| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一部分 前言 | 第10-35页 |
| 一、拟南芥菜(Arabidopsis)花药和花粉发育过程 | 第10-17页 |
| 1、拟南芥花药的形成 | 第12-15页 |
| 2、拟南芥花粉的形成 | 第15-17页 |
| 二、雄配子发育过程中的基因 | 第17-20页 |
| 三、拟南芥菜胚胎发生(embryogenesis)模型 | 第20-25页 |
| 四、参与拟南芥早期胚胎发育过程中的基因 | 第25-33页 |
| 1、参与合子激活和第一次非对称分裂的基因 | 第26-27页 |
| 2、参与胚模式分裂的基因 | 第27-29页 |
| 3、早期胚胎发育中的极性建立和生长素的作用 | 第29-31页 |
| 4、影响胚乳和早期胚胎分裂的基因 | 第31-33页 |
| 五、本论文研究的目的意义和内容 | 第33-35页 |
| 第二部分 材料方法 | 第35-53页 |
| 一、实验材料 | 第35-37页 |
| 1、植物材料与种植条件 | 第35页 |
| 2、工具酶和试剂 | 第35-36页 |
| 3、质粒与菌株 | 第36页 |
| 4、常用试剂的配方 | 第36-37页 |
| 二、实验方法 | 第37-53页 |
| 1、分离比的统计 | 第37页 |
| 2、亚历山大染色 | 第37-38页 |
| 3、半薄切片和透射电镜材料制备和观察 | 第38页 |
| 4、扫描电镜观察 | 第38页 |
| 5、DAPI染色 | 第38页 |
| 6、正反交 | 第38-39页 |
| 7、整体透明观察胚 | 第39页 |
| 8、四分体分析 | 第39-40页 |
| 9、植物DNA、RNA以及质粒的提取 | 第40-42页 |
| 10、大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第42-43页 |
| 11、Inverse-PCR克隆突变基因 | 第43-46页 |
| 12、农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第46页 |
| 13、普通PCR体系与程序 | 第46页 |
| 14、分子互补和超量表达的克隆以及拟南芥的转化 | 第46-47页 |
| 15、半定量法测定基因在不同器官的表达 | 第47-48页 |
| 16、原位杂交 | 第48-51页 |
| 17、启动子克隆及载体构建 | 第51-52页 |
| 18、GFP融合蛋白载体的构建 | 第52页 |
| 19、叶盘法转化烟草 | 第52-53页 |
| 第三部分 结果 | 第53-90页 |
| 一、突变体的筛选 | 第53-90页 |
| 1、ovp1和eed1分离比的统计 | 第53-54页 |
| 2、ovp1和eed1遗传分析 | 第54-56页 |
| ·、ovp1正反交 | 第54-55页 |
| ·、eed1正反交 | 第55-56页 |
| 3、ovp1表型分析 | 第56-62页 |
| ·、亚历山大染色 | 第56-57页 |
| ·、半薄切片 | 第57-59页 |
| ·、扫描电镜 | 第59页 |
| ·、DAPI染色 | 第59-61页 |
| ·、透射电镜 | 第61页 |
| ·、ovp1的四分体分析 | 第61-62页 |
| 4、eed1表型分析 | 第62-65页 |
| ·、eed1种子的观察 | 第62-63页 |
| ·、整体透明观察胚胎发育 | 第63-65页 |
| 5、ovp1与eed1基因的克隆 | 第65-67页 |
| ·、Inverse-PCR克隆突变基因 | 第65-66页 |
| ·、序列分析ovp1 Ds的插入位点 | 第66-67页 |
| ·、序列分析eed1 Ds的插入位点 | 第67页 |
| 6、ovp1和eed1纯杂合鉴定以及插入位点边界的确定 | 第67-69页 |
| ·、ovp1 | 第67-68页 |
| ·、eed1 | 第68-69页 |
| 7、ovp1和eed1等位突变体的表型研究 | 第69-72页 |
| ·、ovp1等位突变体GT_5_75428(N162170) | 第69-70页 |
| ·、ovp1等位突变体Salk073711 | 第70-71页 |
| ·、eed1等位突变体 | 第71-72页 |
| 8、ovp1和eed1的分子互补 | 第72-79页 |
| ·、ovp1 | 第72-76页 |
| ·、eed1 | 第76-79页 |
| 9、OVP和EED的超量表达 | 第79-82页 |
| ·、OVP | 第79-81页 |
| ·、EED | 第81-82页 |
| 10、OVP的表达分析 | 第82-84页 |
| ·、半定量法测定OVP在不同器官的表达 | 第82-83页 |
| ·、启动子克隆、GUS表达载体的构建以及染色观察 | 第83-84页 |
| ·、原位杂交 | 第84页 |
| 11、EED的表达分析 | 第84-86页 |
| ·、半定量PCR测定EED在不同器官的表达 | 第84-85页 |
| ·、启动子克隆及GUS表达载体的构建以及GUS染色观察 | 第85-86页 |
| ·、原位杂交 | 第86页 |
| 12、OVP和EED的定位 | 第86-87页 |
| ·、OVP-GFP融合蛋白载体的构建与细胞定位的观察 | 第86-87页 |
| ·、EED-GFP融合蛋白载体的构建 | 第87页 |
| 13、酵母双杂交载体的构建 | 第87-88页 |
| 14、OVP和EED蛋白序列的生物信息学简单分析 | 第88-89页 |
| 15、eed1与Dr5杂交 | 第89-90页 |
| 第四部分 讨论 | 第90-95页 |
| 一、ovp1(KD362)是一个花粉发育异常的雄配子突变体 | 第90-91页 |
| 1、分离比 | 第90页 |
| 2、遗传分析 | 第90页 |
| 3、表型分析 | 第90-91页 |
| 二、OVP是控制雄配子体发育的基因 | 第91-92页 |
| 三、OVP表达与定位的研究 | 第92页 |
| 1、OVP基因表达分析 | 第92页 |
| 2、OVP基因的定位 | 第92页 |
| 四、eed1是一个胚胎早期发生异常的突变体 | 第92-93页 |
| 1、分离比 | 第92-93页 |
| 2、遗传分析 | 第93页 |
| 3、表型分析 | 第93页 |
| 五、EED是一个控制胚胎早期发生的关键基因 | 第93-94页 |
| 六、EED基因表达分析 | 第94-95页 |
| 结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-103页 |
| 附录一 | 第103-104页 |
| 附录二 | 第104-106页 |
| 附录三 | 第106页 |
| 附录四 | 第106-109页 |
| 附录五 | 第109-111页 |
| 附录六 | 第111-112页 |
| 附录七 | 第112页 |
| 附录八 | 第112-113页 |
| 附录九 | 第113-114页 |
| 附录十 | 第114-115页 |
| 附录十一 | 第115页 |
| 附录十二 | 第115页 |
| 附录十三 | 第115-116页 |
| 附录十四 | 第116页 |
| 附录十五 | 第116-117页 |
| 附录十六 | 第117-118页 |
| 附录十七 | 第118页 |
| 附录十八 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 在读期间研究成果 | 第120页 |
