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番茄溃疡病菌的富集和快速分子生物学检测方法研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
第一章 番茄溃疡病菌的生物、生态学特性及检测技术研究进展第9-24页
 第一节 番茄溃疡病菌的生物、生态学特性第9-14页
   ·番茄溃疡病菌的生物学特性第9页
   ·番茄溃疡病菌生态学特性和传播途径第9-11页
   ·番茄溃疡病的症状和危害第11-14页
 第二节 番茄溃疡病菌检测技术现状和研究进展第14-23页
   ·育苗接种法第14-15页
   ·分离培养法第15-16页
   ·免疫血清学方法第16-17页
     ·酶联免疫吸附法(ELISA)第16页
     ·免疫荧光法(IF)第16-17页
     ·免疫荧光菌落染色法(IFC)第17页
   ·分子生物学方法第17-23页
     ·分子杂交法第18页
     ·PCR第18-20页
     ·实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第20-23页
 立题依据和研究意义第23-24页
第二章 材料与方法第24-37页
 1.材料第24-26页
 2.方法第26-37页
   ·标准菌株的活化和培养第26-27页
   ·梯度纯菌液的制备第27-28页
   ·梯度模拟带菌种子提取液的制备第28页
   ·双抗夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)第28-29页
   ·硝酸纤维素膜捕获法第29-30页
   ·微孔滤膜过滤法第30页
   ·直接PCR(Direct-PCR)第30-31页
   ·免疫捕捉PCR(IC-PCR)第31-32页
   ·BIO-PCR第32-33页
   ·免疫磁珠分离PCR(IMS-PCR)第33-35页
   ·巢式PCR(Nested-PCR)第35-37页
第三章 结果与分析第37-57页
   ·纯菌液计数结果第37页
   ·ELISA实验结果第37-38页
   ·PCR条件优化结果第38-40页
     ·梯度PCR结果第38-39页
     ·热裂解PCR结果第39-40页
   ·Direct-PCR结果第40-42页
     ·梯度纯菌液Direct-PCR结果第40页
     ·纯菌液Direct-PCR稳定性结果第40-41页
     ·模拟带菌种子提取液Direct-PCR结果第41-42页
   ·硝酸纤维素膜捕获法PCR结果第42页
   ·膜过滤PCR结果第42-43页
   ·IC-PCR结果第43-46页
     ·梯度纯菌液IC-PCR结果第43-44页
     ·纯菌液IC-PCR稳定性结果第44页
     ·模拟带菌种子提取液IC-PCR结果第44-45页
     ·模拟带菌种子提取液中IC-PCR和Direct-PCR比较第45-46页
     ·Direct-PCR和IC-PCR的检测灵敏度比较第46页
   ·BIO-PCR结果第46-48页
     ·纯菌液BIO-PCR结果第46-47页
     ·模拟带菌种子提取液BIO-PCR结果第47-48页
   ·IMS-PCR结果第48-50页
     ·纯菌液IMS-PCR结果第48-49页
     ·模拟带菌种子提取液IMS-PCR结果第49-50页
   ·Nested-PCR结果第50-52页
     ·Nested-PCR条件优化第50-51页
     ·纯菌液Direct-PCR和Nested-PCR结果第51页
     ·模拟带菌种子提取液Direct-PCR和Nested-PCR结果第51-52页
   ·纯菌液中几种检测方法在的检测灵敏度比较第52-53页
   ·模拟带菌种子提取液中几种检测方法的检测灵敏度比较第53-54页
   ·纯菌液和模拟带菌种子提取液中几种检测方法在的检测时间比较第54-55页
   ·纯菌液中几种检测方法的检测稳定性比较第55页
   ·模拟带菌种子提取液中几种检测方法的检测稳定性比较第55-57页
第四章 讨论第57-65页
   ·种传番茄溃疡病菌检测的必要性及存在的问题第57页
   ·番茄溃疡病菌扩增基因的选择第57-58页
   ·酶联免疫吸附法第58-59页
   ·膜过滤法第59-60页
   ·硝酸纤维素膜捕获法第60页
   ·Direct-PCR第60-61页
   ·IC-PCR第61-62页
   ·BIO-PCR第62-63页
   ·Nested-PCR第63页
   ·IMS-PCR第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-71页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第71-72页
致谢第72页

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