| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-29页 |
| ·安莎类抗生素简介 | 第13页 |
| ·格尔德霉素的抗肿瘤和抗病毒作用 | 第13-15页 |
| ·格尔德霉素的生物合成 | 第15-17页 |
| ·链霉菌次级代谢的调控机制 | 第17-18页 |
| ·LuxR家族调控基因 | 第18-20页 |
| ·TR-PCR技术简介 | 第20-25页 |
| ·启动子的研究方法 | 第25-28页 |
| ·论文立题方向 | 第28-29页 |
| 实验材料 | 第29-34页 |
| ·生物信息学分析工具 | 第29页 |
| ·菌种 | 第29页 |
| ·载体 | 第29页 |
| ·特殊试剂以及化学试剂 | 第29-30页 |
| ·实验仪器 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30-33页 |
| ·常用缓冲液 | 第33-34页 |
| 实验方法 | 第34-40页 |
| 1.大肠杆菌质粒DNA小量提取 | 第34页 |
| 2.链霉菌质粒DNA的提前 | 第34页 |
| 3.链霉菌S.lividansTK24原生质体的制备、再生及DNA转化 | 第34-35页 |
| 4.大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35页 |
| 5.质粒DNA转化大肠杆菌 | 第35页 |
| 6.DNA电泳及片段回收 | 第35-36页 |
| 7.DNA限制酶切和连接反应 | 第36页 |
| 8.菌浓的测定方法 | 第36页 |
| 9.生物效价的测定方法 | 第36页 |
| 10.发酵培养物的提取 | 第36页 |
| 11.RNA提前实验器具的处理与准备 | 第36页 |
| 12.链霉菌总RNA的提取 | 第36-37页 |
| 13.总RNA定量 | 第37页 |
| 14.总RNA的纯化 | 第37页 |
| 15.PCR反应 | 第37-38页 |
| 16.两步法RT-PCR | 第38-39页 |
| 17.色谱分析方法 | 第39-40页 |
| 结果与讨论 | 第40-60页 |
| 第一部分 gdmRⅠ和gdmRⅡ调节基因在转录水平上的研究 | 第40-52页 |
| ·吸水链霉菌17997发酵培养基的选择 | 第40-41页 |
| ·吸水链霉菌17997生理代谢的研究 | 第41-43页 |
| ·RT-PCR检测原株中gdmRⅠ和gdmRⅡ的转录活性 | 第43-48页 |
| ·分析、设计RT-PCR引物 | 第43-44页 |
| ·吸水链霉菌17997不同培养时间总RNA的提取 | 第44-48页 |
| ·RT-PCR检测GDM主要生物合成基因在原株中的转录活性 | 第48-50页 |
| ·RT-PCR检测GDM主要生物合成基因在调节基因阻断株中的转录活性 | 第50-52页 |
| 第二部分 转录调节基因gdmRⅠ和gdmRⅡ启动子的初步定位 | 第52-60页 |
| ·不同长度的启动子调节引物设计 | 第52-55页 |
| ·不同长度的启动子报告载体的构建和验证 | 第55-58页 |
| ·TK24转化子的卡那霉素抗性检测 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65-69页 |
