摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
1 引言 | 第13-15页 |
2 酵母双杂交筛选SAHH相互作用的蛋白 | 第15-31页 |
·材料 | 第15-17页 |
·主要设备 | 第15-16页 |
·杜氏盐藻藻株及所用菌株和细胞株 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16页 |
·常用培养基及试剂的配置方法 | 第16-17页 |
·方法 | 第17-24页 |
·酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH的构建及鉴定 | 第17-20页 |
·酵母感受态细胞的制备、转化及阳性克隆的鉴定 | 第20-21页 |
·酵母双杂交诱饵载体的毒性和自激活检测 | 第21-22页 |
·酵母双杂交 | 第22页 |
·回交实验 | 第22-24页 |
·结果 | 第24-29页 |
·酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH的构建及鉴定 | 第24-25页 |
·诱饵载体转化酵母感受态细胞及鉴定结果 | 第25-26页 |
·酵母双杂交诱饵载体的毒性和自激活检测 | 第26-27页 |
·酵母双杂交 | 第27-28页 |
·回交实验 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
·结论 | 第30-31页 |
3 蛋白-蛋白相互作用验证 | 第31-50页 |
·材料 | 第31-32页 |
·仪器设备 | 第31页 |
·菌种与载体 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31-32页 |
·主要试剂配置方法 | 第32页 |
·方法 | 第32-41页 |
·RACK1基因原核表达载体的构建、表达及鉴定 | 第32-36页 |
·Far-Western blotting | 第36-37页 |
·His pull-down及native-PAGE检测 | 第37-38页 |
·免疫共沉淀 | 第38-41页 |
·结果 | 第41-48页 |
·RACK1基因原核表达载体的构建、表达及鉴定 | 第41-45页 |
·Far-Western blotting | 第45-46页 |
·His pull-down及native-PAGE检测 | 第46-47页 |
·免疫共沉淀 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·结论 | 第49-50页 |
4 SAHH和RACK1在杜氏盐藻鞭毛长度调控中的作用 | 第50-54页 |
·材料 | 第50-51页 |
·主要材料 | 第50-51页 |
·方法 | 第51-52页 |
·杜氏盐藻pH休克法去鞭毛后再生 | 第51页 |
·实时定量PCR模板的准备 | 第51页 |
·RACK1实时定量荧光PCR | 第51-52页 |
·结果 | 第52页 |
·实时定量荧光PCR结果 | 第52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
·结论 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
综述 | 第58-65页 |
参考文献 | 第61-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第66页 |