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玉米(Zea mays L.)NADPH氧化酶基因克隆、表达特性及功能研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
英文缩写符号及中英文对照表第12-15页
第一章 文献综述第15-37页
 1 植物NADPH氧化酶基因的克隆与基本结构第16-20页
   ·植物NADPH氧化酶基因的克隆第16-17页
   ·植物NADPH氧化酶的结构特点第17-19页
   ·植物NADPH氧化酶的亚细胞定位第19-20页
 2 植物NADPH氧化酶的ROS信号第20-25页
   ·植物与病原体的相互作用第20-21页
   ·物理损伤第21-22页
   ·非生物胁迫反应第22-23页
   ·生长与发育第23-24页
   ·激素信号第24-25页
 3 植物NADPH氧化酶活性调节机制第25-30页
   ·Ca~(2+)对植物NADPH氧化酶活性的直接调节第25-26页
   ·磷酸化对植物NADPH氧化酶活性的调节第26-27页
   ·Rop蛋白与植物NADPH氧化酶的相互作用第27-30页
 4 植物NADPH氧化酶相关的信号组分第30-35页
   ·MAPK信号级联系统第30-31页
   ·氧化还原敏感的转录因子第31-32页
   ·钙离子信号第32-33页
   ·超氧化物歧化酶第33页
   ·细胞pH值第33-34页
   ·磷脂酰肌醇信号系统第34-35页
 5 本研究的目的、意义第35-37页
第二章 ABA信号相关的玉米NADPH氧化酶基因克隆第37-61页
 1 材料与方法第38-45页
   ·材料第38-39页
   ·引物的设计第39-41页
   ·玉米总RNA的提取第41-42页
   ·cDNA第一链的合成第42页
   ·5 ’端基因的克隆(5’RACE)第42-43页
   ·3 ’端基因的克隆(3’RACE)第43-44页
   ·目的产物的克隆第44页
   ·Zmrboh基因的序列分析第44-45页
 2 结果与分析第45-58页
   ·RNA的质量检查结果第45-46页
   ·玉米NADPH氧化酶ZmrbohB基因的克隆第46-48页
   ·玉米NADPH氧化酶ZmrbohA基因的克隆第48-49页
   ·玉米NADPH氧化酶ZmrbohC基因的克隆第49-51页
   ·玉米NADPH氧化酶ZmrbohD基因的克隆第51-52页
   ·玉米NADPH氧化酶基因的序列分析第52-55页
   ·玉米NADPH氧化酶基因的组织特异性分析第55-58页
 3 讨论第58-61页
第三章 Zmrboh基因的可变剪切第61-79页
 1 材料与方法第62-67页
   ·材料第62-63页
   ·玉米叶片总RNA及cDNA第一链的合成第63页
   ·玉米叶片DNA的提取第63页
   ·ZmrbohB基因的可变剪切第63-64页
   ·ZmrbohD基因的可变剪切第64-65页
   ·ZmrbohB基因可变剪切异构体表达模式研究第65页
   ·ZmrbohB基因的原核表达、重组蛋白纯化与活性测定第65-66页
   ·ZmrbohD-β的亚细胞定位第66-67页
 2 结果第67-76页
   ·ZmrbohB基因的可变剪切第67-70页
   ·ZmrbohB基因可变剪切的表达模式第70-71页
   ·ZmrbohB基因的原核表达、重组蛋白纯化与活性测定第71-73页
   ·ZmrbohD基因的可变剪切第73-75页
   ·ZmrbohD-β的亚细胞定位第75-76页
 3 讨论第76-79页
第四章 ABA诱导的NADPH氧化酶转录及其正反馈信号第79-95页
 1 材料与方法第81-83页
   ·植物材料第81页
   ·玉米总RNA的提取及cDNA第一链的合成第81-82页
   ·Real-time RT-PCR检测Zmrboh基因在胁迫处理下的表达特征第82-83页
   ·统计分析第83页
 2 结果第83-88页
   ·外源ABA处理提高了玉米幼苗叶片ZmrbohA-D基因的表达第83-85页
   ·H_2O_2参与玉米幼苗叶片ZmrbohA-D基因转录水平的调节第85-87页
   ·MAPK参与ABA对玉米幼苗ZmrbohA-D基因转录水平的调节第87-88页
   ·MAPK参与H_2O_2对玉米幼苗叶片Zmrboh基因转录水平的调节第88页
 3 讨论第88-95页
   ·ABA诱导玉米幼苗叶片Zmrboh基因的表达第88-91页
   ·Zmrboh基因的表达受H_2O_2、MAPK的调节第91-95页
第五章 玉米ZmrbohB基因参与ABA诱导的抗氧化防护第95-121页
 1 材料与方法第97-104页
   ·材料第97页
   ·供试菌株和质粒第97页
   ·主要试剂和培养基第97-98页
   ·方法第98-104页
 2 结果与分析第104-118页
   ·农杆菌介导的玉米登海11号遗传体系的建立第104-109页
   ·农杆菌介导的玉米转ZmrbohB反向重复片段的转基因植株获得第109-114页
   ·ZmrbohB基因参与ABA诱导的玉米叶片细胞H_2O_2产生第114-115页
   ·ZmrbohB基因参与ABA诱导的抗氧化酶活性增加第115-118页
 3 讨论第118-121页
   ·登海11号(DH11)是适合于遗传转化的玉米杂交系第118-119页
   ·ZmrbohB基因参与ABA诱导的抗氧化酶活性增加第119-121页
参考文献第121-141页
全文结论以及研究的创新点第141-143页
攻读学位期间发表与投送的论文第143-145页
附录第145-155页
致谢第155页

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