目录 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一部分:新型甲型H1N1流感病毒重组血凝素蛋白(HA)与神经氨酸酶蛋白(NA)的表达及人源中和单抗的制备 | 第15-70页 |
(一) 新型甲型H1N1流感病毒重组血凝素蛋白(HA)与神经氨酸酶蛋白(NA) | 第15-44页 |
一、实验材料 | 第15-22页 |
二、实验方法 | 第22-36页 |
三、实验结果 | 第36-42页 |
1、目的基因HA和NA的鉴定 | 第36-37页 |
2、重组质粒pFAST Bac1-HA、pAcGP67B-HA、pFAST Bac1-NA与pAcGP67B-NA的鉴定 | 第37-38页 |
3、重组杆粒Bacmid-HA的鉴定 | 第38页 |
4、血凝素HA蛋白在Sf9细胞中的表达、纯化和鉴定 | 第38-41页 |
5、血凝素HA的生物活性检测 | 第41-42页 |
四、讨论 | 第42-44页 |
(二) 制备抗新型甲型H1N1流感病毒血凝素蛋白的人源中和抗体 | 第44-70页 |
一、实验材料 | 第44-49页 |
二、实验方法 | 第49-61页 |
三、实验结果 | 第61-66页 |
1、磁珠分选获得记忆性CD19~+CD27~+B细胞 | 第61-62页 |
2、EBV转化B细胞克隆形成 | 第62页 |
3、ELISA筛选能分泌HA特异性抗体的B细胞 | 第62-63页 |
4、PEG细胞融合实验 | 第63-64页 |
5、制备基因工程抗体 | 第64-66页 |
四、讨论 | 第66-70页 |
第二部分:新型流感血凝素蛋白表位肽疫苗 | 第70-86页 |
一、实验材料 | 第70-74页 |
二、实验方法 | 第74-78页 |
三、实验结果 | 第78-84页 |
1、设计新型HA肽疫苗 | 第78-79页 |
2、免疫小鼠血清对肽、重组HA蛋白或疫苗的结合能力 | 第79-80页 |
3、免疫小鼠血清的血凝抑制实验HI | 第80-81页 |
4、免疫小鼠血清中和活性 | 第81-82页 |
5、肽阻断免疫小鼠血清结合重组HA蛋白 | 第82-84页 |
四、讨论 | 第84-86页 |
全文小结 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-97页 |
文献综述 | 第97-126页 |
参考文献 | 第107-126页 |
个人简历 | 第126-128页 |
致谢 | 第128-129页 |