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杜氏盐藻S-腺苷同型半胱氨酸水解酶相互作用蛋白的筛选与鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
1 引言第13-15页
2 酵母双杂交筛选SAHH相互作用的蛋白第15-31页
   ·材料第15-17页
     ·主要设备第15-16页
     ·杜氏盐藻藻株及所用菌株和细胞株第16页
     ·主要试剂第16页
     ·常用培养基及试剂的配置方法第16-17页
   ·方法第17-24页
     ·酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH的构建及鉴定第17-20页
     ·酵母感受态细胞的制备、转化及阳性克隆的鉴定第20-21页
     ·酵母双杂交诱饵载体的毒性和自激活检测第21-22页
     ·酵母双杂交第22页
     ·回交实验第22-24页
   ·结果第24-29页
     ·酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH的构建及鉴定第24-25页
     ·诱饵载体转化酵母感受态细胞及鉴定结果第25-26页
     ·酵母双杂交诱饵载体的毒性和自激活检测第26-27页
     ·酵母双杂交第27-28页
     ·回交实验第28-29页
   ·讨论第29-30页
   ·结论第30-31页
3 蛋白-蛋白相互作用验证第31-50页
   ·材料第31-32页
     ·仪器设备第31页
     ·菌种与载体第31页
     ·主要试剂第31-32页
     ·主要试剂配置方法第32页
   ·方法第32-41页
     ·RACK1基因原核表达载体的构建、表达及鉴定第32-36页
     ·Far-Western blotting第36-37页
     ·His pull-down及native-PAGE检测第37-38页
     ·免疫共沉淀第38-41页
   ·结果第41-48页
     ·RACK1基因原核表达载体的构建、表达及鉴定第41-45页
     ·Far-Western blotting第45-46页
     ·His pull-down及native-PAGE检测第46-47页
     ·免疫共沉淀第47-48页
   ·讨论第48-49页
   ·结论第49-50页
4 SAHH和RACK1在杜氏盐藻鞭毛长度调控中的作用第50-54页
   ·材料第50-51页
     ·主要材料第50-51页
   ·方法第51-52页
     ·杜氏盐藻pH休克法去鞭毛后再生第51页
     ·实时定量PCR模板的准备第51页
     ·RACK1实时定量荧光PCR第51-52页
   ·结果第52页
     ·实时定量荧光PCR结果第52页
   ·讨论第52-53页
   ·结论第53-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-58页
综述第58-65页
 参考文献第61-65页
致谢第65-66页
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果第66页

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