| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-27页 |
| ·抗生素及细菌耐药 | 第9-11页 |
| ·Beta-内酰胺类抗生素及其耐药性 | 第11-13页 |
| ·Beta-内酰胺酶 | 第13-15页 |
| ·金属beta-内酰胺酶 | 第15-18页 |
| ·Beta-内酰胺酶动力学 | 第18-20页 |
| ·Beta-内酰胺酶的光敏底物 | 第20-21页 |
| ·选题意义及研究内容 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-27页 |
| 第二章 金属beta-内酰胺酶ImiS的表达纯化及光谱研究 | 第27-43页 |
| ·实验材料及仪器 | 第27-29页 |
| ·菌和质粒 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27-28页 |
| ·主要仪器及型号 | 第28-29页 |
| ·金属beta-内酰胺酶ImiS的表达纯化及鉴定 | 第29-34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·质粒转移大肠杆菌BL21(DE3) | 第30页 |
| ·ImiS的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·ImiS粗蛋白的分离纯化 | 第31-32页 |
| ·SDS-PAGE鉴定ImiS及监测表达纯化过程 | 第32-34页 |
| ·ImiS的浓缩、浓度测定与保存 | 第34页 |
| ·ImiS诱导条件的优化 | 第34页 |
| ·金属beta-内酰胺酶ImiS的光谱表征 | 第34-35页 |
| ·蛋白的紫外和荧光光谱表征 | 第34-35页 |
| ·蛋白脱盐及其分子量的MALDI-TOF MS测定 | 第35页 |
| ·金属beta-内酰胺酶ImiS的表达纯化及光谱研究结果 | 第35-41页 |
| ·粗蛋白的分离纯化 | 第35-37页 |
| ·ImiS的表达纯化过程监测 | 第37页 |
| ·ImiS的浓缩、浓度测定及产率计算 | 第37页 |
| ·ImiS诱导条件的优化 | 第37-39页 |
| ·ImiS的紫外和荧光光谱表征 | 第39-40页 |
| ·ImiS的MALDI-TOF MS表征 | 第40-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-43页 |
| 第三章 金属beta-内酰胺酶ImiS催化抗生素水解的动力学研究 | 第43-64页 |
| ·实验材料及仪器 | 第43-44页 |
| ·抗生素及抑制剂 | 第43页 |
| ·其他试剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器及型号 | 第44页 |
| ·ImiS水解抗生素的动力学研究 | 第44-46页 |
| ·最佳检测波长的确定 | 第44-45页 |
| ·动力学测定条件的确定 | 第45-46页 |
| ·动力学测定及数据处理 | 第46页 |
| ·Marinopyrrole A抑制ImiS水解法罗培南的动力学研究 | 第46-48页 |
| ·Marinopyrrole A抑制ImiS水解法罗培南的动力学测定 | 第46-48页 |
| ·ImiS水解法罗培南的酶活研究 | 第48-50页 |
| ·酶活性评价 | 第48页 |
| ·pH对ImiS酶活的影响 | 第48-49页 |
| ·温度对ImiS酶活的影响 | 第49-50页 |
| ·底物浓度对ImiS酶活的影响 | 第50页 |
| ·ImiS水解抗生素的动力学及酶活研究的结果与讨论 | 第50-62页 |
| ·最佳检测波长的确定 | 第51-52页 |
| ·动力学测定条件的确定 | 第52页 |
| ·ImiS催化beta-内酰胺类抗生素水解反应的动力学结果 | 第52-57页 |
| ·酶抑制动力学结果 | 第57-59页 |
| ·酶活定性结果 | 第59页 |
| ·pH对ImiS酶活的影响 | 第59-60页 |
| ·温度对ImiS酶活的影响 | 第60-61页 |
| ·底物浓度对ImiS酶活的影响 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-64页 |
| 第四章 金属beta-内酰胺酶光敏底物ACLE衍生物的合成表征及活性研究 | 第64-86页 |
| ·试剂与仪器 | 第65-66页 |
| ·特殊试剂 | 第65页 |
| ·仪器 | 第65页 |
| ·试剂 | 第65-66页 |
| ·ACLE衍生物的合成与表征 | 第66-69页 |
| ·香豆素-3-羧酸的合成与表征 | 第66页 |
| ·ACLE衍生物的合成与表征 | 第66-69页 |
| ·ACLE衍生物的生物活性研究 | 第69-72页 |
| ·ACLE衍生物的紫外、荧光光谱及荧光量子效率测定 | 第69页 |
| ·ACLE衍生物的MIC测定 | 第69-70页 |
| ·ACLE衍生物的荧光标记研究 | 第70页 |
| ·金属beta-内酰胺酶催化ACLE衍生物水解的紫外及荧光光谱表征 | 第70-71页 |
| ·金属beta-内酰胺酶催化ACLE衍生物水解的动力学研究 | 第71-72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-84页 |
| ·ACLE衍生物的合成与表征 | 第72-73页 |
| ·ACLE衍生物的生物活性研究 | 第73-84页 |
| ·本章小结 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-86页 |
| 全文总结 | 第86-87页 |
| 附录 | 第87-93页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
