中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
第一章 番茄溃疡病菌的生物、生态学特性及检测技术研究进展 | 第9-24页 |
第一节 番茄溃疡病菌的生物、生态学特性 | 第9-14页 |
·番茄溃疡病菌的生物学特性 | 第9页 |
·番茄溃疡病菌生态学特性和传播途径 | 第9-11页 |
·番茄溃疡病的症状和危害 | 第11-14页 |
第二节 番茄溃疡病菌检测技术现状和研究进展 | 第14-23页 |
·育苗接种法 | 第14-15页 |
·分离培养法 | 第15-16页 |
·免疫血清学方法 | 第16-17页 |
·酶联免疫吸附法(ELISA) | 第16页 |
·免疫荧光法(IF) | 第16-17页 |
·免疫荧光菌落染色法(IFC) | 第17页 |
·分子生物学方法 | 第17-23页 |
·分子杂交法 | 第18页 |
·PCR | 第18-20页 |
·实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第20-23页 |
立题依据和研究意义 | 第23-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-37页 |
1.材料 | 第24-26页 |
2.方法 | 第26-37页 |
·标准菌株的活化和培养 | 第26-27页 |
·梯度纯菌液的制备 | 第27-28页 |
·梯度模拟带菌种子提取液的制备 | 第28页 |
·双抗夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA) | 第28-29页 |
·硝酸纤维素膜捕获法 | 第29-30页 |
·微孔滤膜过滤法 | 第30页 |
·直接PCR(Direct-PCR) | 第30-31页 |
·免疫捕捉PCR(IC-PCR) | 第31-32页 |
·BIO-PCR | 第32-33页 |
·免疫磁珠分离PCR(IMS-PCR) | 第33-35页 |
·巢式PCR(Nested-PCR) | 第35-37页 |
第三章 结果与分析 | 第37-57页 |
·纯菌液计数结果 | 第37页 |
·ELISA实验结果 | 第37-38页 |
·PCR条件优化结果 | 第38-40页 |
·梯度PCR结果 | 第38-39页 |
·热裂解PCR结果 | 第39-40页 |
·Direct-PCR结果 | 第40-42页 |
·梯度纯菌液Direct-PCR结果 | 第40页 |
·纯菌液Direct-PCR稳定性结果 | 第40-41页 |
·模拟带菌种子提取液Direct-PCR结果 | 第41-42页 |
·硝酸纤维素膜捕获法PCR结果 | 第42页 |
·膜过滤PCR结果 | 第42-43页 |
·IC-PCR结果 | 第43-46页 |
·梯度纯菌液IC-PCR结果 | 第43-44页 |
·纯菌液IC-PCR稳定性结果 | 第44页 |
·模拟带菌种子提取液IC-PCR结果 | 第44-45页 |
·模拟带菌种子提取液中IC-PCR和Direct-PCR比较 | 第45-46页 |
·Direct-PCR和IC-PCR的检测灵敏度比较 | 第46页 |
·BIO-PCR结果 | 第46-48页 |
·纯菌液BIO-PCR结果 | 第46-47页 |
·模拟带菌种子提取液BIO-PCR结果 | 第47-48页 |
·IMS-PCR结果 | 第48-50页 |
·纯菌液IMS-PCR结果 | 第48-49页 |
·模拟带菌种子提取液IMS-PCR结果 | 第49-50页 |
·Nested-PCR结果 | 第50-52页 |
·Nested-PCR条件优化 | 第50-51页 |
·纯菌液Direct-PCR和Nested-PCR结果 | 第51页 |
·模拟带菌种子提取液Direct-PCR和Nested-PCR结果 | 第51-52页 |
·纯菌液中几种检测方法在的检测灵敏度比较 | 第52-53页 |
·模拟带菌种子提取液中几种检测方法的检测灵敏度比较 | 第53-54页 |
·纯菌液和模拟带菌种子提取液中几种检测方法在的检测时间比较 | 第54-55页 |
·纯菌液中几种检测方法的检测稳定性比较 | 第55页 |
·模拟带菌种子提取液中几种检测方法的检测稳定性比较 | 第55-57页 |
第四章 讨论 | 第57-65页 |
·种传番茄溃疡病菌检测的必要性及存在的问题 | 第57页 |
·番茄溃疡病菌扩增基因的选择 | 第57-58页 |
·酶联免疫吸附法 | 第58-59页 |
·膜过滤法 | 第59-60页 |
·硝酸纤维素膜捕获法 | 第60页 |
·Direct-PCR | 第60-61页 |
·IC-PCR | 第61-62页 |
·BIO-PCR | 第62-63页 |
·Nested-PCR | 第63页 |
·IMS-PCR | 第63-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |