中文摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-16页 |
1 引言 | 第16-34页 |
·转基因沉默 | 第16-18页 |
·转录后基因沉默在生物界的广泛性 | 第16-17页 |
·转录后基因沉默的可传导性 | 第17-18页 |
·转录后基因沉默的高特异性 | 第18页 |
·RNA 沉默涉及到的主要因子 | 第18-22页 |
·dsRNA 和siRNA | 第18-19页 |
·双链RNA 特异性核酸内切酶(Dicer) | 第19-20页 |
·RNA 依赖的RNA 聚合酶(RNA dependent RNA Polymerase, RdRP) | 第20-21页 |
·RNA 诱导的沉默复合物( RNA-induced silencing complex, RISC) | 第21-22页 |
·RNA 沉默的分子机理及其研究进展 | 第22-26页 |
·RNA 阈值模型 | 第22-23页 |
·异常RNA 模型 | 第23页 |
·双链RNA 模型 | 第23-26页 |
·RNA 介导的病毒抗性 | 第26-30页 |
·RNA 介导病毒抗性的特点 | 第26-27页 |
·RNA 介导的病毒抗性属于转录后基因沉默 | 第27-28页 |
·hpRNA 与RNA 介导的病毒抗性 | 第28-29页 |
·核酸序列同源性与RNA 介导的病毒抗性 | 第29-30页 |
·马铃薯Y 病毒复制酶基因与抗病毒基因工程 | 第30-32页 |
·本研究的立题依据和主要研究内容 | 第32-34页 |
·立题依据 | 第32-33页 |
·本研究主要研究内容 | 第33-34页 |
2 材料与方法 | 第34-54页 |
·材料 | 第34页 |
·方法 | 第34-54页 |
3 结果与分析 | 第54-82页 |
第一章 马铃薯Y 病毒复制酶基因的保守序列介导的病毒抗性 | 第54-71页 |
·PVY NIb 基因保守序列的确定及同源性分析 | 第54页 |
·目的片段的获得 | 第54-55页 |
·重组表达载体的构建 | 第55-57页 |
·植物表达载体的酶切鉴定 | 第57-58页 |
·转化植株的获得 | 第58-59页 |
·转化植株的PCR 检测 | 第59-60页 |
·转基因植株的抗病性分析 | 第60-67页 |
·转基因植株Southern 的杂交分析 | 第67-70页 |
·转基因植株的Northern 杂交分析 | 第70页 |
·转基因植株siRNA 的杂交分析 | 第70-71页 |
第二章 马铃薯Y 病毒复制酶基因不同位置cDNA 区段介导对PVY 的抗性 | 第71-82页 |
·目的片段的获得 | 第71页 |
·目的片段的扩增和酶切 | 第71-72页 |
·质粒DNA 的酶切和回收 | 第72页 |
·植物表达载体的构建 | 第72-75页 |
·转化植株的获得 | 第75-76页 |
·转化植株的PCR 检测 | 第76-77页 |
·转基因植株的抗病性分析 | 第77-80页 |
·转基因烟草的Northern 杂交分析 | 第80-81页 |
·抗病烟草植株中siRNA 的杂交分析 | 第81-82页 |
4 讨论 | 第82-87页 |
5 结论 | 第87-88页 |
6 参考文献 | 第88-102页 |
7 附录 | 第102-110页 |
8 致谢 | 第110-111页 |
9 攻读学位期间发表论文情况 | 第111页 |