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自然休眠期油桃花芽碳水化合物变化规律及相关基因的表达分析

符号缩写及中英文对照第1-10页
摘要第10-11页
Abstract第11-13页
1 引言第13-39页
   ·休眠概述第13-23页
     ·休眠的进程与分类第13-15页
       ·休眠的研究进程第13-14页
       ·休眠的分类第14-15页
     ·休眠机理研究进程第15-18页
       ·休眠的诱导第15-17页
       ·休眠的解除第17-18页
     ·芽休眠研究第18-23页
       ·激素调节学说第18-19页
       ·呼吸代谢途径学说第19-20页
       ·光系统控制学说第20-21页
       ·代谢物的调节学说第21-22页
       ·基因表达学说第22-23页
   ·碳水化合物及其相关基因的研究第23-27页
     ·碳水化合物及其代谢概述第23-24页
     ·碳水化合物代谢相关酶第24-26页
     ·休眠过程中碳水化合物研究第26-27页
   ·木本植物RNA 提取第27-30页
     ·CTAB 法第27-28页
     ·热硼酸法第28页
     ·异硫氰酸胍法第28页
     ·试剂盒法第28-30页
   ·植物体内差异表达基因的筛选第30-33页
     ·mRNA 差异显示技术第30-31页
     ·RNA 随机引物聚合酶链式反应第31页
     ·代表性差示分析第31-32页
     ·基因表达的序列分析第32页
     ·抑制消减杂交第32页
     ·基因芯片技术第32-33页
   ·本研究所用方法-SSH第33-38页
     ·SSH 技术流程第33-34页
     ·SSH 技术体系评价第34页
     ·SSH 技术在分离植物差异表达基因中的应用第34-38页
       ·应用SSH 技术分离组织特异性表达基因第36页
       ·应用SSH 技术分离与次生代谢物合成相关的特异表达基因第36-37页
       ·应用SSH 技术分离与诱导型表达有关的抗性相关基因第37-38页
         ·生物胁迫诱导的差异基因研究第37-38页
         ·非生物胁迫诱导的差异基因研究第38页
   ·研究目的与意义第38-39页
2 材料与方法第39-54页
   ·实验材料与处理第39页
   ·测定方法第39-42页
     ·自然休眠进程的确定第39-40页
     ·RNA 提取第40-41页
       ·改良CTAB 法第40-41页
       ·Trizol 试剂盒法第41页
     ·荧光定量表达分析第41页
     ·碳水化合物的测定第41-42页
   ·抑制差减杂交技术第42-53页
     ·总RNA 提取第42-43页
     ·去除基因组DNA第43页
     ·mRNA 的纯化第43-44页
     ·cDNA 差减文库构建第44-53页
       ·cDNA 第一链的合成第44-45页
       ·cDNA 第二链的合成第45页
       ·RsaⅠ酶切第45-46页
       ·接头的连接第46-48页
       ·第一轮杂交第48页
       ·第二轮杂交第48-49页
       ·第一次PCR 反应第49-50页
       ·第二次PCR 反应第50-51页
       ·应用T/A 克隆法构建正反向差减文库第51-52页
         ·PCR 反应产物的纯化第51页
         ·差减cDNA 片段与pEASYTM-T3 Cloning(TransGen Biotech)载体连接第51-52页
         ·连接产物的转化第52页
         ·差减cDNA 文库的构建第52页
       ·DNA 测序和序列分析第52-53页
   ·数据处理第53-54页
3 结果与分析第54-62页
   ·桃芽自然休眠进程的确定第54页
   ·RNA 质量检测第54-55页
   ·休眠期间碳水化合物含量变化第55-56页
   ·与碳水化合物代谢有关的基因的表达变化第56-57页
   ·低温条件下有关基因的转录表达变化第57-58页
   ·SSH 结果分析第58-62页
     ·改良CTAB 法提取RNA第58页
     ·双链cDNA(dscDNA)合成与RsaⅠ酶切效率检测第58-59页
     ·两次PCR 产物分析第59-60页
     ·差减文库的构建及阳性克隆的筛选第60页
     ·测序及功能分类第60-62页
4 讨论第62-66页
   ·桃树花芽总RNA 的提取第62页
   ·休眠期间碳水化合物含量变化第62-63页
   ·与碳水化合物代谢有关的基因的含量变化第63-64页
   ·cDNA 文库的筛选及分析第64-66页
5 结论第66-67页
参考文献第67-86页
致谢第86-87页
攻读学位期间发表的学术论文第87-88页
硕士学位论文内容简介及自评第88页

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