| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-22页 |
| 第一章 肠毒素性大肠埃希菌肠毒素研究进展 | 第12-17页 |
| ·不耐热肠毒素（Heat-labile toxin，LT） | 第12-14页 |
| ·LT 的理化性质和分类 | 第12-13页 |
| ·LT 的分子结构和生物学功能 | 第13-14页 |
| ·LT 的致病机理 | 第14页 |
| ·耐热性肠毒素（Heat-stable toxin，ST） | 第14-15页 |
| ·ST 的理化性质和分类 | 第14页 |
| ·ST 的分子结构和生物学功能 | 第14页 |
| ·STa 的致病机理 | 第14-15页 |
| ·肠毒素的检测 | 第15-17页 |
| 第二章 实时荧光定量PCR 法研究进展 | 第17-22页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术的原理 | 第17页 |
| ·实时荧光定量PCR 方法的分类 | 第17-19页 |
| ·非特异性DNA 结合染料法 | 第17-18页 |
| ·探针法 | 第18-19页 |
| ·荧光定量PCR 技术的应用 | 第19-22页 |
| ·病原体的分子检测 | 第19-20页 |
| ·基因表达的定量分析 | 第20页 |
| ·单核苷酸多态性分析 | 第20页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术的应用前景 | 第20-22页 |
| 试验研究 | 第22-39页 |
| 第三章 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 检测ETEC 肠毒素方法的建立 | 第22-35页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·试验菌株 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器与设备 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-27页 |
| ·PCR 引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| ·细菌基因组DNA 的提取 | 第24页 |
| ·常规PCR 扩增 | 第24页 |
| ·PCR 产物的胶回收 | 第24-25页 |
| ·胶回收产物与Pmd 19-T Vector 连接 | 第25页 |
| ·感受态细胞的制备（CaCl_2 法） | 第25页 |
| ·连接产物的转化 | 第25-26页 |
| ·菌液PCR 鉴定 | 第26页 |
| ·重组质粒的提取 | 第26页 |
| ·重组质粒PCR 鉴定 | 第26页 |
| ·重组质粒的拷贝数计算 | 第26-27页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 方法的建立 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-33页 |
| ·肠毒素基因PCR 产物的鉴定、测序结果 | 第27-29页 |
| ·DNA 标准品纯度测定 | 第29页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 标准曲线的制作及线性范围分析 | 第29-31页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 反应的特异性分析 | 第31页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 反应的准确性和重复性 | 第31-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·检测ETEC 的Q-PCR 方法的建立 | 第33页 |
| ·荧光定量PCR 标准品的选择 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第四章 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 检测小鼠肠道内容物中的ETEC | 第35-39页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·试验菌株 | 第35页 |
| ·试验动物 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-36页 |
| ·细菌计数 | 第35页 |
| ·接种方案 | 第35-36页 |
| ·采样方案 | 第36页 |
| ·样品处理 | 第36页 |
| ·样品的定量检测 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-37页 |
| ·临床表现及病变 | 第36页 |
| ·人工感染小鼠肠道内容物中LT 和STa 的ETEC 的增殖情况 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| ·含LT 的ETEC 感染与宿主细胞的关系 | 第37-38页 |
| ·含STa 的ETEC 感染与宿主细胞的关系 | 第38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 附录 | 第46-50页 |
| 缩略词 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
