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一个人类睾丸特异表达新基因-septin 12 transcript variant 2的克隆与功能初步研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-10页
目录第10-13页
英文缩略词第13-14页
前言第14-16页
实验技术路线第16-17页
第一章 睾丸特异表达新基因的克隆第17-50页
 1 材料和方法第17-33页
   ·材料与试剂第17-18页
   ·主要仪器第18页
   ·PCR引物第18-19页
   ·菌株和质粒载体第19-20页
   ·新基因分析的主要软件与数据库第20页
   ·数据库消减杂交和新基因的电子克隆第20-28页
   ·睾丸组织总RNA抽提第28-29页
   ·RNA逆转录合成cDNA第一链第29-30页
   ·PCR验证新基因阅读框的正确性第30页
   ·大肠杆菌感受态的制备第30-31页
   ·连接反应第31-32页
   ·转化实验第32页
   ·阳性克隆的初步鉴定第32-33页
 2 结果第33-46页
   ·数据库消减杂交DDD结果第33-35页
   ·新基因序列分析第35-39页
   ·新基因阅读框分析第39页
   ·新基因阅读框的PCR验证第39-40页
   ·新基因阅读框PCR产物测序第40-45页
   ·新基因内含子-外显子交界第45-46页
 3 讨论第46-50页
第二章 生物信息学分析第50-86页
 1 材料和方法第50-51页
   ·主要仪器第50页
   ·生物信息学数据库和分析软件第50-51页
 2 结果第51-81页
   ·新基因序列同源性分析第51-58页
   ·染色体定位第58-66页
   ·新基因酶切位点分析第66-69页
   ·新基因编码蛋白质理化性质分析第69-70页
   ·蛋白质跨膜区和信号肽预测第70-71页
   ·蛋白质疏水性分析第71-72页
   ·蛋白质细胞内定位预测第72-74页
   ·蛋白质同源性分析第74-78页
   ·蛋白质功能位点分析第78-81页
 3 讨论第81-86页
第三章 新基因功能的初步研究第86-116页
 1 材料和方法第86-99页
   ·材料与试剂第86-87页
   ·主要仪器第87-88页
   ·PCR引物第88页
   ·组织总RNA抽提第88-89页
   ·RNA样品浓度的测定与质量鉴定第89-90页
   ·RNA逆转录合成cDNA第一链第90页
   ·PCR检测新基因表达第90-91页
   ·PCR产物的纯化和回收第91页
   ·大肠杆菌感受态的制备第91-92页
   ·连接反应第92页
   ·转化实验第92-93页
   ·质粒DNA的小量抽提第93-94页
   ·Northern印迹杂交第94-95页
   ·组织原位杂交: 采用Septin原位杂交检测试剂盒第95-98页
   ·新基因真核表达载体的构建第98-99页
 2 结果第99-111页
   ·不同发育阶段的多组织RT-PCR第99-103页
   ·人睾丸组织原位杂交第103-108页
   ·Northern杂交检测第108-110页
   ·septin 12 transcript variant 2真核表达载体的构建第110-111页
 3 讨论第111-116页
总结第116-117页
参考文献第117-124页
综述第124-138页
附录第138-140页
致谢第140-141页
在读学位期间主要的研究成果第141页

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