| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| ·口蹄疫简介 | 第11页 |
| ·反向遗传系统概述 | 第11-13页 |
| ·反向遗传系统简介 | 第11-12页 |
| ·体外转录的拯救系统 | 第12页 |
| ·基于T7 RNA聚合酶的体内转录拯救系统 | 第12-13页 |
| ·FMDV反向遗传系统的国内外研究概况 | 第13页 |
| ·FMDV反向遗传系统的国外研究概况 | 第13页 |
| ·FMDV反向遗传系统的国内研究概况 | 第13页 |
| ·FMDV基因组学研究进展 | 第13-16页 |
| ·基因组的基本结构 | 第13-14页 |
| ·基因组VPg、非转录区、Poly(A)尾巴及其功能 | 第14页 |
| ·基因组的开放阅读框及其功能 | 第14-16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-24页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·仪器和设备 | 第17页 |
| ·质粒和菌株 | 第17页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第17页 |
| ·试剂盒 | 第17页 |
| ·细胞和细胞培养液 | 第17-18页 |
| ·引物合成 | 第18页 |
| ·常用溶液的配制 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-21页 |
| ·病毒培养 | 第19页 |
| ·RNA抽提 | 第19页 |
| ·RT-PCR | 第19-20页 |
| ·目的片段克隆 | 第20-21页 |
| ·序列测定和分析 | 第21页 |
| ·基因组拼接策略 | 第21页 |
| ·基因组cDNA的组装过程 | 第21-24页 |
| 3 实验结果 | 第24-38页 |
| ·基因组cDNA 5个片段的克隆和鉴定 | 第24-25页 |
| ·基因组cDNA 5个片段的RT-PCR | 第24页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第24-25页 |
| ·基因组cDNA的组装 | 第25-28页 |
| ·重组质粒3'UTR的获得 | 第25页 |
| ·重组质粒pMD-NSP-3D-3’UTR的获得 | 第25页 |
| ·重组质粒pOK-NSP-3D-3'UTR的获得 | 第25-26页 |
| ·重组质粒pOK-mut-SR-NSP-3D-3'UTR的获得 | 第26-27页 |
| ·重组质粒 pOK-SR的获得 | 第27页 |
| ·病毒全基因组的获得 | 第27-28页 |
| ·病毒全基因组序列分析 | 第28-38页 |
| ·O型 FMDV参考毒株序列 | 第28页 |
| ·全基因组序列分析 | 第28-30页 |
| ·1D基因 | 第30-32页 |
| ·L基因 | 第32-33页 |
| ·3A基因 | 第33-35页 |
| ·HW04株主要抗原位点 | 第35-38页 |
| 4 讨论 | 第38-43页 |
| ·全基因组cDNA的克隆、测序和拼接 | 第38-40页 |
| ·实验方法的探讨 | 第38-39页 |
| ·拼接策略 | 第39-40页 |
| ·HW04株全长基因组cDNA序列分析 | 第40-43页 |
| ·遗传演化和分类地位 | 第40-41页 |
| ·抗原位点 | 第41页 |
| ·毒力 | 第41-42页 |
| ·宿主嗜性 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录A: 质粒构建流程图 | 第49-53页 |
| 附录B: HW04株与参考序列基因同源性比对结果 | 第53-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第59页 |