玉米胁迫相关基因的启动子克隆和多基因表达载体的构建
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 符号说明 | 第11-14页 |
| 1 前言 | 第14-34页 |
| ·启动子 | 第14-22页 |
| ·植物启动子研究概述 | 第14-15页 |
| ·增强子与沉默子 | 第15页 |
| ·植物启动子的分类 | 第15-19页 |
| ·启动子的研究方法 | 第19-22页 |
| ·胁迫相关基因研究进展 | 第22-28页 |
| ·植物抗逆研究 | 第22-24页 |
| ·几个植物胁迫相关基因 | 第24-28页 |
| ·Gateway技术 | 第28-32页 |
| ·Gateway技术的原理 | 第28-30页 |
| ·Gateway技术的优点 | 第30-31页 |
| ·Gateway技术的应用 | 第31页 |
| ·基于Gateway原理的载体改进技术 | 第31-32页 |
| ·本工作的目的与意义 | 第32-34页 |
| ·胁迫相关基因启动子的克隆及初步分析 | 第32-33页 |
| ·基于Gateway原理改造的多基因串联载体 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-45页 |
| ·玉米胁迫相关基因的启动子克隆 | 第34-37页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第34页 |
| ·药品、试剂和溶液 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第37-41页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第37页 |
| ·药品、试剂和溶液 | 第37页 |
| ·质粒DNA的提取和酶切 | 第37-38页 |
| ·DNA片段的回收和定量 | 第38页 |
| ·DNA片段的去磷酸化 | 第38页 |
| ·外源DNA片段与载体片段的连接 | 第38页 |
| ·LR反应 | 第38-39页 |
| ·大肠杆菌转化和重组质粒的鉴定 | 第39页 |
| ·重组质粒转入农杆菌 | 第39页 |
| ·多基因表达载体的构建 | 第39-41页 |
| ·报告基因的瞬时表达分析 | 第41-42页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·培养基和试剂 | 第41页 |
| ·利用基因枪转化玉米胚芽鞘和洋葱内表皮 | 第41-42页 |
| ·玉米胚芽鞘的GUS组织化学检测 | 第42页 |
| ·洋葱内表皮的GFP荧光观察 | 第42页 |
| ·玉米遗传转化和转基因植株的检测 | 第42-45页 |
| ·玉米遗传转化 | 第42-43页 |
| ·转基因植株除草剂抗性筛选 | 第43页 |
| ·T1代转基因玉米植株的PCR检测 | 第43-45页 |
| 3 实验结果 | 第45-62页 |
| ·克隆玉米胁迫相关基因的启动子 | 第45-47页 |
| ·胁迫相关基因的查找 | 第45页 |
| ·启动子的克隆 | 第45-47页 |
| ·不同启动子的序列分析 | 第47页 |
| ·玉米基因启动子特性的初步分析 | 第47-54页 |
| ·启动子分析载体构建路线 | 第47-50页 |
| ·重组质粒的限制性酶切鉴定 | 第50-53页 |
| ·"启动子-gus"瞬时表达分析 | 第53-54页 |
| ·"启动子-gus"转化玉米植株的产生和筛选 | 第54页 |
| ·多基因植物表达载体的构建 | 第54-62页 |
| ·入门载体构建路线 | 第54-56页 |
| ·入门载体的质粒图谱及酶切鉴定结果 | 第56-57页 |
| ·入门载体测序结果 | 第57-59页 |
| ·多基因植物表达载体的构建 | 第59-62页 |
| 4 讨论 | 第62-65页 |
| ·玉米胁迫相关基因的启动子克隆和序列分析 | 第62-63页 |
| ·多基因串联载体的构建 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第77页 |
