| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-27页 |
| ·细胞信号转导 | 第13-16页 |
| ·植物细胞信号转导 | 第13-16页 |
| ·植物MAPK Cascade 的组成 | 第16-21页 |
| ·植物中的MAPKKK | 第16-17页 |
| ·植物中的MAPKK | 第17-19页 |
| ·植物中的MAPK | 第19-21页 |
| ·MAPK Cascades 介导的信号转导途径 | 第21-25页 |
| ·MAPK Cascades 参与生物及非生物胁迫的调控 | 第21-23页 |
| ·MAPK Cascades 参与其他信号通路的调控 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第25-27页 |
| 2. 材料与方法 | 第27-47页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌株与质粒 | 第27页 |
| ·酶及生化试剂 | 第27页 |
| ·PCR 引物 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-29页 |
| ·材料处理 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-47页 |
| ·植物材料总RNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第31页 |
| ·普通PCR 以及Overlap-PCR 扩增 | 第31-32页 |
| ·连接反应 | 第32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化及阳性克隆筛选 | 第33页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第34页 |
| ·DNA 序列测定 | 第34页 |
| ·Northern Blot 杂交分析 | 第34-37页 |
| ·基因组DNA 提取（SDS 法） | 第37页 |
| ·玉米ZmMKK3 蛋白的原核表达 | 第37-40页 |
| ·原核表达玉米 ZmMKK3 重组蛋白抗体制备及效价测定 | 第40页 |
| ·Western blot 检测蛋白表达 | 第40-42页 |
| ·洋葱表皮亚细胞定位 | 第42-43页 |
| ·转烟草正义表达载体的构建 | 第43页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第43-44页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第44页 |
| ·转基因烟草的筛选鉴定 | 第44-45页 |
| ·干旱胁迫下烟草种子萌发实验及幼苗生长实验 | 第45页 |
| ·渗透胁迫下野生型及转基因烟草H_20_2积累量的检测 | 第45页 |
| ·植物抗氧化酶活力及丙二醛含量的测定 | 第45-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-61页 |
| ·GenBank 中关于MAPKK 基因信息的收集及整理 | 第47-48页 |
| ·玉米B 组MAPKK 基因ZmMKK3 的分离 | 第48-49页 |
| ·玉米MAPKK 基因的系统发生关系 | 第48-49页 |
| ·玉米MAPKK 基因ZmMKK3 的序列分析 | 第49-50页 |
| ·关于ZmMKK3 的亲水性及跨膜结构分析 | 第49-50页 |
| ·关于ZmMKK3 的染色体定位 | 第50页 |
| ·ZmMKK3 的表达特性分析 | 第50-52页 |
| ·ZmMKK3 在大肠杆菌中的表达及抗体制备 | 第52-54页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·重组蛋白的表达及诱导条件优化 | 第53页 |
| ·pET30a-ZmMKK3 重组蛋白的亲和纯化及抗体制备 | 第53-54页 |
| ·间接ELISA 测定抗体的效价 | 第54页 |
| ·ZmMKK3 的亚细胞定位 | 第54-55页 |
| ·植物表达载体pBI121-ZmMKK3-GFP 的构建 | 第54页 |
| ·关于该重组蛋白的亚细胞定位 | 第54-55页 |
| ·过表达ZmMKK3 及组成性激活ZmMKK3 转基因烟草的生理分析 | 第55-61页 |
| ·转基因烟草表达载体pBI121-ZmMKK3 的构建 | 第55-56页 |
| ·转基因烟草的筛选鉴定 | 第56页 |
| ·渗透胁迫条件下转基因烟草的萌发率 | 第56-57页 |
| ·渗透（干旱）胁迫下转基因烟草H_20_2积累的变化 | 第57-58页 |
| ·OE-ZmMKK3 和 DD-ZmMKK3 改善了转基因烟草的酶促抗氧化系统 | 第58-61页 |
| 4 讨论 | 第61-65页 |
| ·玉米中的MAPKKs | 第61-62页 |
| ·玉米B 组MAPKK 基因ZmMKK3 参与ABA、H_20_2的信号转导 | 第62页 |
| ·过表达及组成性激活ZmMKK3 可提高转基因烟草在渗透胁迫下种子的萌发率 | 第62-63页 |
| ·过表达ZmMKK3 基因烟草在渗透胁迫下抗氧化能力提高 | 第63-64页 |
| ·关于ZmMKK3 的亚细胞定位 | 第64-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 攻读硕士学位期间完成的论文 | 第78页 |
