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马铃薯Y病毒复制酶基因介导的病毒抗性研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-16页
1 引言第16-34页
   ·转基因沉默第16-18页
     ·转录后基因沉默在生物界的广泛性第16-17页
     ·转录后基因沉默的可传导性第17-18页
     ·转录后基因沉默的高特异性第18页
   ·RNA 沉默涉及到的主要因子第18-22页
     ·dsRNA 和siRNA第18-19页
     ·双链RNA 特异性核酸内切酶(Dicer)第19-20页
     ·RNA 依赖的RNA 聚合酶(RNA dependent RNA Polymerase, RdRP)第20-21页
     ·RNA 诱导的沉默复合物( RNA-induced silencing complex, RISC)第21-22页
   ·RNA 沉默的分子机理及其研究进展第22-26页
     ·RNA 阈值模型第22-23页
     ·异常RNA 模型第23页
     ·双链RNA 模型第23-26页
   ·RNA 介导的病毒抗性第26-30页
     ·RNA 介导病毒抗性的特点第26-27页
     ·RNA 介导的病毒抗性属于转录后基因沉默第27-28页
     ·hpRNA 与RNA 介导的病毒抗性第28-29页
     ·核酸序列同源性与RNA 介导的病毒抗性第29-30页
   ·马铃薯Y 病毒复制酶基因与抗病毒基因工程第30-32页
   ·本研究的立题依据和主要研究内容第32-34页
     ·立题依据第32-33页
     ·本研究主要研究内容第33-34页
2 材料与方法第34-54页
   ·材料第34页
   ·方法第34-54页
3 结果与分析第54-82页
 第一章 马铃薯Y 病毒复制酶基因的保守序列介导的病毒抗性第54-71页
   ·PVY NIb 基因保守序列的确定及同源性分析第54页
   ·目的片段的获得第54-55页
   ·重组表达载体的构建第55-57页
   ·植物表达载体的酶切鉴定第57-58页
   ·转化植株的获得第58-59页
   ·转化植株的PCR 检测第59-60页
   ·转基因植株的抗病性分析第60-67页
   ·转基因植株Southern 的杂交分析第67-70页
   ·转基因植株的Northern 杂交分析第70页
   ·转基因植株siRNA 的杂交分析第70-71页
 第二章 马铃薯Y 病毒复制酶基因不同位置cDNA 区段介导对PVY 的抗性第71-82页
   ·目的片段的获得第71页
   ·目的片段的扩增和酶切第71-72页
   ·质粒DNA 的酶切和回收第72页
   ·植物表达载体的构建第72-75页
   ·转化植株的获得第75-76页
   ·转化植株的PCR 检测第76-77页
   ·转基因植株的抗病性分析第77-80页
   ·转基因烟草的Northern 杂交分析第80-81页
   ·抗病烟草植株中siRNA 的杂交分析第81-82页
4 讨论第82-87页
5 结论第87-88页
6 参考文献第88-102页
7 附录第102-110页
8 致谢第110-111页
9 攻读学位期间发表论文情况第111页

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