| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-31页 |
| 1 npt-Ⅱ基因和溶菌酶基因的概述 | 第16-18页 |
| ·npt-Ⅱ基因的筛选机理及应用 | 第16-17页 |
| ·溶菌酶及其应用 | 第17-18页 |
| 2 花粉管通道法的机理及优缺点 | 第18-20页 |
| ·花粉管通道法的机理 | 第18页 |
| ·花粉管通道法的优缺点 | 第18-20页 |
| ·优点 | 第19页 |
| ·缺点 | 第19-20页 |
| 3 棉花再生体系建立的研究现状 | 第20-22页 |
| ·材料的选择 | 第20页 |
| ·外植体的选择 | 第20页 |
| ·培养条件 | 第20-21页 |
| ·愈伤组织的诱导及继代增殖 | 第21页 |
| ·胚性愈伤组织的分化和植株再生移栽 | 第21-22页 |
| 4 棉花黄萎病的研究进展 | 第22-29页 |
| ·棉花黄萎病的致病情况及危害 | 第22-23页 |
| ·棉花黄萎病的防治措施 | 第23-24页 |
| ·种植抗(耐)病品种 | 第23页 |
| ·种子处理 | 第23页 |
| ·药剂防治 | 第23-24页 |
| ·平衡施肥 | 第24页 |
| ·适期晚播 | 第24页 |
| ·结铃早晚与发病 | 第24页 |
| ·轮作倒茬 | 第24页 |
| ·清洁田园 | 第24页 |
| ·施无病粪肥 | 第24页 |
| ·棉花抗黄萎病新品种选育进展 | 第24-25页 |
| ·棉花抗黄萎病的分子育种 | 第25-29页 |
| ·抗黄萎病基因的分子标记辅助育种 | 第26-28页 |
| ·RAPD的应用 | 第26页 |
| ·AFLP标记应用 | 第26-27页 |
| ·棉花黄萎病抗性基因的克隆 | 第27-28页 |
| ·棉花黄萎病转基因的育种 | 第28-29页 |
| 5 本课题立项依据和研究目的 | 第29-31页 |
| 第二章 棉花离体培养再生体系建立的研究 | 第31-45页 |
| 1 材料与方法 | 第31-32页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-32页 |
| ·培养条件 | 第32页 |
| ·统计方法 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-42页 |
| ·愈伤组织的诱导、继代和分化 | 第32-40页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第32-36页 |
| ·外植体的选择 | 第32-33页 |
| ·培养基的筛选 | 第33-34页 |
| ·基本培养基的选择 | 第33页 |
| ·不同激素及激素组合的筛选 | 第33-34页 |
| ·温度对愈伤组织的诱导的影响 | 第34-35页 |
| ·不同碳源对愈伤组织的诱导的影响 | 第35-36页 |
| ·愈伤组织的继代 | 第36-38页 |
| ·胚性愈伤组织的选择继代 | 第36-37页 |
| ·胚性愈伤组织的增殖 | 第37页 |
| ·不同碳源对愈伤组织继代的影响 | 第37页 |
| ·AgNO_3愈伤组织的继代的影响 | 第37-38页 |
| ·胚性愈伤组织的分化和植株再生 | 第38-40页 |
| ·胚性愈伤组织的分化培养基的选择 | 第38-39页 |
| ·不同碳源对胚性愈伤组织分化的影响 | 第39页 |
| ·不同培养基和激素对试管苗生长的影响 | 第39-40页 |
| ·再生植株的生根及移栽 | 第40页 |
| ·组织培养中降低褐化的研究 | 第40-42页 |
| ·激素组合的选择 | 第40-41页 |
| ·基本培养基的改良 | 第41页 |
| ·添加防褐物质 | 第41-42页 |
| 3 小结与讨论 | 第42-45页 |
| ·激素对愈伤组织的诱导和继代影响 | 第42-43页 |
| ·胚性愈伤组织的形成及胚状体萌发是植株再生的关键. | 第43页 |
| ·降低褐变是棉花组织培养成功的重要方面之一 | 第43-44页 |
| ·植株再生过程中有待解决的问题 | 第44-45页 |
| 第三章 花粉管通道法获得转溶菌酶基因抗病棉花 | 第45-66页 |
