符号缩写及中英文对照 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-39页 |
·休眠概述 | 第13-23页 |
·休眠的进程与分类 | 第13-15页 |
·休眠的研究进程 | 第13-14页 |
·休眠的分类 | 第14-15页 |
·休眠机理研究进程 | 第15-18页 |
·休眠的诱导 | 第15-17页 |
·休眠的解除 | 第17-18页 |
·芽休眠研究 | 第18-23页 |
·激素调节学说 | 第18-19页 |
·呼吸代谢途径学说 | 第19-20页 |
·光系统控制学说 | 第20-21页 |
·代谢物的调节学说 | 第21-22页 |
·基因表达学说 | 第22-23页 |
·碳水化合物及其相关基因的研究 | 第23-27页 |
·碳水化合物及其代谢概述 | 第23-24页 |
·碳水化合物代谢相关酶 | 第24-26页 |
·休眠过程中碳水化合物研究 | 第26-27页 |
·木本植物RNA 提取 | 第27-30页 |
·CTAB 法 | 第27-28页 |
·热硼酸法 | 第28页 |
·异硫氰酸胍法 | 第28页 |
·试剂盒法 | 第28-30页 |
·植物体内差异表达基因的筛选 | 第30-33页 |
·mRNA 差异显示技术 | 第30-31页 |
·RNA 随机引物聚合酶链式反应 | 第31页 |
·代表性差示分析 | 第31-32页 |
·基因表达的序列分析 | 第32页 |
·抑制消减杂交 | 第32页 |
·基因芯片技术 | 第32-33页 |
·本研究所用方法-SSH | 第33-38页 |
·SSH 技术流程 | 第33-34页 |
·SSH 技术体系评价 | 第34页 |
·SSH 技术在分离植物差异表达基因中的应用 | 第34-38页 |
·应用SSH 技术分离组织特异性表达基因 | 第36页 |
·应用SSH 技术分离与次生代谢物合成相关的特异表达基因 | 第36-37页 |
·应用SSH 技术分离与诱导型表达有关的抗性相关基因 | 第37-38页 |
·生物胁迫诱导的差异基因研究 | 第37-38页 |
·非生物胁迫诱导的差异基因研究 | 第38页 |
·研究目的与意义 | 第38-39页 |
2 材料与方法 | 第39-54页 |
·实验材料与处理 | 第39页 |
·测定方法 | 第39-42页 |
·自然休眠进程的确定 | 第39-40页 |
·RNA 提取 | 第40-41页 |
·改良CTAB 法 | 第40-41页 |
·Trizol 试剂盒法 | 第41页 |
·荧光定量表达分析 | 第41页 |
·碳水化合物的测定 | 第41-42页 |
·抑制差减杂交技术 | 第42-53页 |
·总RNA 提取 | 第42-43页 |
·去除基因组DNA | 第43页 |
·mRNA 的纯化 | 第43-44页 |
·cDNA 差减文库构建 | 第44-53页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第44-45页 |
·cDNA 第二链的合成 | 第45页 |
·RsaⅠ酶切 | 第45-46页 |
·接头的连接 | 第46-48页 |
·第一轮杂交 | 第48页 |
·第二轮杂交 | 第48-49页 |
·第一次PCR 反应 | 第49-50页 |
·第二次PCR 反应 | 第50-51页 |
·应用T/A 克隆法构建正反向差减文库 | 第51-52页 |
·PCR 反应产物的纯化 | 第51页 |
·差减cDNA 片段与pEASYTM-T3 Cloning(TransGen Biotech)载体连接 | 第51-52页 |
·连接产物的转化 | 第52页 |
·差减cDNA 文库的构建 | 第52页 |
·DNA 测序和序列分析 | 第52-53页 |
·数据处理 | 第53-54页 |
3 结果与分析 | 第54-62页 |
·桃芽自然休眠进程的确定 | 第54页 |
·RNA 质量检测 | 第54-55页 |
·休眠期间碳水化合物含量变化 | 第55-56页 |
·与碳水化合物代谢有关的基因的表达变化 | 第56-57页 |
·低温条件下有关基因的转录表达变化 | 第57-58页 |
·SSH 结果分析 | 第58-62页 |
·改良CTAB 法提取RNA | 第58页 |
·双链cDNA(dscDNA)合成与RsaⅠ酶切效率检测 | 第58-59页 |
·两次PCR 产物分析 | 第59-60页 |
·差减文库的构建及阳性克隆的筛选 | 第60页 |
·测序及功能分类 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-66页 |
·桃树花芽总RNA 的提取 | 第62页 |
·休眠期间碳水化合物含量变化 | 第62-63页 |
·与碳水化合物代谢有关的基因的含量变化 | 第63-64页 |
·cDNA 文库的筛选及分析 | 第64-66页 |
5 结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第87-88页 |
硕士学位论文内容简介及自评 | 第88页 |