| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-22页 |
| ·我国土地盐碱化的现状 | 第8页 |
| ·植物抗旱耐盐性研究现状及机制 | 第8-11页 |
| ·提高植物抗旱耐盐的方法 | 第11-12页 |
| ·植物甜菜碱及其相关合成酶基因 | 第12-19页 |
| ·甜菜碱 | 第12-15页 |
| ·胆碱单加氧酶(CMO)研究进展 | 第15-17页 |
| ·甜菜碱醛脱氢酶(BADH)研究进展 | 第17-19页 |
| ·展望 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 菠菜胆碱单加氧酶基因的克隆 | 第22-33页 |
| ·前言 | 第22页 |
| ·材料与方法 | 第22-28页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·酶和试剂 | 第22页 |
| ·CMO基因cDNA的克隆 | 第22-27页 |
| ·序列分析及同源性比较 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-31页 |
| ·菠菜RNA的提取 | 第28页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·CMO基因序列测定及同源性分析 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 CMO基因植物表达载体的构建 | 第33-47页 |
| ·前言 | 第33-34页 |
| ·材料和方法 | 第34-40页 |
| ·菌种和载体 | 第34页 |
| ·酶和试剂 | 第34页 |
| ·质粒DNA制备 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第35页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及冻融法转化 | 第35-36页 |
| ·CAMV35S启动子驱动的CMO基因表达载体构建 | 第36-37页 |
| ·rd29A启动子驱动的CMO基因表达载体构建 | 第37-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-45页 |
| ·CaMV 35S启动子驱动的CMO基因表达载体的构建 | 第40页 |
| ·表达载体pBI-CMO酶切鉴定 | 第40-41页 |
| ·质粒pBI-CMO导入农杆菌PCR扩增鉴定 | 第41-42页 |
| ·rd29A启动子驱动的CMO基因表达载体pBIr-CMO构建 | 第42-43页 |
| ·表达载体pBIr-CMO酶切鉴定 | 第43-44页 |
| ·质粒pBIr-CMO导入农杆菌PCR扩增鉴定 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 CMO基因在大肠杆菌中的表达 | 第47-53页 |
| ·前言 | 第47页 |
| ·材料和方法 | 第47-50页 |
| ·菌种和载体 | 第47-48页 |
| ·酶和试剂 | 第48页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第48页 |
| ·载体PET28A-CMO的构建 | 第48-49页 |
| ·PET28A-CMO重组质粒制备 | 第49页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)的制备及转化 | 第49页 |
| ·CMO融合蛋白的诱导表达 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-52页 |
| ·原核表达载体PET28A-CMO的构建 | 第50页 |
| ·原核表达载体PET28A-CMO酶切鉴定 | 第50-51页 |
| ·原核表达载体PET28A-CMO导入到BL21(DE3)PCR鉴定 | 第51页 |
| ·重组质粒PET28A-CMO在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录Ⅰ CMO基因在GENBANK登记信息mm | 第59-61页 |
| 作者介绍 | 第61-62页 |
| 导师简介 | 第62-63页 |