| 1 材料与方法 | 第45-55页 |
| ·材料 | 第45-48页 |
| ·基因 | 第45-46页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46-48页 |
| ·方法 | 第48-55页 |
| ·质粒DNA的大量制备及纯化 | 第48-50页 |
| ·在丰富培养基中扩增质粒 | 第48页 |
| ·细菌的收获和裂解 | 第48-50页 |
| ·遗传转化方法 | 第50页 |
| ·抗生素筛选转基因棉花的研究 | 第50-51页 |
| ·卡那霉素对拟转基因湘棉10号棉花种子的处理 | 第50页 |
| ·卡那霉素涂抹叶片试验 | 第50页 |
| ·G418处理棉花离体叶片 | 第50-51页 |
| ·PCR检测 | 第51-53页 |
| ·棉花DNA提取和纯化 | 第51-52页 |
| ·基因扩增反应体系 | 第52-53页 |
| ·外源基因的PCR-southern印迹杂交检测 | 第53-55页 |
| ·转膜 | 第53页 |
| ·杂交 | 第53-55页 |
| ·探针的制备及浓度检测 | 第53-54页 |
| ·杂交 | 第54页 |
| ·洗膜 | 第54页 |
| ·显色 | 第54-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-63页 |
| ·棉花的遗传转化 | 第55-57页 |
| ·转化位置的确定 | 第55页 |
| ·转化时间的确定 | 第55-56页 |
| ·注射方式的确定 | 第56-57页 |
| ·抗生素筛选转基因植株 | 第57-60页 |
| ·卡那霉素对转基因棉花种子检测临界浓度的确定 | 第57-58页 |
| ·湘棉15号棉花叶片对卡那霉素敏感性的测定 | 第58页 |
| ·转基因材料叶片和对照材料叶片对G418的反应 | 第58-59页 |
| ·转化植株的获得 | 第59-60页 |
| ·转基因棉花分子生物学鉴定 | 第60-63页 |
| ·湘棉10号植株总DNA的电泳 | 第60页 |
| ·PCR检测结果 | 第60-62页 |
| ·溶菌酶基因PCR扩增检测 | 第60-61页 |
| ·NPTⅡ基因PCR扩增检测 | 第61页 |
| ·NPTⅡ基因和溶菌酶基因的PCR扩增结果统计 | 第61-62页 |
| ·PCR-southern印迹杂交检测 | 第62-63页 |
| ·探针浓度的检测 | 第62页 |
| ·PCR-Southern结果 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| ·棉花的遗传转化方法 | 第63-64页 |
| ·影响转化率的因素 | 第63页 |
| ·花粉管通道法遗传转化的操作程序 | 第63-64页 |
| ·选择适宜的卡那霉素浓度是卡那霉素浸种筛选转基因棉花的关 键 | 第64页 |
| ·棉花总DNA的提取优化 | 第64-65页 |
| ·转溶菌酶基因棉花中外源基因的分子鉴定及其整合特点 | 第65-66页 |
| 第四章 转基因植株抗黄萎病的初步鉴定 | 第66-72页 |
| 1 材料 | 第66-67页 |
| ·植物材料 | 第66页 |
| ·菌种 | 第66页 |
| ·试剂 | 第66-67页 |
| 2 方法 | 第67-69页 |
| ·菌液浇根法 | 第67-68页 |
| ·方法和步骤 | 第67-68页 |
| ·用于棉苗培育的塑料营养钵的准备 | 第67页 |
| ·棉苗培育 | 第67-68页 |
| ·病菌培养与孢子悬浮液的配制 | 第68页 |
| ·接种方法 | 第68页 |
| ·针刺叶片喷洒法 | 第68-69页 |
| ·针刺处理 | 第68页 |
| ·培养病菌 | 第68页 |
| ·喷洒菌液 | 第68-69页 |
| 3 结果 | 第69-70页 |
| ·菌液浇根法第25统计天进行病情调查 | 第69页 |
| ·针刺叶片喷洒法处理植株一周后的生长情况 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 附图 | 第82-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 作者简介 | 第89页 |
