 | 第23-24页 |
| ·结果和讨论 | 第24-27页 |
| ·体外抑菌研究液体培养基的选择 | 第24-25页 |
| ·B. subtilis MA139 在 MRS 液体培养基中对病原菌 E. coli K88 生长的影响 | 第25页 |
| ·B. subtilis MA139 在液体培养基中微厌氧条件下对乳酸杆菌生长的影响 | 第25-27页 |
| ·B. subtilis MA139 在微厌氧条件下对 L. salivarius G1-1 增殖的影响 | 第25-26页 |
| ·B. subtilis MA139 在微厌氧条件下对 L. reuteri G8-5 增殖的影响 | 第26-27页 |
| ·小结 | 第27-28页 |
| 第三章 B. subtilis MA139 在小肠液中的抑菌研究 | 第28-32页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料和方法 | 第28页 |
| ·试验用试剂 | 第28页 |
| ·样品采集及肠液的制备 | 第28页 |
| ·样品处理 | 第28页 |
| ·体外混合培养试验 | 第28页 |
| ·结果和讨论 | 第28-31页 |
| ·B. subtilis MA139 和 E. coli K88 在小肠前段微厌氧混合培养 | 第28-29页 |
| ·B. subtilis MA139 和 E. coli K88 在小肠后段微厌氧混合培养 | 第29页 |
| ·B. subtilis MA139 和乳杆菌在小肠前段微厌氧混合培养 | 第29-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第四章 穿梭载体 pGFP-xylR 和 pGFP-rpsD 的构建 | 第32-43页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·实验材料和方法 | 第32-39页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·实验方法 | 第34-39页 |
| ·结果和讨论 | 第39-42页 |
| ·xylR 基因启动子序列的 PCR 扩增结果 | 第39页 |
| ·启动子 rpsD 序列的 PCR 扩增结果 | 第39-40页 |
| ·PCR 目的片段与 pGFP-4412 双酶切后连接转化 | 第40页 |
| ·重组菌的 PCR 鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组质粒 pGFP-xylR/pGFP-rpsD 的双酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·荧光显微镜观察 GFP 的表达 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第五章 GFP 标记 B. subtilis MA139 和 E. coli K88 | 第43-53页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料和方法 | 第43-47页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·结果和讨论 | 第47-52页 |
| ·质粒的大量提取 | 第47页 |
| ·电转化法 GFP 标记 B. subtilis MA139 | 第47页 |
| ·化转法 GFP 标记 B. subtilis MA13935 | 第47页 |
| ·重组菌 BS-gfp-xylR 和 BS-gfp-rpsD 的 PCR 验证 | 第47-48页 |
| ·重组菌 BS-gfp-xylR 和 BS-gfp-rpsD 的荧光显微镜观察 | 第48页 |
| ·重组菌 BS-gfp-rpsD 抑菌活性的检测 | 第48页 |
| ·GFP 标记 E. coli K88 转化子的 PCR 检测 | 第48-49页 |
| ·E. coli K88-GFP 转化子的荧光检测 | 第49-50页 |
| ·GFP 标记 E. coli K88 后对生长曲线的影响 | 第50页 |
| ·重组菌 E. coli K88-GFP 和 E. coli K88 在不同 pH 值 LB 液体培养基中的生长情况 | 第50-51页 |
| ·携带 GFP 的不同表达质粒在 E. coli K88 中的表达量比较 | 第51页 |
| ·pGFP-rpsD 热激法转化 E. coli K88 后工程菌株的稳定性 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录Ⅰ 质粒 pGFP-xyIR 构建过程 | 第59-60页 |
| 附录Ⅱ 质粒 pGFP-rpsD 构建过程 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 硕士期间发表论文 | 第62页 |
