摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 绪论 | 第13-33页 |
·马铃薯和番茄晚疫病 | 第13-15页 |
·晚疫病对马铃薯和番茄生产的危害 | 第13-14页 |
·晚疫病致病菌 | 第14页 |
·番茄晚疫病菌与马铃薯的晚疫病菌 | 第14-15页 |
·马铃薯和番茄抗晚疫病基因的研究 | 第15页 |
·植物抗病的信号传导 | 第15-24页 |
·植物的抗病性的类型 | 第15-16页 |
·植物的抗病机制 | 第16-17页 |
·抗病基因的结构域和功能 | 第17-18页 |
·病原菌的无毒基因 | 第18-19页 |
·植物抗病基因与病原无毒基因的识别 | 第19-20页 |
·R 基因的下游信号传导的关键基因 | 第20-23页 |
·茄科植物在病理研究中的关键地位 | 第23-24页 |
·病毒诱导的基因沉默和农杆菌瞬时表达 | 第24-28页 |
·病毒诱导的基因沉默的机理 | 第24-25页 |
·VIGS 病毒载体及构建 | 第25-26页 |
·VIGS 的优缺点及其安全性问题 | 第26页 |
·农杆菌瞬时表达原理和应用 | 第26-27页 |
·VIGS 方法与瞬时表达结合在植病互作研究中的应用 | 第27-28页 |
·诱导表达系统的简介及其在病理研究中的应用 | 第28-30页 |
·诱导表达系统的简介 | 第28-30页 |
·化学诱导表达系统在抗病信号传导及其它研究领域的应用 | 第30页 |
·侧翼序列扩增的方法、原理及其应用 | 第30-31页 |
·论文的立题依据、研究目的及意义和研究内容 | 第31-33页 |
·立题依据 | 第31-32页 |
·研究的目的及意义 | 第32页 |
·研究内容 | 第32-33页 |
第二章 利用VIGS 和瞬时表达研究R3a 和Av13a 互作的信号传导关键基因 | 第33-46页 |
·前言 | 第33-34页 |
·材料与方法 | 第34-38页 |
·材料 | 第34页 |
·方法 | 第34-38页 |
·结果与分析 | 第38-43页 |
·VIGS 与瞬时表达体系建立 | 第38-39页 |
·已知关键基因的VIGS 载体构建 | 第39-41页 |
·VIGS 沉默后的RT-PCR 验证和烟草植株表型 | 第41-42页 |
·SGT1 和HSP90 参与R3a 和 Av13a、INF1 诱导的HR 反应 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
·烟草是利用VIGS 研究R3a 与Av13a 信号传导的模式体系 | 第43-44页 |
·VIGS 和瞬时表达结合是研究抗病信号途径的有效方法 | 第44页 |
·SGT1 和HSP90 参与R3a 与 Av13a 诱导的HR 反应 | 第44页 |
·其它信号途径关键基因没有阻断R3a 与 Av13a 诱导HR 反应的原因 | 第44-45页 |
·结论 | 第45-46页 |
第三章 晚疫病抗病信号传导研究系统的构建 | 第46-56页 |
·前言 | 第46-47页 |
·材料与方法 | 第47-50页 |
·材料 | 第47-48页 |
·方法 | 第48-50页 |
·结果与分析 | 第50-54页 |
·R3a 转基因植株对马铃薯晚疫病菌株显示小种特异性抗性 | 第50-51页 |
·pTA7002:Av13a 载体的构建 | 第51-52页 |
·MM-R3a-Av13a 植株的构建及Av13a 的诱导表达 | 第52-53页 |
·诱导剂DEX 处理MM-R3a-Av13a 植株 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
·马铃薯抗病基因可应用于番茄 | 第54页 |
·番茄可以作为R3a 与Av13a 信号传导途径研究的模式系统 | 第54页 |
·构建MM-R3a-Av13a 番茄植株研究植物抗晚疫病机理 | 第54-55页 |
·结论 | 第55-56页 |
第四章 侧翼序列扩增筛选纯合MM-R3a-Av13a 植株 | 第56-72页 |
·前言 | 第56-57页 |
·材料方法 | 第57-61页 |
·材料 | 第57页 |
·方法 | 第57-61页 |
·结果与分析 | 第61-69页 |
·R3a 基因侧翼序列的扩增 | 第61-62页 |
·R3a 基因侧翼序列测序结果分析 | 第62-63页 |
·R3a 基因侧翼序列与边界序列在转基因后代中的扩增 | 第63-64页 |
·Av13a 基因插入位点侧翼序列扩增 | 第64-65页 |
·Av13a 侧翼序列测序结果分析 | 第65页 |
·Av13a 基因侧翼序列与边界序列扩增 | 第65-66页 |
·侧翼序列扩增在后代群体中的验证 | 第66-67页 |
·诱导剂DEX 处理MM-R3a-Av13a 纯合株系 | 第67-69页 |
·讨论 | 第69-71页 |
·连接接头的PCR 方法是扩增侧翼侧翼未知序列的有效方法 | 第69-70页 |
·利用 R3a 和Av13a 侧翼序列筛选纯合MM-R3a-Av13a 植株 | 第70页 |
·MM-R3a-Av13a 纯合植株构建突变体库和突变体筛选方法确定 | 第70-71页 |
·结论 | 第71-72页 |
第五章 马铃薯抗晚疫病基因在番茄中的应用研究 | 第72-79页 |
·前言 | 第72-73页 |
·材料与方法 | 第73-74页 |
·材料 | 第73页 |
·方法 | 第73-74页 |
·结果与分析 | 第74-77页 |
·T1 代R3a 转基因番茄PCR 及接种结果 | 第74页 |
·番茄晚疫病菌株中Av13a 等位基因的分析 | 第74-75页 |
·转基因番茄接种马铃薯晚疫病菌株结果 | 第75页 |
·转基因番茄接种番茄晚疫病菌株 | 第75-77页 |
·讨论 | 第77-78页 |
·R3a 基因可稳定遗传 | 第77页 |
·晚疫病菌中Av13a 基因的分析有利于指导R3a 的应用 | 第77-78页 |
·马铃薯抗晚疫病基因RB 可应用于番茄抗晚疫病育种 | 第78页 |
·结论 | 第78-79页 |
第六章 全文结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-94页 |
附录 | 第94-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
个人简介 | 第97页 |