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晚疫病抗性信号传导研究体系的构建和番茄抗病资源的创新

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-33页
   ·马铃薯和番茄晚疫病第13-15页
     ·晚疫病对马铃薯和番茄生产的危害第13-14页
     ·晚疫病致病菌第14页
     ·番茄晚疫病菌与马铃薯的晚疫病菌第14-15页
     ·马铃薯和番茄抗晚疫病基因的研究第15页
   ·植物抗病的信号传导第15-24页
     ·植物的抗病性的类型第15-16页
     ·植物的抗病机制第16-17页
     ·抗病基因的结构域和功能第17-18页
     ·病原菌的无毒基因第18-19页
     ·植物抗病基因与病原无毒基因的识别第19-20页
     ·R 基因的下游信号传导的关键基因第20-23页
     ·茄科植物在病理研究中的关键地位第23-24页
   ·病毒诱导的基因沉默和农杆菌瞬时表达第24-28页
     ·病毒诱导的基因沉默的机理第24-25页
     ·VIGS 病毒载体及构建第25-26页
     ·VIGS 的优缺点及其安全性问题第26页
     ·农杆菌瞬时表达原理和应用第26-27页
     ·VIGS 方法与瞬时表达结合在植病互作研究中的应用第27-28页
   ·诱导表达系统的简介及其在病理研究中的应用第28-30页
     ·诱导表达系统的简介第28-30页
     ·化学诱导表达系统在抗病信号传导及其它研究领域的应用第30页
   ·侧翼序列扩增的方法、原理及其应用第30-31页
   ·论文的立题依据、研究目的及意义和研究内容第31-33页
     ·立题依据第31-32页
     ·研究的目的及意义第32页
     ·研究内容第32-33页
第二章 利用VIGS 和瞬时表达研究R3a 和Av13a 互作的信号传导关键基因第33-46页
   ·前言第33-34页
   ·材料与方法第34-38页
     ·材料第34页
     ·方法第34-38页
   ·结果与分析第38-43页
     ·VIGS 与瞬时表达体系建立第38-39页
     ·已知关键基因的VIGS 载体构建第39-41页
     ·VIGS 沉默后的RT-PCR 验证和烟草植株表型第41-42页
     ·SGT1 和HSP90 参与R3a 和 Av13a、INF1 诱导的HR 反应第42-43页
   ·讨论第43-45页
     ·烟草是利用VIGS 研究R3a 与Av13a 信号传导的模式体系第43-44页
     ·VIGS 和瞬时表达结合是研究抗病信号途径的有效方法第44页
     ·SGT1 和HSP90 参与R3a 与 Av13a 诱导的HR 反应第44页
     ·其它信号途径关键基因没有阻断R3a 与 Av13a 诱导HR 反应的原因第44-45页
   ·结论第45-46页
第三章 晚疫病抗病信号传导研究系统的构建第46-56页
   ·前言第46-47页
   ·材料与方法第47-50页
     ·材料第47-48页
     ·方法第48-50页
   ·结果与分析第50-54页
     ·R3a 转基因植株对马铃薯晚疫病菌株显示小种特异性抗性第50-51页
     ·pTA7002:Av13a 载体的构建第51-52页
     ·MM-R3a-Av13a 植株的构建及Av13a 的诱导表达第52-53页
     ·诱导剂DEX 处理MM-R3a-Av13a 植株第53-54页
   ·讨论第54-55页
     ·马铃薯抗病基因可应用于番茄第54页
     ·番茄可以作为R3a 与Av13a 信号传导途径研究的模式系统第54页
     ·构建MM-R3a-Av13a 番茄植株研究植物抗晚疫病机理第54-55页
   ·结论第55-56页
第四章 侧翼序列扩增筛选纯合MM-R3a-Av13a 植株第56-72页
   ·前言第56-57页
   ·材料方法第57-61页
     ·材料第57页
     ·方法第57-61页
   ·结果与分析第61-69页
     ·R3a 基因侧翼序列的扩增第61-62页
     ·R3a 基因侧翼序列测序结果分析第62-63页
     ·R3a 基因侧翼序列与边界序列在转基因后代中的扩增第63-64页
     ·Av13a 基因插入位点侧翼序列扩增第64-65页
     ·Av13a 侧翼序列测序结果分析第65页
     ·Av13a 基因侧翼序列与边界序列扩增第65-66页
     ·侧翼序列扩增在后代群体中的验证第66-67页
     ·诱导剂DEX 处理MM-R3a-Av13a 纯合株系第67-69页
   ·讨论第69-71页
     ·连接接头的PCR 方法是扩增侧翼侧翼未知序列的有效方法第69-70页
     ·利用 R3a 和Av13a 侧翼序列筛选纯合MM-R3a-Av13a 植株第70页
     ·MM-R3a-Av13a 纯合植株构建突变体库和突变体筛选方法确定第70-71页
   ·结论第71-72页
第五章 马铃薯抗晚疫病基因在番茄中的应用研究第72-79页
   ·前言第72-73页
   ·材料与方法第73-74页
     ·材料第73页
     ·方法第73-74页
   ·结果与分析第74-77页
     ·T1 代R3a 转基因番茄PCR 及接种结果第74页
     ·番茄晚疫病菌株中Av13a 等位基因的分析第74-75页
     ·转基因番茄接种马铃薯晚疫病菌株结果第75页
     ·转基因番茄接种番茄晚疫病菌株第75-77页
   ·讨论第77-78页
     ·R3a 基因可稳定遗传第77页
     ·晚疫病菌中Av13a 基因的分析有利于指导R3a 的应用第77-78页
     ·马铃薯抗晚疫病基因RB 可应用于番茄抗晚疫病育种第78页
   ·结论第78-79页
第六章 全文结论第79-80页
参考文献第80-94页
附录第94-96页
致谢第96-97页
个人简介第97页

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