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胚乳自主发生型龙须草FIE基因部分cDNA序列的克隆和表达分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
1 前言第10-20页
   ·植物无融合生殖的概念和类型第10-11页
   ·植物胚乳发育的研究进展第11-16页
     ·胚乳发育与基因组印记第11-12页
     ·无融合生殖植物胚乳发育的特点第12-13页
     ·胚乳发育相关基因的研究进展第13-16页
       ·MEA基因第14页
       ·FIE基因第14-15页
       ·MSI1基因第15页
       ·FIS与下游基因第15-16页
   ·龙须草无融合生殖的研究进展第16-17页
   ·组织化学原位杂交技术及其在基因组学研究中的应用第17-19页
   ·本研究的目的与意义第19-20页
2 材料与方法第20-26页
   ·材料第20-21页
   ·FIE序列的分离方法第21-22页
     ·总RNA的提取第21页
     ·RT—PCR第21-22页
       ·反转录第21页
       ·PCR第21-22页
     ·TA克隆第22页
       ·连接T-vector第22页
       ·感受态细胞制备第22页
       ·电转化第22页
     ·质粒的提取和鉴定、测序分析第22页
   ·组织化学原位杂交方法第22-26页
     ·石蜡切片的制作第22-23页
     ·水稻cRNA FIE探针的制备第23-24页
       ·抽提质粒第23页
       ·酶切线性化质粒第23页
       ·酶切产物的纯化第23-24页
       ·地高辛标记的体外转录第24页
     ·原位杂交第24-26页
3 结果与分析第26-35页
   ·RNA提取及EBFIE cDNA部分序列扩增第26页
   ·EbFIE部分cDNA克隆与测序第26-27页
   ·EbFIE1与部分植物FIE基因同源比对和进化分析第27-32页
     ·EbFIE1核苷酸序列同源性分析第27-28页
     ·EbFIE1氨基酸序列同源性分析第28-31页
     ·FIE氨基酸序列的进化树(Phylogenetic tree)分析第31-32页
   ·原位杂交结果第32-35页
4 讨论第35-39页
   ·FIE基因与胚乳发育第35-36页
   ·龙须草FIE基因的特点第36-37页
   ·实验方法与技术的优化第37-39页
5 展望第39-40页
参考文献第40-45页
致谢第45页

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